黃 月，單平陽，孟 哲，王 磊

(唐山市食品藥品檢驗(yàn)中心，河北唐山 063000)

有機(jī)磷類農(nóng)藥(organophosphorus pesticides,OPPs)是當(dāng)前使用最廣泛的三類農(nóng)藥之一，具有高效、廣譜等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，其殺蟲作用機(jī)制是抑制昆蟲膽堿酯酶的活性。有機(jī)磷農(nóng)藥的大量使用對人類、動物和環(huán)境造成了極大的危害。為此，世界各國投入大量資金、人力和物力，一方面加強(qiáng)無公害綠色農(nóng)藥的研制開發(fā)和應(yīng)用；另一方面制定愈來愈嚴(yán)格的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)來控制食品的質(zhì)量，使食品的安全性得到提高[1-6]。因此加強(qiáng)對有機(jī)磷農(nóng)藥檢測方法的研究，特別是快速、靈敏、準(zhǔn)確和簡便的檢測方法，對保護(hù)生態(tài)環(huán)境和保障人類健康有著重要意義。

凝膠滲透色譜-氣相色譜-質(zhì)譜(GPC-GC-MS)是將凝膠滲透色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的同步分析檢測技術(shù)，不但具有抗基質(zhì)干擾能力強(qiáng)、靈敏度高、分析速度快的優(yōu)點(diǎn)，而且該檢測方法采用了選擇性離子監(jiān)測(SIM)快速測定的模式，做到了真正快速GC-MS分析，擁有更寬的質(zhì)量檢測范圍，簡化了操作步驟，節(jié)約了試劑，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠，避免了假陽性檢測結(jié)果[7-10]。筆者基于凝膠滲透色譜(GPC)對花生仁樣品分離凈化，采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)，建立了一種適用花生仁中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測定方法，為農(nóng)藥殘留的安全評估提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1試材花生仁，唐山潤澤糧油食品有限公司提供；濃度均為1.0 mg/mL的14種有機(jī)磷混標(biāo)，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司；正己烷、乙腈、乙酸乙酯、環(huán)己烷(均為色譜純)，優(yōu)級純氯化鈉，TEDIA公司；氦氣，純度>99.99%。

1.2儀器Thermofisher ISQ 型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國Finnigan公司；TG-1701MS彈性石英毛細(xì)管(30 m×0.25 mm×0.25 μm)色譜柱，美國Thermo Scientific公司；分析天平FA1104N，北京北科恒信科學(xué)器材有限公司；漩渦混合器HMS-350，天津恒奧科技發(fā)展有限公司；GPC凝膠色譜儀，美國J2 Science公司。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。

1.3.1.1單標(biāo)儲備液。配制14種有機(jī)磷單標(biāo)儲備液，其質(zhì)量濃度均為100.0 μg/mL，4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.1.2混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備。將標(biāo)準(zhǔn)儲備液用正己烷稀釋至濃度為0.1、0.5、1.0、2.0、4.0、10.0 μg/mL的有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2樣品前處理。準(zhǔn)確稱取1 kg花生仁樣品，放入高速粉碎機(jī)中粉碎制成待測樣，取20 g至50 mL的離心管中，加入25 mL乙腈，在10 000 r/min均質(zhì)器高速勻漿2 min，濾紙過濾至裝有5 g氯化鈉的50 mL比色管，漩渦混勻靜置20 min待分層，吸取上清液10 mL至GPC進(jìn)樣瓶，40 ℃水浴下氮吹濃縮至近干，用乙酸乙酯∶環(huán)己烷(體積比1∶1)定容至10.0 mL，渦旋混合2 min，0.45 μm濾膜過濾，濾液經(jīng)凝膠滲透色譜裝置凈化，收集流出液，減壓濃縮至2.0 mL，進(jìn)行GC-MS分析。

1.3.3GC-MS分析條件。

1.3.3.1GC條件。 TG-1701MS色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度250 ℃；柱溫：初始溫度60 ℃，保持1 min，以30 ℃/min升溫至160 ℃，保持1 min，以2 ℃/min升溫至220 ℃，保持2 min，再以20 ℃/min升溫至280 ℃，保持4 min；載氣：氦氣(純度≥99.999%)，流速1.5 mL/min；進(jìn)樣量1 μL，不分流進(jìn)樣。

1.3.3.2MS條件。EI源溫度230 ℃；電子能量70 eV；傳輸線溫度280 ℃；選擇性離子掃描模式(SIM)；溶劑延遲5 min。

2 結(jié)果與分析

2.1定性分析根據(jù)該試驗(yàn)所確定的分析條件，將質(zhì)量濃度均為1.0 μg/mL的14種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，以保留時間定性，GC-MS總離子流圖見圖1；OPPs具體的定性和定量離子見表1。

從圖1可以看出，14種化合物能在44 min內(nèi)有效地分開，峰型尖銳，對稱性好，出峰附近都沒干擾峰，各峰間隔適宜，是理想的色譜檢測條件。

序號No.組分名稱Component name碰撞能Collision energy∥eV保留時間Retention time∥min定量離子Quantitative ions定性離子Qualitative ions1甲胺磷155.88141952敵敵畏209.82185933乙酰甲胺磷1011.83136944氧化樂果1412.821561105甲拌磷1714.77121656樂果2515.83125797甲基毒死蜱1218.78286938甲基對硫磷1022.992631099殺螟硫磷1527.7327726010馬拉硫磷1528.281279911毒死蜱2029.1019716912對硫磷1029.991098113水胺硫磷2236.2713610814三唑磷2039.91161134

2.2線性關(guān)系與檢出限依次測定質(zhì)量濃度為0.1、0.5、1.0、2.0、4.0、10.0 μg/mL的OPPs混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性擬合。以基線噪聲(S=3N)確定方法的檢出限(LOD)，結(jié)果見表2。由表2可知，在0.1～10.0 μg/mL質(zhì)量濃度時各組分線性關(guān)系較好，相關(guān)系數(shù)(r)在0.999以上，LOD為0.01～0.05 mg/kg。

表2 OPPs化合物的回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限

2.3回收率與精密度在1.0 g花生仁制備液中分別加入OPPs化合物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，使添加水平分別為1.0、2.0、4.0 mg/kg，每個水平平行測定3次，結(jié)果見表3。由表3可知，平均回收率為80.9%～98.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.0%～6.7%，表明該方法重現(xiàn)性較好，準(zhǔn)確可靠。

表3 OPPs化合物的加標(biāo)回收率和RSD

3 結(jié)論

(1)采用凝膠滲透色譜(GPC)凈化系統(tǒng)，氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)技術(shù)，建立了花生仁中14種OPPs化合物的檢測分析方法。

(2)OPPs化合物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在0.1～10.0 mg/L質(zhì)量濃度時各組分線性關(guān)系較好，相關(guān)系數(shù)(r)在0.999以上；方法檢出限為0.01～0.05 mg/kg。

(3)添加水平為1.0、2.0、4.0 mg/kg時，平均回收率為80.9%～98.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.0%～6.7%。

(4)該方法具有樣品前處理簡單、快捷、去除雜質(zhì)效果好、靈敏度高、方法重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，可用于花生仁中OPPs化合物的檢測。