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        冷應(yīng)激對(duì)雛鵪鶉胸腺組織抗氧化功能的影響

        2018-08-25 09:04:08劉春朋
        飼料博覽 2018年8期
        關(guān)鍵詞:鵪鶉胸腺日齡

        劉春朋,付 晶*

        (1.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院,廣州 510225;2.廣東省水禽健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州 510225)

        溫度應(yīng)激是制約畜牧生產(chǎn)的一個(gè)主要因素,尤其是在北方地區(qū),冷應(yīng)激是一個(gè)影響畜禽健康的普遍應(yīng)激源。冷應(yīng)激可以引起畜禽尤其是幼畜或仔畜的能量代謝紊亂、免疫機(jī)能下降、抗氧化功能受損、生產(chǎn)性能下降甚至死亡[1]。鵪鶉代謝旺盛,繁殖周期短,是一種高產(chǎn)高效的特禽,但其生物學(xué)特性比較特殊,鵪鶉在飼養(yǎng)過(guò)程中對(duì)環(huán)境溫度的要求是相對(duì)嚴(yán)格的,尤其是育雛期的溫度要比雞高,因此更容易受到冷應(yīng)激的影響[2]。

        胸腺是禽類(lèi)免疫系統(tǒng)中重要的淋巴器官,參與細(xì)胞免疫的過(guò)程,是T細(xì)胞分化、發(fā)育、產(chǎn)生的場(chǎng)所,在整個(gè)免疫系統(tǒng)中起著中樞作用。胸腺如果受到損失,則會(huì)引起機(jī)體免疫機(jī)能發(fā)生障礙[3]。已有研究表明,熱應(yīng)激可以引起雛雞胸腺組織形態(tài)損傷,發(fā)生細(xì)胞凋亡[4]。此外也有研究表明,冷應(yīng)激可以引起畜禽機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激損傷[5]。而目前關(guān)于冷應(yīng)激對(duì)雛鵪鶉胸腺組織抗氧化功能的影響未見(jiàn)報(bào)道。因此,文章研究以1日齡雛鵪鶉為研究對(duì)象,通過(guò)對(duì)雛鵪鶉胸腺組織抗氧化能力的檢測(cè),探討冷應(yīng)激導(dǎo)致禽類(lèi)免疫功能下降的作用機(jī)制,以期為更好地研究鵪鶉內(nèi)環(huán)境打下基礎(chǔ),也為探索促進(jìn)禽類(lèi)冷適應(yīng)的方法,提高禽類(lèi)的抗寒能力提供理論依據(jù)。

        1 試驗(yàn)材料

        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

        1日齡健康沙維瑪特肉用公鵪鶉360只,購(gòu)自哈爾濱萬(wàn)家特禽養(yǎng)殖合作社。

        1.2 主要試劑

        考馬斯亮藍(lán)、MDA含量檢測(cè)試劑盒、SOD活性檢測(cè)試劑盒、GSH-Px活性檢測(cè)試劑盒,均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

        1.3 主要儀器

        日立研究型雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(型號(hào)為U-3900&3900H),購(gòu)自?xún)x德科學(xué)儀器有限公司。

        2 方法

        2.1 冷應(yīng)激模型的建立

        2.1.1 急性冷應(yīng)激試驗(yàn)

        急性冷應(yīng)激試驗(yàn)將180只1日齡沙威瑪特肉用鵪鶉飼養(yǎng)至15日齡,隨機(jī)分為6組,每組30只。對(duì)照組冷應(yīng)激0 h(即放在鵪鶉正常育雛期所需溫度34±1℃的舍內(nèi)飼養(yǎng)),其余5組分別進(jìn)行冷應(yīng)激處理,即把鵪鶉置于(12±1)℃的舍內(nèi)飼養(yǎng),飼養(yǎng)時(shí)間分別為0.5、1、3、6、12 h。在各時(shí)間隨機(jī)選取10只進(jìn)行剖殺,并采集法氏囊組織用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

        2.1.2 慢性冷應(yīng)激試驗(yàn)

        慢性冷應(yīng)激試驗(yàn)將180只1日齡沙威瑪特肉用鵪鶉飼養(yǎng)至15日齡,隨機(jī)分為6組,每組30只。前3組為對(duì)照組,即正常溫度下分別飼養(yǎng)5、10、20 d后剖殺;其余3組為應(yīng)激組,分別于(12±1)℃冷應(yīng)激環(huán)境下飼養(yǎng)5、10、20 d后剖殺取樣。

        整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中,各組雛鵪鶉均自由飲水和采食,并按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫。

        2.2 胸腺組織抗氧化功能的檢測(cè)

        按照各試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,并在相應(yīng)的波長(zhǎng)處用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行讀數(shù)。用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定總蛋白含量;用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)SOD活性;用DTNB顯色法檢測(cè)GSH-Px活性;用硫代巴比妥酸法檢測(cè)MDA含量。

        2.3 統(tǒng)計(jì)分析

        試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件One Way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并進(jìn)行Duncan's多重比較,結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

        3 結(jié)果與分析

        3.1 急性冷應(yīng)激時(shí)胸腺組織抗氧化能力的變化

        急性冷應(yīng)激時(shí)胸腺組織抗氧化能力的變化見(jiàn)圖1A~1C。

        圖1 急性冷應(yīng)激對(duì)胸腺組織抗氧化能力的影響

        由圖1A可知,急性冷應(yīng)激時(shí)胸腺組織中GSHPx活性呈波動(dòng)性變化,與對(duì)照組相比,冷應(yīng)激0.5、1、3 h時(shí),胸腺組織中GSH-Px活性顯著增加(P<0.05),6和12 h時(shí)GSH-Px的活性顯著下降(P<0.05)。由圖1B可知,急性冷應(yīng)激時(shí)胸腺組織SOD的活性隨著冷應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì),與對(duì)照組相比,各時(shí)間點(diǎn)均顯著下降(P<0.05)。由圖1C可知,急性冷應(yīng)激導(dǎo)致胸腺組織中MDA含量呈上升趨勢(shì),與對(duì)照組相比,除0.5 h以外,其他各時(shí)間MDA含量均顯著升高(P<0.05)。

        3.2 慢性冷應(yīng)激時(shí)胸腺組織抗氧化能力的變化

        慢性冷應(yīng)激時(shí)胸腺組織抗氧化能力的變化見(jiàn)圖2A~2C。

        圖2 慢性冷應(yīng)激對(duì)胸腺組織抗氧化能力的影響

        由圖2A和2B可知,慢性冷應(yīng)激導(dǎo)致胸腺組織中GSH-Px和SOD活性呈下降趨勢(shì),且具有時(shí)間效應(yīng)。在5、10、20 d時(shí)GSH-Px和SOD活性均顯著低于對(duì)應(yīng)的對(duì)照組(P<0.05);由圖2C可以看出,MDA含量隨著冷應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng)而呈上升趨勢(shì),在5、10、20 d時(shí)MDA含量均顯著高于對(duì)應(yīng)的對(duì)照組(P<0.05)。

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