徐樂藝，張麗媛，郭宇歡，顏佳薇，陳紅梅，何緒生，何 玲*

（西北農(nóng)林科技大學(xué)園藝學(xué)院，陜西 楊凌 712100）

甜櫻桃（Prunus avium）采收于鮮果淡季，因其風(fēng)味香甜可口而深受消費(fèi)者的青睞。此外，果肉中含鐵量比蘋果高20～30 倍，加之富含褪黑素[1]、維生素、花青素等抗氧化生物素，有“水果中的鉆石”的美譽(yù)。但甜櫻桃皮薄肉軟，采收正值高溫高濕季節(jié)，在貯運(yùn)過(guò)程中極易受致病性微生物侵染而滋生病害導(dǎo)致褐變與腐爛?；颐共∈翘饳烟也珊蟪Ｒ姷那秩拘圆『χ?，其病原菌灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）具有低溫致病的優(yōu)勢(shì)，在低溫貯運(yùn)中發(fā)病率仍然較高[2]。研究表明，灰霉病與果實(shí)中鈣含量密切相關(guān)，鈣處理能夠激活果實(shí)自身的防御系統(tǒng)及固有的抗菌物質(zhì)活性，誘導(dǎo)果實(shí)產(chǎn)生抗性，降低和抑制病原菌的侵染[3-5]。山梨酸是國(guó)際公認(rèn)的高效、綠色、安全的防腐劑[6]，其鉀鹽山梨酸鉀易溶于水，具有廣譜的抑菌效果，對(duì)霉菌及好氧性細(xì)菌均有效強(qiáng)的抑制作用[7]。目前已有報(bào)道山梨酸鉀對(duì)蘋果[8]、葡萄[9]、柑橘[10]等果實(shí)的多種病害具有良好的誘導(dǎo)抗性效果，但對(duì)櫻桃灰霉病的抑制效果卻鮮有報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)離體實(shí)驗(yàn)篩選出山梨酸鉀及CaCl2處理的最佳質(zhì)量濃度，再將采前噴鈣和采后山梨酸鉀處理相結(jié)合，探討該處理誘導(dǎo)櫻桃果實(shí)對(duì)灰霉菌產(chǎn)生抗性的效果，為甜櫻桃貯運(yùn)保鮮提供新的解決方案。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

‘秦櫻1號(hào)’甜櫻桃于2016年5月18日采收于西北農(nóng)林科技大學(xué)銅川櫻桃實(shí)驗(yàn)站。采收時(shí)盡量保持色澤、大小一致，且無(wú)明顯機(jī)械損傷及病蟲害，裝在聚乙烯（polyethylene，PE）包裝袋（厚度0.03 mm）放入塑料箱中運(yùn)回冷庫(kù)，在（0±1）℃條件下預(yù)冷24 h后備用。

灰葡萄孢霉購(gòu)自西北農(nóng)林科技大學(xué)植保學(xué)院。

山梨酸鉀、CaCl2、葡萄糖、瓊脂、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、次氯酸鈉、鄰苯二酚、愈創(chuàng)木酚、過(guò)氧化氫等均為國(guó)產(chǎn)分析純，購(gòu)買于上海源葉生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

BD-11D型冰箱 安徽中科都菱公司；HHW-21CU-600型恒溫水浴鍋 國(guó)華電器有限公司；SX-500高壓蒸汽滅菌鍋 日本TOMY公司；DC1212型高速冷凍離心機(jī) 北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司；UV2002型紫外-可見分光光度計(jì) 北京普析通用儀器公司；LR250恒溫生化培養(yǎng)箱 上海軋艮儀器設(shè)備有限公司；WCLL-230BE電熱鼓風(fēng)干燥箱 天津市泰斯特儀器有限公司；電子數(shù)顯游標(biāo)卡尺 桂林廣陸數(shù)字測(cè)控股份有限公司；JSM-6360LV掃描電子顯微鏡 日本電子株式會(huì)社；SW-CJ-2FD型雙人單面凈化工作臺(tái) 蘇州蘇凈有限公司。

1.3 方法

1.3.1 孢子懸浮液的制備

灰霉菌在23 ℃ PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)7 d后挑取灰霉菌孢子，加入無(wú)菌水充分?jǐn)嚢韬筮^(guò)濾。在紅血球計(jì)數(shù)板上調(diào)整菌懸液的孢子濃度達(dá)到1×106spores/mL。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)處理

1.3.2.1 離體實(shí)驗(yàn)

將PDA經(jīng)滅菌后冷卻至45 ℃左右，加入一定比例的藥劑混勻，制成CaCl2質(zhì)量濃度為5、10、15、20 g/L及山梨酸鉀質(zhì)量濃度為1、3、5、7 g/L的平板，以不加入任何藥劑為對(duì)照處理（CK組）。每組處理重復(fù)3 次，平板凝固后，用滅菌打孔器在中央打孔（直徑6.0 mm）并滴入20 μL菌懸液，在23 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天測(cè)定一組數(shù)據(jù)，直至CK組菌落長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿。

用上述離體實(shí)驗(yàn)篩選出最佳質(zhì)量濃度的CaCl2與山梨酸鉀及二者復(fù)合處理制成平板，以不添加藥劑的PDA培養(yǎng)基為對(duì)照（CK組），取20 μL孢子懸浮液滴在無(wú)菌載玻片中央，凝固后滴入10 μL菌懸液，蓋上蓋玻片后于23 ℃下培養(yǎng)，每組處理重復(fù)3 次。每天用掃描電子顯微鏡觀察灰霉菌芽管生長(zhǎng)及分生孢子的萌發(fā)情況，拍照并記錄。

1.3.2.2 活體接種實(shí)驗(yàn)

先用體積分?jǐn)?shù)2%次氯酸鈉浸泡甜櫻桃果實(shí)2 min，無(wú)菌水沖洗3 次后晾干。實(shí)驗(yàn)分為4 組處理：對(duì)照組（未處理，CK組）、CaCl2處理組（采前噴20 g/L CaCl2）、山梨酸鉀處理組（僅采后5 g/L山梨酸鉀浸泡2 min）、CaCl2+山梨酸鉀處理組（采前20 g/L CaCl2處理，采后5 g/L山梨酸鉀浸泡2 min）。用滅菌的牙簽在甜櫻桃果面刺3 mm的傷口，傷口表面晾干后，滴入10 μL無(wú)菌水。24 h后，在傷口處滴入10 μL灰霉孢子懸浮液，放置于室溫（23±1）℃下。每天測(cè)定一次數(shù)據(jù)，直至病菌布滿果面，取病斑周圍的果肉留樣待測(cè)相關(guān)酶活力指標(biāo)。每組處理放置20 個(gè)果實(shí)，設(shè)置3 個(gè)重復(fù)。

1.3.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.3.1 菌絲生長(zhǎng)抑制率、芽管生長(zhǎng)抑制率及分生孢子萌發(fā)抑制率的測(cè)定

采用十字交叉法[11]測(cè)量（菌落直徑為測(cè)量值減0.6）菌落直徑。用第3天時(shí)的病斑直徑來(lái)計(jì)算菌絲的生長(zhǎng)抑制率，具體見式（1）。

用Auto CAD 2017軟件測(cè)量芽管長(zhǎng)度，以第1天時(shí)在掃描電子顯微鏡下拍照記錄的芽管長(zhǎng)度來(lái)計(jì)算芽管生長(zhǎng)抑制率，具體見式（2）。

孢子萌發(fā)抑制率以第1天時(shí)在電子顯微鏡下觀察到的孢子萌發(fā)情況來(lái)計(jì)算，參照徐大勇等[12]的方法。每個(gè)處理分別取3 個(gè)視野進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，孢子芽管長(zhǎng)度大于孢子直徑的1/2為萌發(fā)，統(tǒng)計(jì)孢子總數(shù)及萌發(fā)孢子數(shù)，按式（3）計(jì)算萌發(fā)抑制率。

1.3.3.2 病斑直徑及發(fā)病率的測(cè)定

每天統(tǒng)計(jì)病斑直徑，病斑直徑采用十字交叉法，取平均值；病斑直徑若大于0.5 mm則確定為發(fā)病。發(fā)病率計(jì)算見式（4）。

1.3.3.3 抗性酶活力的測(cè)定

多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）、過(guò)氧化物酶（peroxldase，POD）、幾丁質(zhì)酶（chitinase，CHI）、β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-glucanase，GLU）活力測(cè)定參照曹建康等[13]的方法。

丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量測(cè)定參照高俊鳳[14]的方法，結(jié)果以鮮質(zhì)量計(jì)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用OriginPro 9.0軟件整理并進(jìn)行方差分析，用Duncan’s做差異顯著性檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同質(zhì)量濃度CaCl2與山梨酸鉀處理對(duì)灰霉菌菌絲生長(zhǎng)的抑制

表 1 不同質(zhì)量濃度CaCl2與山梨酸鉀溶液處理對(duì)離體灰霉菌菌絲生長(zhǎng)的抑制Table 1 Antifungal effect of different CaCl2 and potassium sorbate concentrations on Botrytis cinerea

由表1可看出，各質(zhì)量濃度CaCl2處理與0 g/L CaCl2相比對(duì)菌絲生長(zhǎng)均有抑制作用，其中20 g/L CaCl2處理組菌絲生長(zhǎng)抑制率最大，且與其他CaCl2處理組相比差異顯著（P＜0.05）。山梨酸鉀處理組在各質(zhì)量濃度水平下抑制菌絲生長(zhǎng)的效果差異顯著，隨著山梨酸鉀質(zhì)量濃度的升高，對(duì)灰霉菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果逐漸增強(qiáng)，在第4天時(shí)，5、7 g/L山梨酸鉀處理對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率分別為98.18%和100.00%，與1 g/L和3 g/L山梨酸鉀處理組差異顯著（P＜0.05）。5 g/L山梨酸鉀處理組菌絲在前3 d未生長(zhǎng)，且4 d時(shí)菌絲生長(zhǎng)抑制率與7 g/L山梨酸鉀處理之間差異不顯著（P＞0.05）。因此采用采前噴20 g/L CaCl2和采后5 g/L山梨酸鉀浸泡的方式進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.2 CaCl2與山梨酸鉀處理對(duì)灰霉菌芽管生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的抑制

圖 1 不同處理對(duì)培養(yǎng)1 d的灰霉菌芽管生長(zhǎng)（A）和孢子萌發(fā)（B）的抑制作用Fig. 1 Inhibitory effects of different treatments on germ tube growth (A)and spore germination (B) on Botrytis cinerea after 1 day

從圖1可以看出，灰霉菌經(jīng)不同處理培養(yǎng)1 d后，與CK組相比，不同處理對(duì)灰霉菌孢子萌發(fā)及芽管生長(zhǎng)的抑制程度不同。山梨酸鉀處理組

的芽管長(zhǎng)度僅為21 μm，山梨酸鉀處理組與CaCl2+山梨酸鉀處理組的抑制率高達(dá)94%與100%，抑制效果均顯著高于CaCl2處理組（P＜0.05）；如圖1B所示，培養(yǎng)1 d后，CK組孢子已經(jīng)完全萌發(fā)，CaCl2、山梨酸鉀、CaCl2+山梨酸鉀處理組的孢子萌發(fā)抑制率分別為26%、84%、100%，CaCl2+山梨酸鉀處理組孢子均未萌發(fā)，其孢子萌發(fā)抑制率顯著低于與其他各組（P＜0.05）。說(shuō)明CaCl2結(jié)合山梨酸鉀處理對(duì)灰霉孢子萌發(fā)的抑制效果最好。

2.3 不同處理對(duì)接種灰霉菌后甜櫻桃發(fā)病率的影響

圖 2 不同處理對(duì)接種灰霉菌后甜櫻桃病斑直徑（A）和發(fā)病率（B）的影響Fig. 2 Effects of different treatments on lesion size (A) and incidence (B)in sweet cherry infected with Botrytis cinerea

如圖2A所示，病斑直徑隨接種時(shí)間延長(zhǎng)而迅速擴(kuò)展，呈逐漸上升趨勢(shì)。接種灰霉菌后4 d后，各處理組病斑直徑顯著低于CK組（P＜0.05），其中山梨酸鉀和CaCl2+山梨酸鉀處理能有效限制病斑直徑的擴(kuò)展，在5 d時(shí)病斑直徑分別僅為9.46 mm和9.89 mm，兩處理組之間差異不顯著（P＞0.05）。

從圖2B可以看出，接種灰霉菌后各組果實(shí)均迅速染病，CK組在2 d內(nèi)發(fā)病率高達(dá)78.95%，在3 d時(shí)全部染病。各處理組發(fā)病率顯著低于CK組，表現(xiàn)出明顯的抗病性。在5 d時(shí)，CaCl2、山梨酸鉀和CaCl2+山梨酸鉀處理組比CK組分別降低了23.90%、25.70%、25.77%。

2.4 不同處理對(duì)接種灰霉菌后甜櫻桃果實(shí)中MDA含量的影響

圖 3 不同處理對(duì)接種灰霉菌后甜櫻桃果實(shí)MDA含量的影響Fig. 3 Effects of different treatments on MDA content in sweet cherry infected with Botrytis cinerea

如圖3所示，在接種灰霉菌后，甜櫻桃果實(shí)MDA含量均呈上升趨勢(shì)。與CK組相比，各處理組的MDA含量均能保持較低水平。在接種后2～3 d，CaCl2處理組果實(shí)MDA含量最低，鈣能保護(hù)細(xì)胞膜使其免受損傷。接種后4～5 d，CaCl2+山梨酸鉀處理組的甜櫻桃果實(shí)中MDA含量?jī)H為5.37～6.13 mmol/g，顯著低于其他處理組（P＜0.05），說(shuō)明CaCl2與山梨酸鉀結(jié)合處理可有效減緩果實(shí)內(nèi)部氧化自由基對(duì)細(xì)胞膜的傷害。

2.5 不同處理對(duì)接種灰霉菌后甜櫻桃果實(shí)PPO和POD活力的影響

由圖4A可知，接種灰霉菌后，PPO活力呈現(xiàn)出先升高后降低的變化趨勢(shì)。各處理組在3 d時(shí)達(dá)到峰值，此時(shí)CaCl2+山梨酸鉀處理組的PPO活力顯著高于其他處理組（P＜0.05），其峰值達(dá)0.761 U/g，說(shuō)明CaCl2結(jié)合山梨酸鉀的處理可以更快地誘導(dǎo)果實(shí)PPO活力的上升，并能使PPO活力在較高水平。

由圖4B可知，隨病害的擴(kuò)展，CK組與各處理組的POD活力總體上均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，在整個(gè)過(guò)程中，各處理組的POD活力顯著高于CK組（P＜0.05）。CK組、CaCl2及山梨酸鉀處理組于接種后3 d達(dá)到最大值，其中山梨酸鉀處理組較CK組的POD活力提高了84.9%；CaCl2+山梨酸鉀處理組則在第4天達(dá)到峰值，此時(shí)其POD活力是CK組的3.01 倍，且在接種后一直處于較高活力水平。

圖 4 不同處理對(duì)接種灰霉菌后甜櫻桃PPO（A）和POD（B）活力的影響Fig. 4 Effects of different treatments on PPO (A) and POD (B)activities in sweet cherry infected with Botrytis cinerea

2.6 不同處理對(duì)接種灰霉菌后甜櫻桃果實(shí)CHI和GLU活力的影響

圖 5 不同處理對(duì)接種灰霉菌后甜櫻桃CHI（A）和GLU（B）活力的影響Fig. 5 Effects of different treatments on CHI (A) and GLU (B)activities in sweet cherry infected with Botrytis cinerea

在整個(gè)病害觀察期，CHI和GLU活力大致變化趨勢(shì)為先增大再緩慢減小。如圖5A所示，接種后1 d開始，CaCl2+山梨酸鉀處理組CHI活力迅速上升，各處理組與CK組差異顯著（P＜0.05）。與其他處理組不同，CaCl2處理組的CHI活力在接種后4 d達(dá)到峰值，為22.8 U/g，是CK組的2.57 倍，CaCl2+山梨酸鉀處理組的CHI活力整體上高于單獨(dú)CaCl2、山梨酸鉀處理組。

從圖5B可以看出，在接種3 d后，不同處理組GLU活力顯著高于CK組（P＜0.05），CaCl2、山梨酸鉀、CaCl2+山梨酸鉀處理組GLU活力峰值均出現(xiàn)在接種后3 d，分別比CK組高161.45%、171.68%、166.72%，隨后各處理組GLU活力緩慢降低，但在后期仍能夠維持較高的活力。與CK處理相比，CaCl2、山梨酸鉀及CaCl2+山梨酸鉀處理均能在接種3 d后顯著提高這兩種酶的活力，進(jìn)一步說(shuō)明CHI和GLU對(duì)果實(shí)產(chǎn)生抗病相關(guān)蛋白的誘導(dǎo)作用，從而破壞灰霉菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)甜櫻桃果實(shí)的抗病性。

3 討 論

研究發(fā)現(xiàn)山梨酸鉀的抑菌作用可能是通過(guò)改變病原菌的細(xì)胞和細(xì)胞膜形態(tài)結(jié)構(gòu)，抑制其跨細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)，進(jìn)而抑制氨基酸的運(yùn)輸，導(dǎo)致病原菌胞內(nèi)的酶系統(tǒng)被破壞[15]。陳福元[16]認(rèn)為病原菌新陳代謝所必需的飽和脂肪酸的氧化、脫氫、發(fā)生在α、β位上，山梨酸α、β位上的雙鍵阻止了霉菌脫氫生成不飽和脂肪酸，降低了病原菌的新陳代謝。本實(shí)驗(yàn)中，山梨酸鉀質(zhì)量濃度為5 g/L時(shí)極大抑制了灰霉菌生長(zhǎng)，能抑制灰霉孢子的萌發(fā)。這與Smilanick等[15]研究結(jié)果相似，山梨酸鉀作為抑菌劑在柑橘類水果上使用時(shí)，不易被病原菌降解而維持長(zhǎng)時(shí)間的殘留，從而抑制柑橘類采后青霉病的發(fā)生。胡春紅等[17]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)山梨酸鉀質(zhì)量濃度達(dá)到8 g/100 mL及以上時(shí)，抑菌效果已達(dá)到顯著水平；當(dāng)質(zhì)量濃度為1.0～1.2 g/100 mL時(shí)，可抑制79%～90%根霉孢子的萌發(fā)，抑制菌絲及菌落生長(zhǎng)且加速其老化、衰退。李自強(qiáng)等[18]發(fā)現(xiàn)用乙醇和山梨酸鉀處理鮮食葡萄與使用SO2對(duì)葡萄采后灰霉病的抑制效果相當(dāng)，并且對(duì)葡萄無(wú)任何傷害。這些均為山梨酸鉀在水果貯藏保鮮上的應(yīng)用提供了參考。

鈣是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的重要元素，也是構(gòu)成質(zhì)膜的重要成分[19]，采前噴鈣能維持植物細(xì)胞細(xì)胞壁和質(zhì)膜在采后的穩(wěn)定性，進(jìn)而抑制病原菌的入侵[20]。在研究熱液CaCl2處理番木瓜對(duì)炭疽病的抑制效果時(shí)發(fā)現(xiàn)，Ca2+能與果膠酸形成鹽橋來(lái)降低細(xì)胞壁降解酶的活力，增強(qiáng)對(duì)真菌的抗性[21]。Ca2+結(jié)合在植物的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜上，可減少灰霉菌對(duì)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜通透性的改變[22]。因此，CaCl2處理可能是通過(guò)增強(qiáng)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的穩(wěn)定性來(lái)抵抗灰霉菌的侵染。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CaCl2處理能夠抑制離體灰霉菌生長(zhǎng)，20 g/L CaCl2與5 g/L山梨酸鉀復(fù)合處理對(duì)接種1 d內(nèi)的芽管生長(zhǎng)抑制率和孢子萌發(fā)抑制率均保持在100%，說(shuō)明CaCl2和山梨酸鉀在同一時(shí)間內(nèi)線性增加了果實(shí)對(duì)灰霉病的抵抗能力，Youssef等[23]在采前和采后對(duì)葡萄用鉀鹽和鈣鹽處理降低了菌絲生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了這一觀點(diǎn)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，外源鈣處理降低細(xì)胞壁降解酶活力及其基因表達(dá)，抑制了細(xì)胞壁物質(zhì)的解聚，降低了細(xì)胞壁降解酶活力，減緩了果膠、半纖維素的解聚，達(dá)到了調(diào)控果實(shí)膳食纖維含量、維持果實(shí)質(zhì)地品質(zhì)、延長(zhǎng)果實(shí)貨架期壽命的目的[24]。

在接種實(shí)驗(yàn)中，采前噴20 g/L CaCl2、采后5 g/L山梨酸鉀及二者復(fù)合處理組的甜櫻桃果實(shí)病斑直徑及發(fā)病率明顯低于CK組。MDA含量是植物細(xì)胞膜質(zhì)過(guò)氧化程度的體現(xiàn)[25]，其能產(chǎn)生氧化自由基加速果實(shí)衰老。各處理組甜櫻桃果實(shí)中的MDA含量均低于CK組，這與袁陵等[26]得到鈣能有效降低奉節(jié)臍橙褐變膜脂過(guò)氧化的結(jié)果相一致。PPO和POD為植物防御體系內(nèi)兩種重要的抗氧化酶類。PPO可將酚類氧化為醌類物質(zhì)，其對(duì)入侵的病原菌具有高毒性。POD能夠防止活性氧引起傷害，調(diào)控細(xì)胞內(nèi)自由基水平[27-28]。在植物遭受脅迫后，體內(nèi)誘導(dǎo)合成病程相關(guān)蛋白，分解病原菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，植物的抗性反應(yīng)會(huì)使CHI和GLU這兩種防御蛋白含量迅速升高，抵抗病原真菌病害[29-31]，進(jìn)而增強(qiáng)耐貯性[32]。CaCl2與山梨酸鉀處理能使甜櫻桃果實(shí)內(nèi)PPO、POD、CHI和接種3 d后的GLU均保持較高活力，誘導(dǎo)櫻桃果實(shí)對(duì)病原菌產(chǎn)生抗性。以20 g/L CaCl2和5 g/L山梨酸鉀復(fù)合處理的誘導(dǎo)效果最好，可能是CaCl2與山梨酸鉀協(xié)同作用誘導(dǎo)了櫻桃果實(shí)自身防御機(jī)制產(chǎn)生抗性，有利于甜櫻桃抵抗灰霉菌的侵染，減緩病害的發(fā)生。

4 結(jié) 論

CaCl2和山梨酸鉀處理均能不同程度地抑制灰霉菌菌絲生長(zhǎng)，降低孢子的萌發(fā)率，最優(yōu)質(zhì)量濃度為5 g/L山梨酸鉀、20 g/L CaCl2，二者的復(fù)合處理能夠完全抑制灰霉菌孢子萌發(fā)。

在接種實(shí)驗(yàn)中，采前噴20 g/L CaCl2、采后5 g/L山梨酸鉀處理及二者復(fù)合處理明顯降低甜櫻桃的發(fā)病率，抑制病斑的擴(kuò)展，控制果實(shí)中MDA的含量，維持PPO、POD、CHI和接種3 d后的GLU抗性酶的活力處在較高水平，誘導(dǎo)櫻桃果實(shí)對(duì)灰霉菌的抗性。5 g/L山梨酸鉀和20 g/L CaCl2復(fù)合處理的誘導(dǎo)效果最好。