楊艷紅 李湘洲，2 周 軍 王曉婷

(中南林業(yè)科技大學材料科學與工程學院1，長沙 410004) (南方林業(yè)生態(tài)應用技術國家工程實驗室2，長沙 410004)

山蒼子，樟科木姜子屬植物，是中國特有的香料資源植物[1]。由其果實提取的山蒼子油主要成分為檸檬醛，具有獨特的濃郁香味，是一種天然香料，也是合成紫羅蘭酮、鳶尾酮等香料的主要來源[2-4]。同時山蒼子油具有的抗氧化抑菌特性，使其在天然調(diào)味劑、天然抗氧化劑和天然抑菌劑等領域具有特殊的地位[5-6]。 但是，包括山蒼子油在內(nèi)的大多數(shù)植物精油，都存在不穩(wěn)定性[7]，天然的山蒼子油易受外界條件的影響，對熱、光敏感，而且由于揮發(fā)性強，釋放快，這些性質(zhì)制約了其終端產(chǎn)品的應用。

微膠囊技術可以對植物精油進行包埋，在植物精油保護、控釋等方面具有顯著效果[8-11]，可提高山蒼子油的穩(wěn)定性。微膠囊的制備方法主要為化學法、物理化學法、物理法等。常用的物理法包括研磨法、飽和水溶液法、冷凍干燥法、噴霧干燥法等。其中研磨法工藝簡單，但包埋效果有限[12]。飽和水溶液法操作及所需設備簡單，但壁材的性質(zhì)會限制其包埋效果[13]。冷凍干燥法[14]與噴霧干燥法[15]雖然干燥效率相對較高，但均需要特殊的設備器材，成本相對較高。目前關于單一技術開展微膠囊制備工藝的研究已經(jīng)有不少報道[16-18]，但是相對全面和系統(tǒng)地比較若干種制備技術的研究不多見[19-21]。同時微膠囊芯材的釋放，決定了微膠囊的應用前景。一般而言芯材釋放速率由芯材在壁材中的溶解度和通過壁材的擴散共同決定[7,22]。常用的釋放動力學模型有很多，如零級釋放動力學方程[23-24]、一級釋放動力學方程[25-26]、Higuchi模型和Avrami′s模型[27-30]等。比較理想的體外釋放速率應符合零級動力學方程，即恒速釋放，但在實際過程中，由于受到外界多種因素的影響，能達到零級釋放的很少。而且目前關于精油微膠囊釋放動力學的報道相對較多，但研究制備技術對釋放過程速率控制的理論研究相對較少。

本研究以β-環(huán)糊精為壁材，以山蒼子油為芯材，考察了研磨法、飽和水溶液法、冷凍干燥法、噴霧干燥法四種微膠囊制備技術對山蒼子油的包合及釋放效果。為了比較不同制備技術對山蒼子油釋放速率的影響，本研究采用零級釋放動力學方程、一級釋放動力學方程、Higuchi模型分別對這四種微膠囊釋放實驗數(shù)據(jù)進行擬合，獲得了山蒼子油釋放動力學模型。論文所獲得的定量研究結果，得到了山蒼子油在自然環(huán)境中的釋放規(guī)律，為更有效地控制芯材釋放提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

山蒼子油：市售；β-環(huán)糊精、無水乙醇均為分析純。

1.2 主要儀器與設備

Panda Plus高壓均質(zhì)機； LGJ-10冷凍干燥機；B-290小型噴霧干燥儀；Nicolet Avatar330傅里葉轉(zhuǎn)化紅外光譜儀；JEOL 6380-lv掃描電子顯微鏡。

1.3 實驗方法

1.3.1 山蒼子油微膠囊的四種不同制備方法

1.3.1.1 研磨法

稱取一定量的β-環(huán)糊精放入干燥的研缽中，先加約3倍水研勻，按芯壁比1∶3取山蒼子油，一邊研磨一邊向研缽中逐滴滴加山蒼子油，控制研磨時間為40 min，溫度為常溫，研磨至表面沒有油層，然后低溫干燥，即得到山蒼子油微膠囊樣品。

1.3.1.2 飽和水溶液法

將一定量的β-環(huán)糊精在70 ℃下配成飽和的β-環(huán)糊精溶液，放入水浴鍋，攪拌至成透明溶液，然后按芯壁比1∶3取山蒼子油(加少量無水乙醇混合均勻)，邊攪拌邊加入山蒼子油。攪拌過程中慢慢降溫冷卻，使溶液中漸漸沉淀析出包結形成的微膠囊，然后過濾、干燥，即得到山蒼子油微膠囊樣品。

1.3.1.3 冷凍干燥法

將一定量的β-環(huán)糊精在70 ℃下配成飽和的β-環(huán)糊精溶液，放入水浴鍋，攪拌至成透明溶液，然后按芯壁比1∶3取山蒼子油(加少量無水乙醇混合均勻)，邊攪拌邊加入山蒼子油。接著將溶液進行過濾，將得到的濾渣進行冷凍干燥，控制真空度為76 kPa，冷凍溫度為 -20 ℃，冷凍時間為24 h，即得到山蒼子油微膠囊樣品。

1.3.1.4 噴霧干燥法

將一定量的β-環(huán)糊精在70 ℃下配成飽和的β-環(huán)糊精溶液，放入水浴鍋，攪拌至成透明溶液，然后按芯壁比1∶3取山蒼子油(加少量無水乙醇混合均勻)邊攪拌邊加入山蒼子油使其混合均勻，呈乳濁液狀。將攪拌均勻后的乳液進行放入高壓均質(zhì)機中進行均質(zhì)，控制最高壓力為500 bar，均質(zhì)時間為20 min，使油滴均勻包合在壁材中。將均質(zhì)后的乳液噴霧干燥，控制進口溫度為180 ℃，進風量為80%，進料泵泵速為15%，在分離器中收集產(chǎn)品，即得到山蒼子油微膠囊樣品。

1.3.2 山蒼子油微膠囊表面油、總油測定及包埋率、收率的計算(所有的實驗重復3次取平均值)

1.3.2.1 表面油、總油測定

山蒼子油微膠囊表面油測定：準確稱取2 g樣品，分3次將50 mL石油醚加入，每次均振蕩2 min，過濾并合并濾液，轉(zhuǎn)移至干燥且已稱重的燒杯中，記空杯質(zhì)量m1，在50 ℃恒溫水浴加熱濾液，蒸出石油醚，直至表面油和燒杯的總質(zhì)量不再變化，稱重記為m2。表面油質(zhì)量=m2-m1。

山蒼子油微膠囊總油測定：準確稱取2 g樣品至干燥且已稱重的圓底燒瓶中，記空瓶質(zhì)量m3，加入150 mL石油醚索氏萃取8 h，50 ℃恒溫水浴加熱直至總油和圓底燒瓶的總質(zhì)量不再變化，稱重記為m4?？傆唾|(zhì)量=m4-m3。

1.3.2.2 包埋率、收率的計算

1.3.3 山蒼子油微膠囊的SEM

將所制得的微膠囊用導電膠粘在掃描電鏡載物臺上，樣品表面噴金，30 min后將載物臺之于掃描電鏡中，加速電壓20 kV。

1.3.4 山蒼子油微膠囊的IR

稱取5 mg微膠囊樣品與100 mg KBr充分研磨混合均勻，壓片，于4 000～400 cm-1內(nèi)進行紅外光譜掃描。

1.3.5 山蒼子油微膠囊動力學的構建與擬合

將山蒼子油微膠囊置于室溫(15±5) ℃，空氣相對濕度(60±10)%的條件下，避光密閉保存35 d，每間隔 5 d 取樣對其中的山蒼子油進行索式提取，按公式計算得出山蒼子油微膠囊的釋放率。

釋放率=

根據(jù)零級模型Q=a+bt、一級模型ln(1-Q)=a+bt、Higuchi模型Q=bt1/2(式中，Q為微膠囊中山蒼子油的釋放率/%；t為微膠囊儲存時間/d；n為釋放機理參數(shù)；a,b為公式參數(shù))。分別對微膠囊的釋放速率進行擬合，得出釋放動力學模型。

2 結果與分析

2.1 山蒼子油微膠囊的包埋率、收率

以β-環(huán)糊精為壁材采用不同方法制備山蒼子油微膠囊，所得微膠囊的包埋率及收率如表1所示。

表1 微膠囊的包埋率、收率/%

其中以噴霧干燥法的包埋率最高，其次為冷凍干燥法和飽和水溶液法，研磨法的包埋率最低，而收率正好相反。

因為研磨法操作方法簡單，過程單一，制備過程中不經(jīng)過其他儀器，無試劑轉(zhuǎn)移過程，故制備過程中原材料的損耗率最小，因此其收率最高，同時因為β-環(huán)糊精分子內(nèi)疏水外親水的特殊結構，在簡單的研磨過程中，大量的山蒼子油并未被包埋進環(huán)糊精的空腔，因此制備的微膠囊的包埋率最低[12]。而采用飽和水溶液法和冷凍干燥法制備微膠囊的制備微膠囊時，由于β-環(huán)糊精溶解度較低，因此其內(nèi)腔包埋的山蒼子油的量較少，并且飽和水溶液法的高溫干燥對山蒼子油的損耗略大于冷凍干燥法，因此其微膠囊的包埋率略低于冷凍干燥法。同時微膠囊的過濾轉(zhuǎn)移導致了微膠囊的收率的降低[13-14,31]。噴霧干燥法相較于其他幾種方法操作步驟更為復雜，使用的儀器設備也較多，并且在試劑轉(zhuǎn)移過程中，設備器壁上存在試劑殘留，此外，由于噴霧干燥法在高溫下操作，存在部分山蒼子油的揮發(fā)，導致較多的原材料流失，所以噴霧干燥法制備微膠囊的收率較低。但噴霧干燥法對混合液進行了高壓均質(zhì)，促進了芯材在壁材溶液中的進一步擴散，使β-環(huán)糊精與山蒼子油充分接觸，并且噴霧干燥過程迅速，芯材損失少，因此微膠囊包埋率較高[8,15]。

2.2 山蒼子油微膠囊的SEM微觀形態(tài)分析

從圖1可知，研磨法制得的微膠囊顆粒非常不均勻，呈不規(guī)則狀態(tài)，大量的山蒼子油并未進入環(huán)糊精空腔而是附著在其表面，并且微膠囊表面的山蒼子油容易黏結在一起，導致產(chǎn)品結塊現(xiàn)象嚴重，在外觀上與其他方法制備出的微膠囊粉末存在較為明顯差異。飽和水溶液法制備的微膠囊，制得的產(chǎn)品形態(tài)大小較不均勻，且存在輕微結塊現(xiàn)象。因該法是在降溫冷卻中形成微膠囊，操作存在一定的不均勻性，所以制得的產(chǎn)品顆粒不均勻，存在輕微結塊現(xiàn)象。相較于研磨法和飽和水溶液法，冷凍干燥法制得的微膠囊顆粒相對大小較均勻。這是因為物料在升華前先凍結，形成了穩(wěn)定的固體骨架，所以水分升華后固體骨架基本保持不變[32]，顆粒粒徑相對均勻。而噴霧干燥法制備的微膠囊相較于其他方法制備的微膠囊而言，顆粒大小更為均勻，這與游鳳等[33]研究的較為相似。這是因為利用了高壓均質(zhì)與噴霧干燥法相結合的處理方法，在高壓的作用下使芯材與壁材混合更加充分，更有利于形成致密性良好、強度一定的微膠囊囊壁[34]，因而微膠囊的包埋效果較好，這也與2.1的結果一致。

圖1 不同方法制備的微膠囊SEM形貌圖

2.3 山蒼子油微膠囊的紅外光譜分析

通過對山蒼子油、β-環(huán)糊精、山蒼子油微膠囊進行紅外光譜掃描，所得結果如下。

從圖2中可知，山蒼子油紅外光譜有3種特征吸收峰，其中—CH3、—CH2—的伸縮振動峰2 968.44、2 926.01、2 858.50 cm-1處，檸檬醛羰基的伸縮振動峰為1 676.14 cm-1，檸檬醛雙鍵在1 635.63 cm-1處有一個伸縮振動峰。β-環(huán)糊精中—OH的伸縮振動峰在3 388.92 cm-1處，2 926.01 cm-1附近有—CH3的一個伸縮振動峰。

圖2 山蒼子油微膠囊及其單體成分的紅外圖譜

研磨法制備的微膠囊中，山蒼子油的2 968.44、2 926.01、2 858.50 cm-1處特征吸收峰有較為明顯的存在，且檸檬醛羰基的伸縮振動峰1 676.14 cm-1基本上變化不大，這是因為研磨法包合效果較差從而導致了β-環(huán)糊精的外表面附著了大部分未包合的山蒼子油，從而出現(xiàn)了山蒼子油的特征峰。 而在飽和水溶液法、冷凍干燥法、噴霧干燥法3種方法所制備的山蒼子油-β-環(huán)糊精包合物所對應的紅外光譜中，均未出現(xiàn)檸檬醛中—CH3、—CH2—所形成的伸縮振動峰(2 968.44、2 858.50 cm-1)，且雙鍵的伸縮振動峰(1 635.63 cm-1)和羰基伸縮振動峰(1 676.14 cm-1)的峰強度出現(xiàn)明顯降低。這說明檸檬醛分子與β-環(huán)糊精分子存在范德華力、氫鍵等作用力，進入到β-環(huán)糊精分子的空腔后，形成較為穩(wěn)定的包合物[35]。但相比而言，噴霧干燥法中的山蒼子油的特征伸縮振動峰的強度要弱于冷凍干燥法、飽和水溶液法，這進一步論證了噴霧干燥法制備微膠囊對山蒼子油的包合效果要高于冷凍干燥法、飽和水溶液法及研磨法，與2.1的結果一致。

2.4 山蒼子油微膠囊的釋放動力學

2.4.1 山蒼子油微膠囊的釋放率

按照1.3.5計算得出山蒼子油微膠囊的釋放率，結果如圖3所示。

圖3 山蒼子油及不同工藝制備的微膠囊的釋放率

由圖3中可以看出，研磨法制備的山蒼子油微膠囊的釋放與山蒼子油的釋放速率相差不大。而飽和水溶液法、冷凍干燥法、噴霧干燥法制備的微膠囊均對山蒼子油有一定的保護作用，能從一定程度上減少山蒼子油的損失。

研磨法制備的微膠囊本身對山蒼子油的包合效果不佳，大量的山蒼子油附于環(huán)糊精表面，揮發(fā)較快，因此其釋放速率與山蒼子油相差不大，保護作用并不太明顯。飽和水溶液法與冷凍干燥法在攪拌混合均勻的條件下進行包合，其包合效率并不太好，因此在釋放過程中，對芯材的保護性有一定的局限性。噴霧干燥法經(jīng)過高壓均質(zhì)，山蒼子油在高壓下被外力包埋進環(huán)糊精的空腔中，包合效果較好，因此芯材釋放的較慢，達到了較好保護山蒼子油的作用[8]。

2.4.2 山蒼子油微膠囊的釋放動力學

2.4.2.1 山蒼子油微膠囊的釋放動力學模型的擬合

微膠囊控制釋放系統(tǒng)是由芯材和高分子壁材組成，通過改變芯材和壁材的組成方式獲得所需的控制釋放效果。在同樣的外界條件下，分別采用3種動力學模型對所制備的4種微膠囊的釋放過程進行擬合，得到合適的動力學擬合模型，結果如表2所示。

比較這3種不同動力學方程模擬和線性相關系數(shù)R值可知，這4種微膠囊的釋放過程對于不同模型的擬合度有一定差異：對于研磨法與噴霧干燥法制備的微膠囊的釋放過程是零級動力學優(yōu)于一級動力學、Higuchi模型；飽和水溶液法與冷凍干燥法相似，均為一級動力學優(yōu)于零級動力學、Higuchi模型。

分析這些微膠囊的釋放過程可以發(fā)現(xiàn)，研磨法制備的微膠囊，與山蒼子油的釋放相似，在釋放初期釋放迅速，然后逐漸趨于恒速，綜合分析其釋放速率更適用于零級動力學。這是因為研磨法制備過程是一個相對簡單的混合過程，大量的山蒼子油并未被實際包合進入微膠囊內(nèi)部，其釋放的主要是未包埋的山蒼子表面油，因此其釋放速率與山蒼子原料油相接近，是一個基本恒速的過程。而在噴霧干燥法制備的微膠囊的釋放過程中，由于釋放環(huán)境體積遠大于微膠囊體積且微膠囊的尺寸及表面積大小不變，同時由于微膠囊中山蒼子油的含量較高，可近似認為山蒼子油的濃度在微膠囊內(nèi)的濃度不變[7-8]。

表2 不同方法制備的山蒼子油微膠囊的體外釋放模型模擬結果及參數(shù)

因此山蒼子油在微膠囊膜內(nèi)穩(wěn)態(tài)擴散，是一個較為理想的擴散過程，為山蒼子油提供了較好的保護作用，大大提高了山蒼子油的穩(wěn)定性。

對于飽和水溶液法和冷凍干燥法制備的微膠囊而言，隨著時間的進行，微膠囊的釋放變得緩慢，其更適合于一級動力學方程。分析原因是因為這兩種方法制備的微膠囊中山蒼子油的含量較少，并且隨著芯材的不斷釋放，山蒼子油在微膠囊內(nèi)的濃度下降，釋放驅(qū)動力不斷減小，因此微膠囊的釋放速率變小，這與魏磊等[36]報道的結果一致。同時此種類型微膠囊的釋放的主要阻力為微膠囊壁材的致密度[37]，而冷凍干燥法由于保留了良好的固體骨架，因此其壁材的致密度要強于飽和水溶液法制備的微膠囊。因此其對山蒼子油的保護要稍強于后者。

2.4.2.2 山蒼子油微膠囊的釋放動力學優(yōu)化模型的擬合

分別對這4種方法制備的微膠囊的釋放動力學的優(yōu)化模型進行擬合，結果見圖4。

圖4 微膠囊的優(yōu)化模型擬合

由圖4可以看出，研磨法與噴霧干燥法制備微膠囊的釋放曲線與零級釋放方程的擬合度較高，而飽和水溶液法與冷凍干燥法制備微膠囊的釋放曲線與一級釋放方程的擬合度較高。

3 結論

以β-環(huán)糊精為壁材，采用4種不同的包合方法制備了山蒼子油微膠囊，噴霧干燥法對山蒼子油的包埋率最高，其次為冷凍干燥法和飽和水溶液法，研磨法的包埋率最低。紅外光譜分析也驗證了這個結果。從SEM圖中可知噴霧干燥法制備的微膠囊外形相對于其他3種方法而言，微膠囊顆粒大小更為均勻。在同樣的外界條件下，分別采用零級釋放動力學、一級釋放動力學、Higuchi模型對所制得的4種微膠囊釋放速率進行擬合研究，得知由研磨法與噴霧干燥法制備的微膠囊的釋放更符合零級模型，而飽和水溶液法與冷凍干燥法制備的微膠囊的釋放更符合一級模型。噴霧干燥法是一種較為理想的山蒼子油微膠囊的制備技術，能對山蒼子油提供很好的保護作用，提高山蒼子油穩(wěn)定性。