徐進(jìn)，姚文

（1.四川省巴中市農(nóng)林科學(xué)研究院，四川 巴中 636000；2.四川省巴中市川農(nóng)動(dòng)物醫(yī)院，四川 巴中 636000）

巴貝斯蟲病是以蜱作為傳播媒介的血液原蟲病。資料表明，在已知的70余種巴貝斯蟲中，感染犬科動(dòng)物的主要為犬巴貝斯蟲、吉氏巴貝斯蟲和魏氏巴貝斯蟲?；既R床上以貧血和發(fā)熱為特征。

1 臨床癥狀

患犬10月齡，體重32kg，體溫39.5℃，其運(yùn)動(dòng)量減少，食欲低下，皮毛凌亂，尿液發(fā)黃，體表有蜱蟲（見圖1），眼結(jié)膜、齒齦等發(fā)白。

圖1 體表蜱蟲

2 診斷

2.1 血推片檢查 患犬前肢靜脈采血，推片，采用DIFF-QULK染色鏡檢。顯微鏡下見部分紅細(xì)胞內(nèi)有似吉氏巴貝斯蟲的圓形體，如圖2。

2.2 血常規(guī)檢查 靜脈采集患犬抗凝血2 mL，采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢查。

檢查結(jié)果表明患犬中性粒細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、血小板數(shù)等指標(biāo)下降，提示患犬嚴(yán)重貧血。

圖2 鏡檢結(jié)果

2.3 PCR檢查 參考文獻(xiàn)引物和熒光PCR鑒定方法，合成一對(duì)特異性檢測(cè)巴貝斯蟲18S rRNA基因的引物，采用SYBR Green I染料法，并與正常犬全血做對(duì)照，進(jìn)行PCR鑒定。陽性PCR產(chǎn)物送生物工程公司測(cè)序，測(cè)序結(jié)果在GeneBank中進(jìn)行Blast比對(duì)。采用DNAstar軟件與文獻(xiàn)報(bào)道的和GeneBank中收錄的吉氏巴貝斯蟲、犬巴貝斯蟲、魏氏巴貝斯蟲序列進(jìn)行Clustal W方法比對(duì)后，進(jìn)行DNA序列差異和同源性分析，PCR鑒定結(jié)果見圖3，序列分析結(jié)果見圖4。

PCR鑒定結(jié)果表明，患犬全血樣品的PCR反應(yīng)出現(xiàn)特異性的“S”型擴(kuò)增曲線，溶解曲線結(jié)果表明該引物特異性良好，無非特異性擴(kuò)增，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。與之相反，正常犬全血樣品PCR反應(yīng)無相應(yīng)反應(yīng)曲線。三種巴貝斯蟲主要差異見圖4黑色部分，不同巴貝斯蟲種間存在部分堿基的缺失、插入或替換。序列同源性分析表明，患犬的PCR反應(yīng)產(chǎn)物序列與兩株吉氏巴貝斯蟲的序列的同源性為99.3%和100%，與犬巴貝斯蟲、魏氏巴貝斯蟲的序列同源性均在88%以下，表明患犬感染的巴貝斯蟲種為吉氏巴貝斯蟲。

圖3 熒光PCR鑒定結(jié)果

圖4DNA序列差異

3 治療

3.1 采用機(jī)械方式和用藥物對(duì)患犬進(jìn)行體表除蜱，防止二次感染。

3.2 對(duì)血液中的巴貝斯蟲，使用較多的藥物是三氮脒和焦蟲針，其他可供選擇的藥物還有進(jìn)口貝尼爾，咪多卡。目前效果較佳的是阿托伐醌與阿奇霉素，藥物需要天天口服，且可導(dǎo)致一定的胃腸反應(yīng)。

3.3 因蟲體對(duì)肝臟有一定的損傷，會(huì)導(dǎo)致繼發(fā)黃疸，故治療中可使用保肝利膽的藥物，如促肝細(xì)胞生成素、肝泰樂、還原型谷胱胺肽等，退黃可用茵梔黃，思美泰等。

3.4 蟲體在繁殖過程中會(huì)引發(fā)紅細(xì)胞破裂，治療中可應(yīng)用生成紅細(xì)胞的藥物，如促紅細(xì)胞生成素、VB12，富血力，補(bǔ)血口服液等，加速體內(nèi)紅細(xì)胞生成。

3.5 大多數(shù)感染巴貝斯蟲的犬會(huì)出現(xiàn)食欲低下或廢絕，此時(shí)需要給犬增加營養(yǎng)，可喂給其喜食的肉食、雞蛋、牛奶等，若患犬不食，可人工喂食。

3.6 治療過程中RBC.HGB.HCT嚴(yán)重過低時(shí)，應(yīng)考慮輸全血，避免患犬因血氧過低而死亡。

3.7 此病的治療時(shí)間較長(zhǎng)，患犬需要定期復(fù)查，以免復(fù)發(fā)。

4 小結(jié)

4.1 診斷 診斷本病主要結(jié)合以下幾方面：患犬是否有草地活動(dòng)史，體表是否存有蜱蟲；患犬主要癥狀為貧血、黃疸、發(fā)熱等；血涂片檢查是否有蟲體；熒光PCR技術(shù)具有較高的特異性和靈敏性，最低檢測(cè)限度能達(dá)到10拷貝/μL，能在早期發(fā)現(xiàn)感染與確診，也為通過18s rRNA的基因序列差異進(jìn)行蟲種鑒定奠定了基礎(chǔ)。

4.2 治則 吉氏巴貝斯蟲是一種寄生于犬紅細(xì)胞的血液原蟲，主要造成紅細(xì)胞破壞，引起血管內(nèi)溶血，導(dǎo)致大量血紅蛋白、膽紅素、細(xì)胞內(nèi)源性熱源被釋放到血液中，引起血紅蛋白尿、膽色素尿、黃疸、發(fā)熱等癥狀。紅細(xì)胞數(shù)量的下降導(dǎo)致組織供氧不足，細(xì)胞厭氧呼吸產(chǎn)生的大量酸性物質(zhì)可引起酸中毒，以及重要組織器官缺氧性損傷，嚴(yán)重的可引起不可逆的休克，最終導(dǎo)致死亡。

該病治療重在保肝利膽、補(bǔ)充營養(yǎng)、維持能量、科學(xué)驅(qū)蟲。對(duì)貧血嚴(yán)重和呼吸困難的病犬，可進(jìn)行輸血和輸氧治療。

4.3 預(yù)防 巴貝斯蟲病是蜱媒疾病，因此，防病重點(diǎn)是防蜱、滅蜱。戶外活動(dòng)后的犬只可選用尼可信、福來恩等驅(qū)蟲劑進(jìn)行體外驅(qū)蟲。犬盡量不去草坪、樹叢等適于蜱蟲生存的環(huán)境。一旦發(fā)現(xiàn)犬被蜱蟲叮咬，應(yīng)立即治療。