董仲生

（沈陽化工研究院，遼寧沈陽，110021）

（上接第6期第52頁）

4. 4 急性吸入毒性

IBT實(shí)驗(yàn)室在1971年用FWA 5BM（Ciba-Geigy公司提供）對(duì)白化大鼠（5只/性別/組，平均體重290g）進(jìn)行了一項(xiàng)非- GLP的吸入毒性研究。

實(shí)驗(yàn)物質(zhì)FWA 5BM由高速、清潔、干燥的氣流輸送。產(chǎn)生的混合物被引入到頂部的有機(jī)玻璃接觸室（容量70L），通過一個(gè)隔板被分散和在底部排出。接觸室中FWA 5BM粉塵的濃度通過在動(dòng)物吸入?yún)^(qū)域環(huán)境的取樣進(jìn)行測(cè)定。10只白化大鼠暴露于2.9mg/L FWA 5BM的粉塵中4h，在室內(nèi)空氣中直徑為2～5、2～25和大于25mm的顆粒百分?jǐn)?shù)分別為31%、59%和10%[4]。

結(jié)果：暴露1～4h，動(dòng)物普遍表現(xiàn)出不活潑。在之后14天的暴露期動(dòng)物表現(xiàn)健康和體重增加正常，沒有動(dòng)物死亡。在暴露14天后的全身尸檢顯示，2只動(dòng)物的肺發(fā)生輕微實(shí)變，3只大鼠（性別不詳）的肺發(fā)生輕微充血，結(jié)果LC50＞2.9mg/L[5]。

4.5 急性皮膚毒性

(1) Ciba-Geigy公司1974年進(jìn)行的一項(xiàng)研究報(bào)道，F(xiàn)WA 5BM對(duì)兔子的經(jīng)皮LD50值為＞2000mg/kg bw[3]。

根據(jù)OECD指南402（急性皮膚毒性），Wistar大鼠（5只/性別）在半-封閉的條件下以2000mg/kg bw劑量經(jīng)皮膚途徑暴露于FWA 5BM下24h，然后跟蹤給藥觀察15天。結(jié)果沒有觀察到死亡，其LD50＞2000 mg / kg bw[5]。

(2) 1975年毒理學(xué)家按照美國食品和藥品官員協(xié)會(huì)（AFDO）的 食品、藥品和化妝品中化學(xué)品的安全評(píng)價(jià)（1959）中斑貼技術(shù)規(guī)程對(duì)兔子皮膚的刺激、腐蝕進(jìn)行了評(píng)估[1]。

用俄羅斯兔子（雌性、雄性各3只，體重1.5～2kg），F(xiàn)WA 5BM用量為0.5g，把有FWA 5BM的紗布斑貼2.5cm×2.5cm施用于已備好的有擦傷和無擦傷刮毛的皮膚處，暴露24h后移除紗布。觀察3天。同時(shí)進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

對(duì)皮膚刺激立即進(jìn)行評(píng)分和在除去紗布斑貼48h后評(píng)分（在實(shí)驗(yàn)開始后的24和72h）。

皮膚刺激（包括紅斑和焦痂形成以及浮腫形成）的嚴(yán)重性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為：刺激指數(shù)平均值小于2表示輕微刺激，2～5表示中等刺激，大于6表示皮膚刺激嚴(yán)重。

結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)的主要刺激指數(shù)被評(píng)估1.5，因此實(shí)驗(yàn)物質(zhì)FWA 5BM對(duì)兔子皮膚造成的刺激為輕微刺激。

上述實(shí)驗(yàn)中皮膚反應(yīng)強(qiáng)度的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)與OECD指南中的報(bào)道相同。根據(jù)CLP法規(guī)（歐盟物質(zhì)和混合物的分類、標(biāo)簽和包裝法規(guī)）（EC 1272/2008）把FWA 5BM歸類為：無皮膚刺激性物質(zhì)[1]。

(3) 另外，在1975年和1976年，毒理學(xué)家按照AFDO的 食品、藥品和化妝品中化學(xué)品的安全評(píng)價(jià)”（1959）中斑貼技術(shù)規(guī)程對(duì)兔子皮膚的刺激、腐蝕還分別進(jìn)行了兩項(xiàng)和一項(xiàng)類似的評(píng)估實(shí)驗(yàn)[1]。

結(jié)果：原發(fā)刺激指數(shù)被分別評(píng)估為1.2、0.6（1975年）和1.2（1976年），為輕微刺激。

根據(jù)CLP法規(guī)（EC 1272/2008）把FWA 5BM歸類為：無皮膚刺激性物質(zhì)。

4.6 眼睛刺激

(1) 1975年毒理學(xué)家按照AFDO的 食品、藥品和化妝品中化學(xué)品的安全評(píng)價(jià)”（1959）中的規(guī)程對(duì)兔子眼睛的刺激進(jìn)行了評(píng)估[1]。

眼睛刺激的評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為：眼刺激指數(shù)0～10：極?。?1～25：輕微；26～56：中等；57～84：顯著；高于84：極大。

用俄羅斯兔子（雌、雄性各3只，體重1.5～2kg），F(xiàn)WA 5BM用量為0.1g，被放入兔子左眼的結(jié)膜囊中，眼瞼輕輕地閉合1s，右眼不做處理用于對(duì)照。3只兔子的眼睛在施藥處理30s后，用10mL溫水清洗眼睛。觀察時(shí)間為7天。

在第1、2、3、4和7天對(duì)刺激進(jìn)行評(píng)價(jià)，并對(duì)每只兔子進(jìn)行評(píng)分。

結(jié)果：眼刺激指數(shù)被評(píng)估為角膜2.8，虹膜0，結(jié)膜為2.7；極小的刺激。

討論和結(jié)論：

盡管在AFDO和OECD之間的物質(zhì)去除時(shí)間明顯不同（該實(shí)驗(yàn)中為30s，OECD中為1h），但結(jié)果清晰地表明：來自于24、48和72h的清洗與未清洗所有動(dòng)物眼睛兩者等級(jí)的平均值對(duì)于角膜的透明度低于1，對(duì)于虹膜也低于1，對(duì)于兩者的結(jié)膜紅色和水腫低于2。

因此，依據(jù)CLP法規(guī)，該物質(zhì)被分類為無刺激。

(2) 另外在1976年幾位毒理學(xué)家按照AFDO的 食品、藥品和化妝品中化學(xué)品的安全評(píng)價(jià)（1959）中的規(guī)程對(duì)兔子眼睛的刺激進(jìn)行了3項(xiàng)評(píng)估實(shí)驗(yàn)[1]。

刺激/腐蝕的相應(yīng)數(shù)據(jù)如下：

1976年第一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：眼刺激指數(shù)被評(píng)估為角膜0，虹膜0，結(jié)膜為1。FWA 5BM對(duì)兔子眼睛造成最小的刺激。沖洗的影響（未沖洗的/沖洗的眼睛）被評(píng)估為0.4。

1976年第二項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：眼刺激指數(shù)被確定為角膜1.4，虹膜0，結(jié)膜為2.1；最小的（極微的）刺激。

1976年第三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：眼刺激指數(shù)被確定為角膜0，虹膜0，結(jié)膜為0；無刺激。

因此，依據(jù)CLP法規(guī)，該物質(zhì)被分類為無刺激。

4.7 皮膚刺激/致敏

(1) 在1965年進(jìn)行了一項(xiàng)由65人參與的為期3周的人類重復(fù)傷害斑貼實(shí)驗(yàn)[4]，目的是研究FWA 5BM對(duì)皮膚的刺激和致敏性。實(shí)驗(yàn)物質(zhì)FWA 5BM（洗滌劑基料溶液中含F(xiàn)WA 5BM 10%）被用于一個(gè)系列9個(gè)密閉斑貼敷用物（每一個(gè)為期24h）中，2周后激發(fā)敷用位置。賦形劑作為陰性對(duì)照，沒進(jìn)行陽性對(duì)照。

洗滌劑基料在通常的商業(yè)配方范圍內(nèi)，濃度為0.5%的水溶液。時(shí)不時(shí)地觀察傷害斑貼點(diǎn)，對(duì)其進(jìn)行評(píng)分作為原發(fā)性刺激[4]。檢驗(yàn)結(jié)果：

有陽性反應(yīng)受試者的數(shù)量：0

有陰性反應(yīng)受試者的數(shù)量：65有刺激反應(yīng)受試者的數(shù)量：0該物質(zhì)沒有引起刺激或致敏。

(2) 在1970年FWA 5BM以24%的濃度用于光敏實(shí)驗(yàn)，有78人參與。除了每周兩天在斑貼移除后，實(shí)驗(yàn)區(qū)域立即在室外陽光下暴露30min外，其他類似于上一實(shí)驗(yàn)。

結(jié)果顯示：上述兩個(gè)實(shí)驗(yàn)，在不同的時(shí)間間隔（時(shí)間沒有說明）對(duì)斑貼位置進(jìn)行刺激評(píng)級(jí)，F(xiàn)WA 5BM不會(huì)引起人體過敏，不是致敏物[4]。

(3) Keplinger等人于1974年進(jìn)行了一項(xiàng)由自愿者參與的實(shí)驗(yàn)。200人用凡士林中含1%和5%的FWA 5BM（Ciba-Geigy公司提供，濃度不詳）或50人用0.1%的洗滌劑溶液（類型沒有說明）中含0.05%的FWA 5BM進(jìn)行的斑貼實(shí)驗(yàn)。在每周一、三、五（在同一位置施用10次）封閉斑貼。斑貼在24h后移除，然后對(duì)斑貼點(diǎn)的初始刺激進(jìn)行評(píng)分。在10～14天的實(shí)驗(yàn)后，在同一位置或相鄰位置（或兩者）進(jìn)行斑貼激發(fā)。24h后移除斑貼。然后立即、24h和48h后對(duì)斑貼點(diǎn)的反應(yīng)進(jìn)行檢查。

結(jié)果：人類暴露在任何配方中都沒有觀察到刺激或致敏[3-4]。

4.8 重復(fù)-劑量毒性

4.8.1 經(jīng)口

(1) 根據(jù)OECD 指南407（嚙齒動(dòng)物重復(fù)-劑量28-天經(jīng)口毒性），Wistar 大鼠（5只/性別/組）灌胃劑量0，50，200，1000 mg/kg-bw/day 的FWA 5BM 28天。沒有發(fā)現(xiàn)死亡。對(duì)兩個(gè)性別的高劑量組，與處理相關(guān)的影響是減少了紅細(xì)胞數(shù)（減少了15%～17 %），對(duì)兩個(gè)性別的中和高劑量組血紅蛋白濃度減少了（減少了8%～23%），對(duì)兩個(gè)性別的中和高劑量組紅細(xì)胞比容值略微地減少了（減少了6%～21%），在中和高劑量組動(dòng)物在絕對(duì)和或者相對(duì)肝、腎和睪丸重量方面分別發(fā)現(xiàn)明顯的差異[5]。

結(jié)果：觀察到有害作用的最低劑量LOAEL=1000mg/kg-bw/day（基于血液學(xué)變化主要反映輕微的溶血性貧血）。

未觀察到有害作用的劑量N O A E L=2 0 0 mg/kg-bw/day

(2) 在一項(xiàng)非GLP實(shí)驗(yàn)中用大鼠對(duì)FWA 5BM的重復(fù)-劑量毒性進(jìn)行了研究（IBT實(shí)驗(yàn)室在 1973年，Keplinger 等人在1974年，Lyman等人在1975年）。大鼠用含0、40、200和1000mg/kg FWA 5BM的食物喂養(yǎng)2年（約為0、2、8和40mg/kg bw/day）。

結(jié)果：FWA 5BM對(duì)體重沒有影響；對(duì)食物的消耗沒有明顯的影響；沒有發(fā)現(xiàn)異常行為反應(yīng)；在動(dòng)物的死亡總數(shù)上沒有明顯地影響；對(duì)測(cè)量的血液學(xué)、血液化學(xué)或尿分析參數(shù)沒有影響。處理對(duì)器官的組織病理學(xué)檢查方面沒有明顯的影響。對(duì)腫瘤的發(fā)生率沒有影響。

NOAEL是最大的實(shí)驗(yàn)劑量=1000mg/kg[3]。

4.8.2 經(jīng)皮

(1) 據(jù)1956年的研究報(bào)告介紹，用老鼠的背部區(qū)域進(jìn)行了亞急性實(shí)驗(yàn)[1]，F(xiàn)WA 5BM劑量為每5mg/只動(dòng)物，暴露處理5天。每個(gè)性別每個(gè)劑量動(dòng)物數(shù)量為5只。FWA 5BM的純度大于80%。

結(jié)果：8天后沒有發(fā)現(xiàn)異常。無局部刺激，無再吸收毒性。

(2) 另據(jù)1956年的研究報(bào)告介紹，用老鼠的背部區(qū)域進(jìn)行了亞急性實(shí)驗(yàn)[1]，F(xiàn)WA 5BM劑量為每只動(dòng)物20mg，暴露處理5天。每個(gè)性別每個(gè)劑量動(dòng)物數(shù)量為5只。FWA 5BM純度大于80%。

結(jié)果：8天后沒有發(fā)現(xiàn)異常。無局部刺激；無再吸收毒性。

(3) 另據(jù)1961年的研究報(bào)告介紹，在大鼠（重量140～171g）的背部區(qū)域進(jìn)行了亞急性實(shí)驗(yàn)[1]，F(xiàn)WA 5BM濃度為5%，劑量為0.4mL/只動(dòng)物，暴露處理5天。每個(gè)性別每個(gè)劑量動(dòng)物數(shù)量為5只。

結(jié)果：8天后沒有發(fā)現(xiàn)異常。局部刺激輕微；無再吸收毒性。

4.9 遺傳毒性

4.9.1 基因突變

(1) 1971年IBT（工業(yè)生物-檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室）用出生60～70天的12只雄性白化小鼠進(jìn)行了顯性致死實(shí)驗(yàn)。小鼠被分成幾組：無FWA 5BM處理的陰性對(duì)照組；用甲磺酸乙酯處理的陽性對(duì)照組；用25、50mg/kg FWA 5B M處理的實(shí)驗(yàn)組。

結(jié)果：用FWA 5BM處理對(duì)交配指數(shù)沒有影響；對(duì)黃體、著床點(diǎn)、早期再吸附和胚胎的數(shù)無影響；對(duì)末期再吸收數(shù)量無影響；對(duì)突變速率也沒有影響。沒有動(dòng)物死亡或出現(xiàn)出毒性癥狀。

(2) 1974年Keplinger等人用FWA 5BM對(duì)小鼠的顯性致死實(shí)驗(yàn)呈陰性[3]。

(3) McGregor和Ainsworth于1976年用FWA 5BM對(duì)鼠傷寒沙門氏菌株TA1535進(jìn)行了一項(xiàng)研究，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性[3]。

(4) 根據(jù)OECD指南471（細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)），鼠傷寒沙門氏菌株A 1535、TA 1537、TA 98、TA100和大腸桿菌株WP2uvrA在有或無S9代謝活化物的情況下暴露于0、33、100、333、2500或5000μg/盤的FWA 5BM中，同時(shí)進(jìn)行陰性和陽性對(duì)照獲得了預(yù)期的結(jié)果。沒有發(fā)現(xiàn)細(xì)胞毒性。因此，認(rèn)為FWA 5BM在該實(shí)驗(yàn)中不是誘導(dǎo)有機(jī)體基因突變的物質(zhì)[5]。

4.9.2 染色體畸變

4.9.2.1 體外

(1) 據(jù)Kilbey B.J.和McGregor D.B等人在1973年、1975年和1976年的實(shí)驗(yàn)資料[10-12]介紹，毒理學(xué)家用鼠傷寒沙門氏菌TA1535和TA1538菌落，靶基因his（組氨酸），在有或無代謝活化物S9-混合物（雄性大鼠肝臟去線粒體后上層清液和輔酶因子）存在下，進(jìn)行了細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)（例如Ames test）。

結(jié)果和結(jié)論：

無論FWA 5BM有沒有 活化”，菌株都沒有任何誘變活性跡象。

顯微鏡檢驗(yàn)含有FWA 5BM的實(shí)驗(yàn)盤，結(jié)果顯示存在適當(dāng)?shù)木?，微菌落的大小和?shù)量與陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)盤沒有明顯的差異。

在用FWA 5BM和對(duì)照物處理后，使用鼠傷寒沙門氏菌TA1535和TA1538每盤（3盤平均）獲得的突變菌落，見表10。

陽性對(duì)照：

二氯甲基二乙胺鹽酸鹽和2-乙酰胺基芴在每盤突變數(shù)量上引起增加。在2-乙酰胺基芴的情況下，增加只發(fā)生在代謝活化之后。

結(jié)果：無論FWA 5BM有沒有活化，菌株都沒有任何誘變活性跡象。致基因突變?yōu)殛幮浴?/p>

(2) 另有資料介紹[5]，根據(jù)OECD指南 473（體外哺乳動(dòng)物染色體畸變實(shí)驗(yàn)），中國倉鼠肺成細(xì)胞(V79)在有或無活化的情況下暴露于濃度范圍在0.1～5mg/mL的FWA 5BM中，F(xiàn)WA 5BM沒有引起染色體畸變[5]。

該實(shí)驗(yàn)中FWA 5BM對(duì)染色體畸變呈陰性。

(3) 1975年Kilbey B.J.等人[11]在 熒光增白劑對(duì)微生物的致突變性實(shí)驗(yàn) 中介紹，使用酵母菌（釀酒酵母）品系D4和W10，F(xiàn)WA 5BM劑量為100 mg/kg，三平行，對(duì)作為二倍體酵母菌細(xì)胞質(zhì)小菌落突變體和有絲分裂基因轉(zhuǎn)換的可能的誘導(dǎo)體的物質(zhì)活性進(jìn)行了研究。

結(jié)論：結(jié)果表明FWA 5BM不能產(chǎn)生誘變或任何遺傳物質(zhì)的變化。

(4) 1975年Kilbey B.J.等人[11]在 熒光增白劑對(duì)微生物的致突變性實(shí)驗(yàn) 中介紹，代謝活化系統(tǒng)為大鼠S9（肝勻漿液的去線粒體上清液），用靶基因his（多聚組氨酸），鼠傷寒沙門氏菌TA1530，TA1532，TA1535，TA1538在有或無代謝活化進(jìn)行了細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)濃度為1000mg/kg。實(shí)驗(yàn)中沙門氏菌株TA1530，TA1532，TA1535，TA1538被暴露于可見光或保存在暗處1h伴有通風(fēng)。

結(jié)果：在暗處生長后或固定相細(xì)胞在光照后，沒有跡象表明誘導(dǎo)突變或生存能力受影響。生長正如細(xì)胞在固定相的滴度所表明的那樣，不受以標(biāo)準(zhǔn)濃度使用的FWA 5BM存在的影響。

表10 不同試驗(yàn)物質(zhì)處理后的突變菌落

結(jié)論：無論FWA 5BM有沒有活化，菌株都沒有任何致突變活性跡象。遺傳毒性為陰性。

(5) 2014年毒理學(xué)家根據(jù)OECD指南471進(jìn)行了細(xì)菌回復(fù)突變分析實(shí)驗(yàn)[1]，使用大腸桿菌E.coli WP2 uvr A菌株，靶基因trp（色氨酸）。代謝活化方法為來自于苯巴比妥和b-萘黃酮的S9-混合物誘導(dǎo)大鼠肝臟。實(shí)驗(yàn)濃度為33～6666mg/板。同時(shí)進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)為三平行。

結(jié)果：在實(shí)驗(yàn)濃度下用或不用S9混合物，均未發(fā)現(xiàn)FWA 5BM的沉淀。在實(shí)驗(yàn)條件之下，測(cè)交品系回復(fù)突變體數(shù)量是在歷史陰性對(duì)照數(shù)據(jù)范圍之內(nèi)。FWA 5BM被認(rèn)為是非-誘變性物質(zhì)。遺傳毒性為陰性。

4.9.2.2 體內(nèi)

(1) 1974年的研究報(bào)告介紹，按照OECD指南474（哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)），給中國倉鼠（3只/性別/組）經(jīng)口連續(xù)灌胃劑量為1250、2500或5000 mg/kg-bw/day 的FWA 5BM兩天。同時(shí)進(jìn)行陽性和陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)。在最后服藥24h后獲取骨髓。每只動(dòng)物檢查1000個(gè)細(xì)胞以尋找細(xì)胞核異常，包括單純的Jolly體、紅細(xì)胞中的片段、微核和漸進(jìn)性壞死細(xì)胞[5]。

結(jié)果：處理對(duì)細(xì)胞核異常的發(fā)生率沒有影響。對(duì)每一組動(dòng)物細(xì)胞核異常的總的百分?jǐn)?shù)范圍是：陰性對(duì)照組為0～0.3%，在1250mg/kg組為0～0.4%，在2500mg/kg組為0～0.2%，在5000mg/kg組為0～0.2%。單一的Jolly體（0～0.3%）和其他特殊異常（0～0.1%）的發(fā)生率在對(duì)照和處理動(dòng)物之間是相似的。

陽性對(duì)照組異常細(xì)胞的發(fā)生率有明顯的增加。在每一個(gè)陽性對(duì)照中總的異常發(fā)生率為7.4%～14.3%。記錄在陽性對(duì)照組的主要異常是單一的Jolly體 (發(fā)生率5.2%～10.2%)、紅細(xì)胞中細(xì)胞核片段（發(fā)生率0.7%～1.9%）和有核紅細(xì)胞（成紅細(xì)胞）中的微核（發(fā)生率0.8%～2.6%）[4]。

結(jié)論：在該實(shí)驗(yàn)中FWA 5BM不能引起染色體畸變。

(2) 1974年的研究報(bào)告介紹，按照OECD指南475（哺乳動(dòng)物骨髓染色體畸變檢驗(yàn)），中國倉鼠（2只/性別/組）經(jīng)口連續(xù)灌胃1250、2500或5000 mg/kg-bw/day劑量的FWA 5BM兩天，每天給藥一次。同時(shí)進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。倉鼠在最后服藥2h后腹腔注射秋水仙胺，在注射秋水仙胺后4h獲取骨髓。檢查每只動(dòng)物100個(gè)中期板，以尋求染色單體-核染色體-類型畸變、裂隙和粉化[5]。

結(jié)果：在最低劑量組的雌性發(fā)現(xiàn)每400個(gè)細(xì)胞（0.25%）有一個(gè)出現(xiàn)染色單體型畸變（染色單體斷裂）。在賦形劑、2500或5000 mg/kg劑量組沒有發(fā)現(xiàn)這些染色體畸變。在所有劑量組都沒有發(fā)現(xiàn)染色體畸變或粉碎。在載玻片上來自于用1250mg/kg（2.25%）、2500mg/kg（0.5%）和 5000mg/kg（1.75%）劑量處理的動(dòng)物的染色體裂隙發(fā)生率與賦形劑對(duì)照組的動(dòng)物（1.25%）沒有差別。

這項(xiàng)研究中陽性對(duì)照引起了所有畸變類型（染色單體斷裂發(fā)生率14.25%、染色單體交換發(fā)生率17.5% 、染色單體型畸變發(fā)生率 1.0%、染色單體裂隙發(fā)生率15.25%、粉碎發(fā)生率 2.75%）明顯的增加[4]。

結(jié)論：在該實(shí)驗(yàn)中FWA 5BM不能引起染色體畸變。

(3) 為了評(píng)價(jià)FWA 5BM對(duì)雄性生殖細(xì)胞的細(xì)胞毒性或致突變性，1974年毒理學(xué)家按照OECD指南478（遺傳毒理學(xué)：嚙齒動(dòng)物顯性致死實(shí)驗(yàn)）進(jìn)行了FWA 5BM的顯性致死實(shí)驗(yàn)[1]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為老鼠（品系NMRI），每個(gè)劑量給藥動(dòng)物數(shù)為12只雄性。劑量為1650和5000mg/kg，給藥途徑為經(jīng)口灌胃。實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間為6周。同時(shí)進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

交配時(shí)間：每組有12只雄性，每組的每一個(gè)被處理后立即放入裝有3只未處理的雌性老鼠的籠子里。在一周末，將雌性從籠子中移出，換成例外一組3只雌性。該過程持續(xù)進(jìn)行6周。每日對(duì)雌性是否成功受孕進(jìn)行檢查，有陰道栓表明成功受孕。觀察到陰道栓的那一天被認(rèn)定為孕 0天”。整個(gè)的6個(gè)

交配時(shí)間 由所有從A-精原細(xì)胞到成熟精子的生殖細(xì)胞（胚細(xì)胞，受精卵）的成熟階段組成，。

觀察和記錄雄性在給藥之后第一周的全身狀況、癥狀和體重變化。雌性在孕14天被尸檢，并對(duì)其后代進(jìn)行檢查。

結(jié)果：所有實(shí)驗(yàn)組，其交配率、著床數(shù)量和胚胎死亡有可比性。對(duì)雄性沒有觀察到不適的癥狀。

結(jié)論：FWA 5BM的基因毒性（遺傳毒性）為陰性，不會(huì)引起染色體畸變，不是致突變物。

(4) 1975年Muller等人用經(jīng)口濃度高達(dá)5000 mg/kg的FWA 5BM對(duì)中國倉鼠骨髓的細(xì)胞遺傳性和核異常性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，結(jié)果呈陰性[3]。