吉文偉，郭勝利，宋展

(1、南陽市中心醫(yī)院膽道普外科，河南 南陽 473000；2、南陽市中心醫(yī)院普外科，河南 南陽 473000)

我國為乙肝大國，因乙肝發(fā)展而導(dǎo)致的肝硬化和肝癌嚴(yán)重影響了我國居民的正常生活。肝癌和術(shù)后復(fù)發(fā)的早期診斷和有效治療是提高生存率、改善預(yù)后的重要因素。目前臨床主要采用甲胎蛋白（Alpha fetoprotein，AFP）作為肝癌的血清標(biāo)志物，但其敏感性相對(duì)較低，平均只有55%左右，部分早期肝癌患者無法通過AFP進(jìn)行診斷[1]。最新的蛋白組學(xué)研究[2]提示高爾基體蛋白73（Golgi protein 73，GP73）有潛力成為肝癌早期診斷的血清標(biāo)志物。但目前的GP73的研究主要停留在癌組織的研究上，但關(guān)于肝癌組織與GP73的相關(guān)性研究較少，現(xiàn)階段GP73蛋白的表達(dá)情況與肝癌患者臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性研究也相對(duì)缺乏。故此，本研究深入探討了原發(fā)性肝癌患者血清GP73表達(dá)及意義，旨在為臨床原發(fā)性肝癌的早期診斷和治療提供新的思路，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年2月至2017年3月在河南省南陽市中心醫(yī)院治療的原發(fā)性肝癌患者78例，納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴均經(jīng)病理組織學(xué)診斷；⑵入院前未進(jìn)行放療、化療等治療；⑶患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并有其他原發(fā)性惡性腫瘤；⑵依從性差，不能配合隨訪者。同時(shí)選取肝硬化患者56例，慢性乙肝患者60例及健康志愿者70例，各組受試者年齡、性別比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 各組受試者年齡、性別比較

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 所有待檢者入院后第2d取清晨靜脈血5ml，離心機(jī)離心后，取血清-80℃凍存?zhèn)溆?。ELISA法檢測(cè)血清GP73水平，試劑盒購于南京凱基生物有限公司。

1.3 隨訪方法 通過電話聯(lián)系患者及其家屬獲取預(yù)后資料，隨訪時(shí)間記為手術(shù)日期至最后一次隨訪日期或患者死亡日期。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 19.0軟件，符合正態(tài)分布計(jì)量資料采用（±s）表示，組間比較使用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布資料采用秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較使用χ2檢驗(yàn)；生存曲線采用Kaplan-Meier法繪制，比較采用Long-rank法比較。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清GP73表達(dá)水平比較 肝癌患者血清GP73明顯高于健康者和慢性乙肝患者 （P＜0.05），而明顯低于肝硬化患者（P＜0.05），見表 2。

表2 各組血清GP73表達(dá)水平比較

2.2 不同肝癌患者血清GP73表達(dá)水平比較 肝癌患者血清GP73與腫瘤大小和TNM分期有關(guān) （P＜0.05），與患者性別、年齡、HBV、HCV、肝硬化、Child-Pugh評(píng)分、AFP和血管侵犯無關(guān) （P＞0.05）。見表3。

表3 不同肝癌患者血清GP73表達(dá)水平比較

2.3 肝癌不同血清GP73水平患者預(yù)后比較 根據(jù)本次研究肝癌患者中位血清GP73水平，將患者分為血清GP73高表達(dá)組（血清GP73≥125.64ng/ml，n=43） 和血清 GP73低表達(dá)組 （血清 GP73＜125.64ng/ml，n=35）；截止 2017 年 9 月，血清 GP73高表達(dá)組和血清GP73低表達(dá)組中位生存時(shí)間分別為22.84個(gè)月和21.99個(gè)月，差異比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.309，P＞0.05），見圖 1。

圖1 生存曲線分析

3 討論

原發(fā)性肝癌是由化學(xué)致癌物質(zhì)、病毒等多種因素共同作用，抗癌基因失活、致癌基因或相關(guān)基因激活及胚胎期部分癌基因重新復(fù)活等誘發(fā)的肝細(xì)胞增殖失控而導(dǎo)致的癌變。其中多種基因的表達(dá)和調(diào)控與肝癌的發(fā)生、發(fā)展具有密切關(guān)系[3]。部分學(xué)者認(rèn)為GP73肝癌血清標(biāo)志物中最值得期待的敏感蛋白[4]。GP73為高爾基體特異性Ⅱ型跨膜蛋白，定位于人9q21.33染色體基因組，亦稱為GOLM1或GOLPH2；GP73由膜內(nèi)、膜外的C-端及疏水N-端共計(jì)3部分組成，跨膜結(jié)構(gòu)完整[5，6]。但直至今天GP73的分子生物學(xué)作用還沒有得到深入研究，但已經(jīng)明確GP73主要在肝組織的上皮細(xì)胞中表達(dá)，正常肝細(xì)胞未見其顯著表達(dá)，但可因肝臟疾病的發(fā)展而逐步表達(dá)增加[7，8]。故此，本研究深入探討了原發(fā)性肝癌患者血清GP73表達(dá)及意義，旨在為臨床原發(fā)性肝癌的早期診斷和治療提供新的思路。

朱波[9]的研究發(fā)現(xiàn)GP73主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，當(dāng)GP73增量表達(dá)出現(xiàn)飽和時(shí)，可導(dǎo)致剩余的GP73向高爾基體順面遠(yuǎn)側(cè)位移。本研究發(fā)現(xiàn)肝癌患者血清GP73明顯高于健康者和慢性乙肝患者（P＜0.05），而明顯低于肝硬化患者（P＜0.05）。 該結(jié)果說明肝癌患者血清GP73水平有所升高，隨著肝臟損傷程度的加深GP73的表達(dá)率逐漸升高，這表明GP73的表達(dá)強(qiáng)弱對(duì)肝臟損傷的程度具有提示作用，我們推測(cè)慢性肝臟疾病發(fā)展與GP73表達(dá)的調(diào)節(jié)機(jī)制有關(guān)。但方玫玫[10]的研究發(fā)現(xiàn)肝癌患者的GP73水平顯著高于肝硬化患者，與本研究結(jié)果存在出入，還有待擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究證實(shí)。相關(guān)資料顯示GP73的調(diào)節(jié)機(jī)制可能主要存在于兩個(gè)過程中：一方面在肝臟慢性疾病發(fā)生、發(fā)展過程中出現(xiàn)；另一方面可能與肝細(xì)胞的急性損傷具有密切聯(lián)系[11，12]。

GP73在肝癌、結(jié)直肪癌、宮頸癌、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤及肺癌組織中會(huì)呈現(xiàn)高表達(dá)。經(jīng)分析可得，上述癌癥都是較容易轉(zhuǎn)移的類型，且當(dāng)病理分期處于Ⅲ期后，更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，但是在不易轉(zhuǎn)移的癌癥組織中，GP73就不會(huì)呈現(xiàn)高表達(dá)[13]。這一現(xiàn)象預(yù)示了GP73與腫瘤轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性。本結(jié)果顯示腫瘤大小≤3cm、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期患者血清GP73均明顯高于腫瘤大?。?cm和TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者（P＜0.05）。上述結(jié)果提示肝癌患者血清GP73水平與腫瘤大小和TNM分期有一定聯(lián)系，GP73可能成為一類具有較高潛在價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物。最新的研究[14]發(fā)現(xiàn)了干擾肝癌細(xì)胞中的GP73的表達(dá)，可影響腫癌增殖，這一機(jī)制是通過影響腫瘤細(xì)胞EMT進(jìn)行的；通過干擾GP73后細(xì)胞遷移和侵襲能力的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)干擾GP73可顯著抑制腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲能力，從而GP73可能參與腫瘤轉(zhuǎn)移過程。但原發(fā)性肝癌的轉(zhuǎn)移、發(fā)生和發(fā)展是多因素共同誘發(fā)的過程，GP73在肝癌組織中如何運(yùn)輸、合成、分泌的具體生物功能還需進(jìn)一步研究[15]。

肝癌不同血清GP73水平患者預(yù)后比較發(fā)現(xiàn)血清GP73高表達(dá)肝癌患者 （血清GP73≥125.64ng/ml）和血清GP73低表達(dá)肝癌患者（血清GP73＜125.64ng/ml）中位生存時(shí)間分別為22.84個(gè)月和21.99個(gè)月，差異比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。上說結(jié)果提示肝癌患者血清GP73水平與患者預(yù)后無明顯關(guān)系，我們認(rèn)為這可能與本研究樣本量較少有關(guān)，還需要進(jìn)行大樣本量深入研究證實(shí)。

綜上所述，肝癌患者血清GP73水平有所升高，與腫瘤大小和TNM分期有一定聯(lián)系，與患者預(yù)后無明顯關(guān)系。