李小紅

(濮陽市婦幼保健院輸血科，河南 濮陽 457000)

血型抗體存在 “天然抗體”和免疫性抗體兩種。輸血、妊娠是產(chǎn)生同種免疫抗體的主要原因。在臨床上，除了ABO、Rh血型抗體外，其他如Kell、Duffy、Kidd等血型系統(tǒng)也有報道，但不常見。孕婦比較容易產(chǎn)生血型抗體，它常引起免疫溶血性輸血反應(yīng)(HTR)和新生兒溶血病(HDN)的發(fā)生。本文通過分析濮陽地區(qū)血型ABO正反不一致、不規(guī)則抗體及弱D等情況以探討在基層婦幼醫(yī)院圍產(chǎn)期孕婦血型鑒定與抗體檢測的重要性，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選取2013年至2016年在本院門診及入院待產(chǎn)孕婦為研究對象，根據(jù)知情同意原則分別采集不抗凝血3ml和EDTA抗凝血2ml。

1.2 主要試劑 ABO紅細(xì)胞、抗-A、抗-B、抗-D血清、抗球蛋白試劑、抗體篩選紅細(xì)胞及鑒定譜細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）；抗球蛋白微柱凝膠卡（長春博訊生物技術(shù)有限公司）；所有試劑都在有效期內(nèi)。

1.3 方法 血型ABO正反定型、RhD血型、ABO血型亞型確認(rèn)試驗、不規(guī)則抗體篩選與鑒定試驗、間接抗人球蛋白試驗及吸收放散試驗，依照文獻(xiàn)[1]，嚴(yán)格按試劑說明書操作。

2 結(jié)果

2.1 ABO血型正反定型不一致6例，其原因分布見表1。

2.2 檢出112例RhD陰性，確認(rèn)2例弱D，共檢出19例不規(guī)則抗體陽性。其中抗-D14例 （73.7%），抗-E 4例（21.1%），抗-C 1例（5.2%）。

3 討論

ABO定型錯誤將造成嚴(yán)重的輸血后果，可能威脅患者的生命。只有正確進(jìn)行ABO血型的定型，才可能保障輸血的有效性和安全性。排除人為因素，出現(xiàn)ABO血型正反定型結(jié)果不一致的原因可能是技術(shù)問題或是被檢者自身ABO抗原或抗體存在問題。如表1中，均由于正反定型不一致而發(fā)現(xiàn)的問題，并進(jìn)一步查找原因。如果抗體只是減弱，反定型可以通過增加反應(yīng)時間或加大血清量并在4℃下放置5～10min后再進(jìn)行試驗。由于ABO亞型的紅細(xì)胞抗原性減弱，抗-A或抗-B的實際有時不能檢出其抗原性，造成定型的困難。吸收放散試驗是敏感的血清學(xué)方法，可以用來檢測抗原，也可以用于檢測抗體，在條件有限的基層醫(yī)院，靈活運(yùn)用吸收放散試驗鑒定ABO血型。血型正反定型不符的原因可以是亞型引起，也可以是由IgM性質(zhì)的不規(guī)則抗體（如抗-M，-N，-P）。表1中，病例編號4，6分別是抗-M和冷凝集素引起的正反定型不一致?？筂抗體是MN血型系統(tǒng)中的一種血清抗體。在血型鑒定正反不合以及交叉配血不符合時常被發(fā)現(xiàn)[2，3]。當(dāng)懷疑存在冷自身抗體時，要把患者紅細(xì)胞用溫鹽水洗滌3遍，然后再做常規(guī)ABO血型正反定型檢測[4]。冷凝集素是冷反應(yīng)性紅細(xì)胞抗體[5]，一般置37℃溫育均能散開。

表1 6例血型正反定型不一致血清學(xué)結(jié)果及原因分析

當(dāng)工作中遇到正反定型不符時，考慮亞型還是不規(guī)則抗體引起，可根據(jù)反定型中O細(xì)胞和患者的血清反應(yīng)格局做出初步判斷，當(dāng)O細(xì)胞和患者的血清無凝集時考慮是亞型，反之則考慮不規(guī)則抗體。同時做自身紅細(xì)胞做對照，以確定自身抗體的干擾。

不規(guī)則抗體是指紅細(xì)胞ABO血型抗-A、抗-B和抗-AB以外的其他血型抗體，多為IgG抗體，是臨床輸血引起免疫性溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病的重要原因之一[6]。本調(diào)查中19例檢測出Rh系統(tǒng)的抗體，這19例孕婦分娩前備血必須選用紅細(xì)胞不含相應(yīng)抗原的血液。大量研究表明，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是輸血無效及溶血性輸血不良反應(yīng)的主要原因[7，8]。她們分娩的新生兒高度警惕發(fā)生Rh-HDN。Rh-HDN是由Rh血型系統(tǒng)抗體引起的，Rh血型抗體是由妊娠或輸血產(chǎn)生的同種異型免疫抗體。在臨床工作中，孕婦做抗體篩選非常有必要，有妊娠史(包括流產(chǎn)史)、輸血史的母親再次妊娠時，應(yīng)該特別注意Rh-HDN[9，10]。Rh血型系統(tǒng)能夠引起HDN的除D外還有C、c、E、e，以D抗原不合最為常見。實驗室常規(guī)檢測中，當(dāng)在鹽水介質(zhì)中反應(yīng)為陰性，間接抗人球蛋白試驗（IAT）為陽性時可認(rèn)為弱D表現(xiàn)型（包括弱D和部分D），但其不能區(qū)別弱D或部分D[11]。本文中2例弱D或部分D，其備血或輸血都以RhD陰性對待。RhD陰性孕婦一般在整個孕期要定期檢測不規(guī)則抗體及抗體效價，對已有不規(guī)則抗體產(chǎn)生者，為了避免胎兒在母體繼續(xù)遭受侵害，需擇期住院，盡早分娩。有研究表明，體血液循環(huán)中胎兒紅細(xì)胞的出現(xiàn)率為6-7%，晚期可達(dá)30%，在這種情況下，大約有5%-7%的RhD陰性孕婦產(chǎn)生抗體，妊娠次數(shù)的增加在抗-D抗體的產(chǎn)生中具有相當(dāng)重要的意義[12，13]。本文中抗-E產(chǎn)生的比例也不低，這與文獻(xiàn)相一致的[14]，我國人群中Rh(E)陰性頻率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于Rh(D)陰性的頻率，而Rh(E)抗原又是Rh血型系統(tǒng)中除Rh（D）之外最強(qiáng)的抗原，Rh(E)陰性者因妊娠接受Rh(E)抗原刺激后容易產(chǎn)生抗-E[15]。故抗體篩查應(yīng)列入常規(guī)檢查項目。

產(chǎn)科出血大多為大量急驟性的出血，如果失血量達(dá)到一定程度時，發(fā)生彌漫性血管內(nèi)凝血、休克等嚴(yán)重并發(fā)癥。一旦發(fā)生產(chǎn)科出血，除采取積極有效的治療措施，科學(xué)有效地對產(chǎn)科大量出血患者實施輸血，以提高患者生存率和生存狀態(tài)是至關(guān)重要的。故孕婦正確的血型抗體鑒定在孕期開展并記錄，以避免分娩時緊急輸血配血困難。實驗室采用多種法進(jìn)行抗體篩查，保證血型抗體的檢出率。對于正反定型不符必須引起重視，檢驗人員應(yīng)當(dāng)做好記錄、分析原因、通過相關(guān)試驗準(zhǔn)確及時鑒定ABO血型以確保臨床用血安全。實驗室制定并嚴(yán)格遵守血型正反定型不一致、不規(guī)則抗體篩查等標(biāo)準(zhǔn)操作流程，條件相對薄弱的地區(qū)醫(yī)院也可將標(biāo)本送至上一級血型參比實驗室檢測。盡可能避免血型抗體漏檢，減少醫(yī)療事故的發(fā)生。