1. 棘球蚴病。棘球蚴病俗稱包蟲(chóng)病,由棘球?qū)俳{蟲(chóng)幼蟲(chóng)(中絳期)──棘球蚴(包蟲(chóng))寄生于人和動(dòng)物肝、肺等器官所引起的一類重要人獸共患寄生蟲(chóng)病。
2. 病原學(xué)。棘球蚴屬于絳蟲(chóng)剛圓葉目帶科棘球?qū)?,棘球?qū)俚慕{蟲(chóng)種類有細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)、多房棘球絳蟲(chóng)、少節(jié)棘球絳蟲(chóng)、石渠棘球絳蟲(chóng)、加拿大棘球絳蟲(chóng)等。
1.包蟲(chóng)病在全國(guó)的流行情況。全國(guó)棘球蚴病流行縣有368/413個(gè),分布于內(nèi)蒙古、四川、西藏、甘肅、青海、寧夏、云南、陜西和新疆等9?。ㄗ灾螀^(qū)),其中115個(gè)縣為細(xì)粒棘球蚴病和多房棘球蚴病混合流行區(qū)。
青海、西藏、甘肅等3?。ㄗ灾螀^(qū))的犬糞棘球蚴絳蟲(chóng)抗原陽(yáng)性率較高;西藏、青海和四川等3?。ㄗ灾螀^(qū))的人群棘球蚴病檢出率較高;西藏、青海和四川等3省(自治區(qū))的家畜棘球蚴病檢出率較高。
在中國(guó)流行的蟲(chóng)株(中間宿主體內(nèi))里,細(xì)粒棘球蚴G1較廣泛分布于家畜和人,多房棘球蚴較廣泛分布于人和嚙齒動(dòng)物。四川、新疆、黑龍江發(fā)現(xiàn)少量G3、G6、G10人體病例;石渠棘球蚴一般分布于青藏高原的嚙齒動(dòng)物。
2012-2016年中國(guó)流行區(qū)學(xué)校兒童棘球蚴病患情況和血清學(xué)調(diào)查和野生動(dòng)物棘球蚴病感染情況調(diào)查結(jié)果都顯示,內(nèi)蒙古、四川、甘肅、青海、寧夏和新疆等地的陽(yáng)性率和感染檢出率較高。
2.包蟲(chóng)病在內(nèi)蒙古的流行情況。流行區(qū)包括東烏珠穆沁旗、化德縣、太仆寺旗、新巴爾虎右旗、額爾古納市等23個(gè)市、縣、區(qū)、旗。1985年唐崇惕等人于內(nèi)蒙古倫貝爾草原上動(dòng)物多房棘球蚴感染情況:布氏田鼠和長(zhǎng)爪沙鼠的平均感染率分別為2.43%和16.67%。1998-2001年唐崇惕等人于內(nèi)蒙古倫貝爾草原上動(dòng)物多房棘球蚴感染情況:布氏田鼠感染率分別為0.92%,其他6種嚙齒動(dòng)物未發(fā)現(xiàn)感染情況。
1. 切斷病原在犬—家畜之間的傳播鏈:如驅(qū)蟲(chóng)和疫苗接種。
2. 禁止隨意拋棄荷有包蟲(chóng)的動(dòng)物臟器和喂犬(注意屠宰檢疫、廢棄臟器無(wú)害化處理等環(huán)節(jié))。
研究結(jié)果表明,利用大腸桿菌生產(chǎn)的基因工程亞單位重組疫苗(GST-EG95+Quil A)對(duì)綿羊進(jìn)行二免后可使免疫動(dòng)物產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的抵抗棘球蚴感染的保護(hù)力(90%以上)。
基因工程EG95亞單位重組抗原疫苗免疫保護(hù)作用:已有大量文獻(xiàn)報(bào)道,基因工程亞單位重組疫苗(EG95)在綿羊和牛進(jìn)行二免后可使免疫動(dòng)物產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的抵抗棘球蚴感染的保護(hù)力(80%以上)。基因工程亞單位重組疫苗(EG95)已在中國(guó)、阿根廷等國(guó)家推廣使用和評(píng)價(jià)疫苗效果。
中國(guó)農(nóng)業(yè)研究院生物制品工程技術(shù)中心引進(jìn)新西蘭專利技術(shù)生產(chǎn)動(dòng)物包蟲(chóng)病基因工程重組抗原疫苗,疫苗產(chǎn)品為白色疏松的凍干苗。疫苗主要組成為細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)EG95重組抗原和Quil-A佐劑,并取得國(guó)家一級(jí)新獸藥證書(shū)。后將此技術(shù)轉(zhuǎn)讓至重慶澳龍生物制品有限公司。
農(nóng)業(yè)部文件(農(nóng)醫(yī)發(fā)[2014]10號(hào))常見(jiàn)動(dòng)物疫病免疫推薦方案(試行)規(guī)定:首次將包蟲(chóng)病列為免疫病種之一;農(nóng)業(yè)部文件(農(nóng)醫(yī)發(fā)[2016]10號(hào))國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃規(guī)定:在包蟲(chóng)病重疫區(qū),由省級(jí)畜牧獸醫(yī)主管部門(mén)會(huì)同有關(guān)部門(mén)根據(jù)監(jiān)測(cè)情況自主選擇免疫的策略;農(nóng)業(yè)部文件(農(nóng)醫(yī)發(fā)[2017]8號(hào))國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃規(guī)定:在包蟲(chóng)病流行區(qū)對(duì)新補(bǔ)欄養(yǎng)只進(jìn)行包蟲(chóng)病免疫,群體免疫密度應(yīng)常年保持在90%以上,應(yīng)免疫動(dòng)物免疫密度達(dá)到100%。
農(nóng)業(yè)部文件(農(nóng)醫(yī)發(fā)[2018]1號(hào)/20180116)發(fā)布了針對(duì)包蟲(chóng)病的政策:包蟲(chóng)病是國(guó)家強(qiáng)制免疫的5種疫病病種之一;在包蟲(chóng)病流行區(qū),對(duì)新生羔羊、補(bǔ)欄羊及時(shí)進(jìn)行包蟲(chóng)病免疫;群體密度應(yīng)常年保持在90%以上,其中應(yīng)免動(dòng)物免疫密度達(dá)到100%。
一是死后診斷,即剖檢法(抽樣調(diào)查);二是生前診斷,包括糞蟲(chóng)卵與節(jié)片鏡檢、檳榔堿瀉下法(抽樣調(diào)查)、糞DNA檢測(cè)法(PCR、LAMP、RPA、實(shí)時(shí)熒光PCR)、糞抗原ELISA法等?,F(xiàn)國(guó)際上仍普遍采用“氫溴酸檳榔堿下瀉法”和“剖檢法”(金標(biāo)準(zhǔn))檢查犬科動(dòng)物棘球絳蟲(chóng)感染情況。
1. 氫溴酸檳榔堿下瀉法:(1)經(jīng)口灌喂氫溴酸檳榔堿,腸道痙攣、引起下泄,檢查下泄糞便;(2)標(biāo)準(zhǔn)糞便:帶腸黏膜凍狀下泄物;(3)優(yōu)點(diǎn):客觀、真實(shí)、準(zhǔn)確;(4)缺點(diǎn):環(huán)境污染、操作者有一定風(fēng)險(xiǎn)、可能會(huì)有10%~20%的犬不下瀉。
2. 糞抗原ELISA法(酶聯(lián)吸附測(cè)定)。(1)試劑盒:購(gòu)置市售商品試劑盒(雙抗體夾心法);(2)優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便、可批量檢測(cè)等;(3)敏感性低、目前市面上的試劑盒只針對(duì)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)(狹義種)、對(duì)樣品新鮮度要求較高等。
生前診斷主可依靠影像學(xué)方法(B超/x光);死后診斷主要是剖檢法,包括宰后肉眼觀察、實(shí)驗(yàn)室診斷(PCR、核苷酸序列測(cè)定、RFLP-PCR、RPA、RTPCR等)?,F(xiàn)普遍采用國(guó)際公認(rèn)的剖檢法,對(duì)家畜宰后進(jìn)行棘球蚴感染的調(diào)查,該法取得的調(diào)查結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”;對(duì)可疑病灶或包囊、一種宿主可感染多種棘球蚴等、有時(shí)無(wú)法鑒定;目前對(duì)中間宿主患棘球蚴病的生前診斷尚無(wú)行之有效的方法;一些血清學(xué)方法逐漸應(yīng)用于生前流行病學(xué)和群體感染情況的調(diào)查。
細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)基因型(測(cè)序)存在G3和G6基因型,特別是G6基因型的存在應(yīng)引引起注意:現(xiàn)有的診斷試劑盒可能造成漏檢,因?yàn)榕cG1基因型(普通綿羊株差異較大)。
蘭州獸醫(yī)研究所分離篩選了棘球蚴囊液種極具應(yīng)用價(jià)值的抗原成分,并制備了羊包蟲(chóng)病檢測(cè)試劑盒。該試劑盒與同類試劑盒的檢測(cè)敏感性相比較,經(jīng)試驗(yàn)證明,該試劑盒對(duì)剖檢及分子生物學(xué)鑒定為包蟲(chóng)病的羊血清檢測(cè)數(shù)量為200份,陽(yáng)性檢測(cè)的敏感性為83%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他試劑盒,檢測(cè)陰性羊血清840份,陰性準(zhǔn)確率為97.2%。
疫苗免疫動(dòng)物后血清抗體的檢測(cè)關(guān)系到免疫動(dòng)物是否有免疫保護(hù)力,更關(guān)系到動(dòng)物群體免疫抗體水平和密度。在對(duì)市售EG95抗體ELISA檢測(cè)試劑盒的對(duì)比實(shí)驗(yàn)中,對(duì)已知的10份綿羊陰性血清(健康對(duì)照羊)檢測(cè)的結(jié)果顯示,市售產(chǎn)品中一半會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性率過(guò)高,而蘭州獸醫(yī)研究所研制的EG95抗體ELISA檢測(cè)試劑盒的假陽(yáng)性率僅有4.4%。