朱艷彬 劉同庫 馬 雋 信業(yè)久 王 丹

(北華大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 吉林 132001)

C反應(yīng)蛋白(CRP)以參與炎癥反應(yīng)為主要作用，進化非常保守。若CRP基因發(fā)生遺傳變異，可能會改變其表達、結(jié)構(gòu)及功能；從而影響個體的心肌梗死易感性，急性心肌梗死(AMI)發(fā)病之前會有很長的隱匿期〔1〕，AMI危險性大，及早發(fā)現(xiàn)并預(yù)防越來越刻不容緩，如果能在發(fā)病之前進行檢測、并預(yù)見這種疾病的可能性，及早的進行干預(yù)，必定具有很重大的臨床價值〔2〕。此外，分子學(xué)、基因?qū)W是現(xiàn)在的研究趨勢，在這種大背景下,AMI的基因檢測價值凸顯，CRP基因?qū)W研究成為當今熱點〔3〕。本文探討AMI發(fā)病風險和CRP基因T-757C多態(tài)性的相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1臨床資料 選擇北華大學(xué)附屬醫(yī)院2015年12月至2017年2月住院的AMI患者125例(AMI組)，全部由心電圖(ECG)、超聲心動圖或冠狀動脈CT血管成像、數(shù)字減影血管造影等確診。選擇同一期間體檢的健康觀察對象85例作為對照組。

1.2一般資料 收集全部觀察對象的基本資料。

1.3CRP基因T-757C多態(tài)性檢測 參照以往研究方法〔3〕。

1.4AMI基因報告 分為以下6個階段①-：患病的風險非常低,幾乎不患本病。②-:發(fā)生AMI的概率較低,相當與普通人。③+-:發(fā)生AMI的風險有，但不高，發(fā)病概率略高于普通人，建議該人群日常生活中注重預(yù)防保健，無需治療。④+:AMI發(fā)病因素較高，需要高度重視，預(yù)防為主，注意預(yù)防保健，定期檢查身體，若生活因素控制不佳，發(fā)病率提高，可通過控制生活習(xí)慣，降低發(fā)病率。⑤:AMI的發(fā)病風險很高，若生活習(xí)慣控制不佳，很容易發(fā)病，若注重生活因素控制，可有效降低發(fā)病概率。建議及早預(yù)防保健和身體檢查。⑥:AMI的發(fā)病風險極高，若生活因素控制欠佳，極易發(fā)病，同樣的，若注重控制生活因素，如心情平和等，可有效降低發(fā)病概率。建議及早預(yù)防保健及規(guī)范、定期專項體檢。①～③認為陰性,④～⑥認為陽性。

1.5AMI的基因檢測適應(yīng)證〔4〕①目前尚無臨床狀,但危險因素很多，如中老年男性，絕經(jīng)后女性；不良飲食習(xí)慣，長期吸煙史，肥胖或者缺乏運動；有家族史，血糖、血壓及血脂等異常；胰島素抵抗增強；一些凝血因子的增高；高纖維蛋白原血癥;尿酸增高等?？梢越?jīng)由基因檢測，預(yù)測觀察對象的AMI發(fā)病概率，稱為一級預(yù)防。②受檢查已經(jīng)出現(xiàn)胸悶、胸痛、呼吸困難等臨床表現(xiàn),可抽血檢測基因，評估梯度，以便進行下一步檢測或保健。③抑郁、焦慮等與AMI癥狀相似的病變,心電圖不典型者可抽血進行基因檢測。

1.6血清CRP水平檢測 AMI組發(fā)病時間短于24 h，并及時采集空腹靜脈血，取5 ml血液于室溫下靜置30～60 min，離心后得到需要的血清，選擇酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測CRP水平，檢測之前血清需要放入-70℃冰箱內(nèi)保存。

1.7統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件行t及χ2檢驗；偏態(tài)分布者選擇中位數(shù)/四分位數(shù)間距(M/IQR)表示，并進行Wilcoxon秩和檢驗或Kruskal-WallisH檢驗。校正其他因素對血清CRP濃度的影響時選擇多變量Logistic回歸分析；臨床參數(shù)及血清CRP水平的關(guān)聯(lián)性分析選擇多元線性回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1一般臨床資料對比 與對照組相比較，AMI組年齡更長，男性比例明顯提高，吸煙與高血壓的比例更高，血糖水平更高，而高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平明顯減低(P<0.05)，空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2CRP基因T-757C多態(tài)性 PCR擴增獲取314 bp的特異性片段，該片段經(jīng)過酶切后在兩組中皆呈現(xiàn)CC(314 bp)、TC(314 bp、234 bp和80 bp)和TT(234 bp和80 bp)3種基因型。兩組基因型分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有群體代表性，見表2。

表1 兩組一般臨床資料比較

2.3血清CRP水平 AMI組血清CRP濃度明顯高于對照組(5.985/6.255 μg/ml:3.269/1.294 μg/ml，P<0.01)，且經(jīng)Logistic回歸分析校正AMI相關(guān)臨床因素，包括性別、年齡、吸煙、高血壓、血糖和血脂異常等，兩組血清CRP水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義(OR=2.088，95%CI1.259～3.458，P<0.01)。

2.4AMI患者CRP基因T-757C多態(tài)性與血清CRP水平的相關(guān)性 去除以上提到的臨床影響因素后，分析比較AMI患者各種基因型的血清CRP水平，CC(4.071/2.492 μg/ml)、TC(5.744/6.319 μg/ml)及TT(6.126/6.627 μg/ml)基因型之間CRP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。CC、TC基因型的AMI患者≥60歲和<60歲的CRP水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而TT基因型的AMI患者在不同年齡段CRP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表3。

表3 不同年齡AMI患者CRP水平比較(M/IQR,μg/ml)

3 討 論

CRP來源于肝臟，作為當前炎癥標志中探討最廣泛的因子，以血清濃度反映感染或組織損傷。CRP的主要生物學(xué)功能是通過其識別病原體和宿主的能力受損的細胞和補體系統(tǒng)的招聘和吞噬細胞介導(dǎo)的消除〔5〕。CRP還是一項新的心肌標志物，心血管疾病的病理改變就是血管發(fā)生炎癥反應(yīng)，進而出現(xiàn)粥樣硬化等表現(xiàn)，因此在這個組織受損的過程中CRP值也會升高，進而成為實驗室檢測指標〔6〕。文獻表示，超敏CRP(hsCRP)濃度是心血管疾病發(fā)展過程中的促炎性反應(yīng)，其濃度的升高和心血管疾病聯(lián)系緊密〔7〕。CRP具有多種生物學(xué)效應(yīng):①和補體發(fā)生反應(yīng)，補體被激活補體，CRP發(fā)生氧化，促進補體的吞噬作用；②CRP本身可促進與外源性凝血機制相關(guān)的組織因子的增加，從而增加血栓的形成;③改變原本的內(nèi)皮細胞一氧化氮(NO)的表達與形成，通過影響血管內(nèi)皮細胞功能，加快白細胞介素(IL)-6等因子的生成，同時降低內(nèi)皮細胞NO合酶mR1VA的穩(wěn)定性，進一步降低NO量，不易產(chǎn)生新生血管，進而改變心血管結(jié)構(gòu)；④降低LDL-C的作用。血清CRP濃度成為冠狀動脈病變高危人群的獨立預(yù)測指標。CRP是冠心病的重要危險因子。因此，生物學(xué)層面的CRP基因的遺傳變異可能調(diào)節(jié)AMI風險。CRP基因已被映射到人類染色體1q21和1q23之間。它包含2 263個核苷酸，有1個單一的內(nèi)含子。CRP的表達主要是在轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)，而轉(zhuǎn)錄后機制也有助于CRP基因表達的調(diào)控。研究已經(jīng)表明，在CRP基因啟動子區(qū)常見的多態(tài)性可能是AMI的風險中扮演著重要的角色〔3,8〕。

血清CRP、白細胞及白蛋白水平受遺傳因素影響。位于啟動序列的CRP基因286C>T>A屬于功能性多態(tài)性位點，和CRP水平有相關(guān)性。CRP基因T-757C也位于啟動子區(qū)，在轉(zhuǎn)錄中起重要作用，和286C>T>A間關(guān)系密切〔9〕。所以推測，T-757C也可能通過轉(zhuǎn)錄、翻譯，間接影響血清CRP水平。

本研究顯示，AMI患者和健康人均存在CRP基因T-757C多態(tài)性，且T-757C多態(tài)性與AMI明顯相關(guān)。但本研究中各基因型樣本特別是CC型樣本量很少，統(tǒng)計結(jié)果可能存在一定誤差，還需進一步研究CRP基因多態(tài)性和AMI的相關(guān)性。采用CRP基因多態(tài)性檢測參與評估AMI的風險性；增加了對AMI發(fā)生發(fā)展的認識〔10〕。對于臨床上懷疑AMI的患者,可以通過抽血檢查基因的方式預(yù)測AMI的發(fā)病風險,改變了以往必須經(jīng)影像檢查診斷心臟病變的局面，減輕冠心病患者對臨床檢查存在的恐懼和抵觸情緒。