石 妍 ，梁頒捷 ，張珊珊，張紹升 ，劉國坤 ，顧 鋼 ，肖 順 *

（1.福建農(nóng)林大學(xué)植物保護學(xué)院，福州 350002；2.福建省煙草公司三明市公司，福建三明 365000；3.福建省煙草公司 煙草科學(xué)研究所，福州 350003）

煙草灰霉病是由半知菌絲孢目真菌灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）引起的病害，煙株的整個生長發(fā)育期均可發(fā)生，在我國黑龍江、陜西、福建、云南等煙區(qū)普遍發(fā)生且較為頻繁[1-3]。其病原菌主要侵染葉片和莖部，造成煙葉組織壞死、腐爛，對煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)造成一定影響[1,4]。

目前有關(guān)異菌脲與助劑的協(xié)同增效研究鮮有報道。本試驗選用5種有機硅助劑和1種植物油助劑，研究其對異菌脲防治煙草灰霉病的增效作用及其增效機理，以期篩選出對異菌脲增效顯著的助劑，用于生產(chǎn)實踐。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試藥劑及助劑

供試藥劑：50%異菌脲可濕性粉劑，江蘇快達農(nóng)化股份有限公司。

有機硅助劑：杰效利、絲潤，邁圖高新材料（南通）有限公司；久農(nóng)豐，石家莊久農(nóng)豐化工科技有限公司；要友，青島海利諾生物科技有限公司；百士威增效王，山東百士威農(nóng)藥有限公司。

植物油助劑：松樹油，福建省泉州德盛農(nóng)藥有限公司。

1.1.2 供試菌株和培養(yǎng)基

煙草灰霉病菌由福建農(nóng)林大學(xué)植物病原實驗室從福建省泰寧縣煙區(qū)發(fā)病田中分離得到并保存。

2.2.4 處理階段（A）。筆者持續(xù)多年，一直從事新員工培訓(xùn)的授課，每一年的處理階段，都與新的一年的計劃階段緊密相連，這樣的思考和PDCA的進程，形成螺旋形的思路從過去向未來延續(xù)。

培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基。

1.1.3 供試煙草

煙草于2017年4月采自福建省三明市煙區(qū)。

1.2 試驗方法

1.2.1 助劑對異菌脲抑制煙草灰霉病菌的增效作用

參照農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則（殺菌劑），采用平皿法[8]。

藥劑處理：將50%異菌脲可濕性粉劑按使用要求用無菌水稀釋1 250倍，使藥劑質(zhì)量濃度為0.80 mg/L。按1%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的用量將6種助劑分別添加到上述異菌脲稀釋液中，充分混勻，以不添加助劑的同等質(zhì)量濃度異菌脲藥液為對照處理（CK1）。在無菌操作條件下，將含有不同助劑的異菌脲藥液分別加入到PDA培養(yǎng)基中（兩者質(zhì)量比1∶9），充分搖勻，然后等量倒入3個直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，制成一定濃度的含藥和助劑的平板。以不含藥劑的處理作為空白對照（CK2），每處理3次重復(fù)。

接種：將培養(yǎng)好的病原菌，在無菌條件下用直徑5 mm的滅菌打孔器，自菌落邊緣切取菌餅，將菌餅接種于平板中央，菌絲面朝上，蓋上皿蓋，置于28℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)5 d。

調(diào)查：采用十字交叉法測量菌落直徑，根據(jù)公式（1）計算含助劑的藥劑對病原菌的菌絲生長抑制率。

1.2.2 助劑對異菌脲藥液表面張力的影響

1.2.1 中配制的含助劑藥液作為待測液，采用表面張力儀測定其表面張力，每處理重復(fù)3次，取其平均值。

1.2.3 助劑對異菌脲藥液擴展直徑的影響

參照劉永強等[9]的方法。將1.2.1中配制的含助劑藥液作為待測液，用微量移液槍移取10 μL待測液滴于培養(yǎng)皿底部中央，30 s后，用記號筆標(biāo)注擴展區(qū)域，測量液滴擴展的最大和最小直徑，取其平均值（即為藥液擴展直徑），每處理重復(fù)3次。

1.2.4 助劑對異菌脲藥液在煙草葉片上最大持留量的影響

參考張忠亮等[10]的方法。剪取煙草葉片，測量葉片面積（S），用精密電子天平稱量葉片質(zhì)量（m0），然后放入各處理藥液中浸泡10 s取出，垂直懸置，待無液滴下落時稱其質(zhì)量（m1）。根據(jù)公式（2）計算藥液最大持留量Rm。每處理重復(fù)5次，取平均值。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)采用Excel和DPS軟件進行分析處理，采用Duncan氏新復(fù)極差檢驗差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 助劑對異菌脲抑制煙草灰霉病菌的增效作用

試驗結(jié)果見圖1。添加6種助劑的異菌脲藥液對煙草灰霉病菌的活性高于未添加助劑的藥液，但不同的助劑對異菌脲的增效作用不同。有機硅助劑杰效利、絲潤、久農(nóng)豐、要友對異菌脲抑制病原菌菌絲生長具有較明顯的增效作用。異菌脲對灰霉病菌菌絲生長抑制率為66.39%，添加有機硅助劑杰效利、絲潤、久農(nóng)豐和要友后，藥劑對菌絲的生長抑制率分別為88.89%、87.78%、86.94%和83.33%；有機硅助劑百士威對異菌脲抑制病原菌菌絲生長的增效作用較低，菌絲生長抑制率為76.67%。而植物油助劑松樹油對異菌脲抑制病原菌菌絲生長的增效作用不明顯，菌絲生長抑制率為74.72%。

圖1 助劑對異菌脲抑制煙草灰霉病的增效作用

2.2 助劑對異菌脲藥液表面張力、擴展直徑及持留量的影響

6種助劑對異菌脲藥液表面張力、擴展直徑及在煙草葉片上最大持留量的影響見表1。

由表1可以看出，6種助劑均可以降低異菌脲藥液的表面張力。添加有機硅助劑藥劑的表面張力小于添加植物油助劑藥劑的表面張力。不同有機硅助劑對藥液表面張力的降低也存在差異。其中，有機硅助劑杰效利的作用最強，表面張力下降42.83%；添加有機硅助劑要友、絲潤、百士威、久農(nóng)豐的異菌脲藥液表面張力分別下降38.37%、32.81%、27.72%和25.73%。添加植物油助劑松樹油后藥液的表面張力下降11.41%。

藥液的擴展直徑反映藥液在作物葉片表面的鋪展能力。試驗結(jié)果表明：供試的6種助劑均可增加異菌脲藥液的擴展直徑。其中，添加有機硅助劑要友和杰效利的異菌脲藥液的擴展直徑增幅較大，增幅分別為310.00%和290.91%；有機硅助劑絲潤、久農(nóng)豐、百士威效果居中；植物油助劑松樹油效果較差，增幅僅為16.36%。

表1 助劑對藥液表面張力、擴展直徑及葉片最大持留量的影響

供試6種助劑均能增加異菌脲藥液在煙草葉片上的持留量。其中，植物油助劑松樹油效果較好，最大持留量增加61.22%；5種有機硅助劑對藥液持留量的增幅較小，增幅依次為杰效利＞絲潤、要友＞久農(nóng)豐＞百士威。

3 結(jié)論與討論

助劑對異菌脲抑制煙草灰霉病菌菌絲生長具有較明顯的增效作用，不同助劑與異菌脲混配使用效果有差異。供試6種助劑的增效作用依次為：杰效利＞絲潤＞久農(nóng)豐＞要友＞百士威＞松樹油。有機硅助劑的增效作用大于植物油助劑。其增效機制可能是有機硅助劑顯著降低異菌脲藥液的表面張力，增大藥液的擴展直徑，促進藥液在介質(zhì)中的滲透，充分發(fā)揮藥效。助劑對藥液物理性狀的改變可能與其增效作用有關(guān)[11]。

本試驗中，添加有機硅助劑的異菌脲藥液與添加植物油助劑的藥液相比，表面張力更低，擴展直徑更大，但藥液持留量較低，這可能是因為藥液添加有機硅助劑后表面張力過低，使其在煙草葉片表面形成一層極薄的“液膜”，而導(dǎo)致藥液流失[11]。此外，不同有機硅助劑的增效作用也存在差異，這可能是由于不同有機硅助劑的結(jié)構(gòu)及質(zhì)量不同，對藥劑的分散作用也不同[10]。

介質(zhì)不同，助劑對藥劑的分散作用也不同。劉鵬飛等[6]采用菌絲生長速率法、菌絲干重法和離體葉片法測定助劑對啶菌唑的增效作用，結(jié)果顯示，3種測定方法篩選出的助劑種類也有差異。本試驗僅在室內(nèi)條件下初步探討助劑對異菌脲藥液的增效作用，此結(jié)果需進一步通過活體植株試驗、田間藥效試驗明確，并確定其安全有效的使用劑量。