郭建鳳，王彥平，趙雪艷，藺海朝，王 誠，王懷中

（山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所山東省畜禽疫病防治與繁育重點實驗室，山東 濟南 250100）

隨著養(yǎng)豬生產(chǎn)集約化程度的不斷提高，不同生長階段豬的轉(zhuǎn)群或商品豬調(diào)運屠宰場等都需要經(jīng)過長途運輸環(huán)節(jié)，運輸過程中的驅(qū)趕、裝卸、顛簸、摩擦、饑渴等應(yīng)激會導(dǎo)致生豬免疫力下降、生長發(fā)育遲緩、生產(chǎn)性能和肉品質(zhì)降低，發(fā)病率及死亡率升高，給養(yǎng)豬業(yè)帶來較大損失。為研究運輸對大約克及杜長大豬血液生化指標(biāo)的影響，選擇16頭大約克和18頭杜長大豬進行了本試驗，結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗豬選擇與處理

試驗于2016年11—12月在臨邑興隆原種豬場進行。選擇體重100～110 kg健康的大約克16頭、杜長大18頭，裝運前第1次采血，然后裝車運輸4 h到達屠宰場，運輸停止卸車前第2次采血，隨后在待宰車間靜養(yǎng)14 h屠宰，屠宰時第3次采血。每次采血后離心取血清備測理化指標(biāo)。試驗豬宰后采集背最長肌肉樣測定肉質(zhì)性狀及氨基酸、脂肪酸等含量。

1.2 測定指標(biāo)與方法

1.2.1 血清理化指標(biāo)測定 委托北京華英生物技術(shù)研究所測定。

1.2.2 肉質(zhì)指標(biāo)的測定 屠宰后取倒數(shù)第2至4肋骨處背最長肌，測定肉色、大理石紋、失水率、pH、L、a、b、電導(dǎo)率等常規(guī)指標(biāo)，測定方法參照參考文獻[1]；測定儀器：肉色、大理石紋為5分制比色卡，失水率為質(zhì)構(gòu)儀，型號TA-XT plus；電導(dǎo)率為德國產(chǎn)LF-STAR；L、a、b 為日本產(chǎn)的美能達肉色測定儀 CR-400；pH45、pH24h為德國產(chǎn)的pH-STAR測定儀；肌內(nèi)脂肪按“豬肌肉品質(zhì)測定技術(shù)規(guī)范（NY/T 821—2004）”方法測定。

1.2.3 肉成分測定 肌肉氨基酸測定利用酸水解法處理，并用液相色譜測定；肌肉脂肪酸組成參照“肉與肉制品脂肪酸測定（GB 9695.2—1988）”，用氣相色譜測定。

1.3 統(tǒng)計分析

采用IBM SPSS 22.0統(tǒng)計軟件比較均值模塊中的One-Way-ANOVA程序?qū)υ囼炈脭?shù)據(jù)進行方差分析，差異顯著則進行Duncan氏法多重比較分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 大約克運輸前、后及屠宰時血液理化指標(biāo)測定結(jié)果

由表1可見，大約克運輸前、后及屠宰時3次采血測定的理化指標(biāo)除總抗氧化能力和多巴胺差異不顯著外，其他指標(biāo)差異顯著或極顯著。其中，丙二醛以運輸后血清中含量最高為3.21 nmol/mL，比運輸前和屠宰時分別提高 2.88%（P＞0.05）、19.78%（P＜0.05）；乳酸以運輸前血清中含量最高，分別比運輸后和屠宰時血清中的乳酸提高 48.51%（P＜0.05）、20.97%（P＞0.05）；皮質(zhì)醇屠宰時血清中的含量最高，分別比運輸前、后血清中的皮質(zhì)醇提高 58.23%（P＜0.01）、72.81%（P＜0.01）；促腎上腺皮質(zhì)激素屠宰時血清中的含量最高，分別比運輸前、后血清中的促腎上腺皮質(zhì)激素提高 5.55%（P＜0.05）、1.96%（P＞0.05）；肌酸激酶屠宰時血清中的含量最高，其次是運輸后血清中含量較高，分別比運輸前提高 457.98%（P＜0.01）、373.48%（P＜0.01）；白細胞介素-1β運輸后血清中含量最高，其次是屠宰時血清中含量較高，分別比運輸前提高19.15%（P＜0.01）、12.63%（P＜0.05）；腫瘤壞死因子屠宰時血清中含量最高，分別比運輸前、后提高65.08%（P＜0.01）、22.90%（P＜0.01），其次是運輸后血清中含量較高，比運輸前提高 34.32%（P＜0.01）；結(jié)合珠蛋白運輸前含量最高，其次是運輸后較高，分別比屠宰時提高 31.07%（P＜0.01）、28.16%（P＜0.05）；去甲腎上腺素以屠宰時血清中含量最高，分別比運輸前、后提高8.91%（P＜0.01）、7.20%（P＜0.01）；腎上腺素運輸后血清中含量最高，其次是運輸前較高，分別比屠宰時提高 22.30%（P＜0.01）、17.94%（P＜0.01）。

2.2 杜長大運輸前、后及屠宰時血液理化指標(biāo)測定結(jié)果

由表2可見，杜長大商品豬運輸前、后及屠宰時3次采血測定的理化指標(biāo)除乳酸、促腎上腺皮質(zhì)激素和多巴胺差異不顯著外，其他指標(biāo)差異顯著或極顯著。其中，丙二醛運輸后血清中含量最高，分別比運輸前和屠宰時提高 11.44%（P＞0.05）、31.15%（P＜0.01），其次是運輸前較高，比屠宰時提高 17.69%（P＜0.05）；總抗氧化能力運輸前血清中含量最高，分別比運輸后和屠宰時提高 3.93%（P＞0.05）、5.11%（P＜0.05），其他差異不顯著；皮質(zhì)醇屠宰時血清中含量最高，分別比運輸前、后提高 52.31%（P＜0.01）、69.98%（P＜0.01），其他差異不顯著；肌酸激酶屠宰時血清中含量最高，其次是運輸后較高，分別比運輸前提高515.57%（P＜0.01）、366.42%（P＜0.01），其他差異不顯著；白細胞介素-1β運輸后血清中含量最高，分別比運輸前和屠宰時提高 5.96%（P＞0.05）、13.26%（P＜0.05），其他差異不顯著；腫瘤壞死因子屠宰時血清中含量最高，分別比運輸前、后提高 44.33%（P＜0.01）、18.22%（P＜0.01），其次是運輸后血清中含量較高，比運輸前提高22.08%（P＜0.01）；結(jié)合珠蛋白運輸前血清中含量最高，其次是運輸后較高，分別比屠宰時提高 37.86%（P＜0.05）、24.27%（P＞0.05），其他差異不顯著；去甲腎上腺素屠宰時血清中含量最高，其次是運輸后較高，分別比運輸前提高 7.29%（P＜0.01）、5.54%（P＜0.05），其他差異不顯著；腎上腺素運輸后血清中含量最高，分別比運輸前和屠宰時提高 9.01%（P＜0.01）、27.62%（P＜0.01），其次是運輸前較高，比屠宰時提高 17.07%（P＜0.01）。

表2 杜長大運輸前、后及屠宰時血液理化指標(biāo)測定結(jié)果

2.3 不同品種豬血液理化指標(biāo)比較

由表3可見，運輸前采血測定的理化指標(biāo)除白細胞介素-1β外其他指標(biāo)大約克和杜長大兩品種間差異不顯著，白細胞介素-1β杜長大豬極顯著高于大約克豬20.05%；運輸后采血測定的理化指標(biāo)大約克和杜長大兩品種間差異不顯著；屠宰時采血測定的理化指標(biāo)除腫瘤壞死因子外其他指標(biāo)大約克和杜長大兩品種間差異不顯著，其中，腫瘤壞死因子杜長大三元豬顯著高于大約克7.41%。

表3 大約克和杜長大豬運輸前、后及屠宰時血清理化指標(biāo)比較

3 討論

3.1 運輸對大約克和杜長大豬脂質(zhì)過氧化及抗氧化能力的影響

丙二醛（MDA）是反映細胞自由基損傷的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，通過MDA的含量可檢測機體脂質(zhì)過氧化的程度，間接反映出細胞損傷的程度。機體防御體系的抗氧化能力的強弱與健康程度存在著密切聯(lián)系，該體系的防護氧化作用主要通過以下途徑實現(xiàn)：1）消除自由基和活性氧以免引起脂質(zhì)過氧化；2）分解過氧化物，阻斷過氧化鏈；3）除去起催化作用的金屬離子。機體抗氧化功能的變化，特別是機體心臟和肝臟抗氧化功能的下降，自由基生成增加，清除自由基的能力不足，自由基以紙質(zhì)過氧化的方式對細胞造成損害，導(dǎo)致組織產(chǎn)生器質(zhì)性變化，甚至突然死亡[2]。本研究表明，大約克和杜長大血清丙二醛變化規(guī)律一致，都是運輸后丙二醛含量升高，但兩個豬種運輸前后都沒有形成明顯差異，說明兩個豬種在受到運輸應(yīng)激后其脂質(zhì)過氧化程度趨于增強，屠宰時最低說明大約克和杜長大兩個豬種在待宰靜養(yǎng)14 h后其脂質(zhì)過氧化程度最低，且大約克比運輸后有顯著的降低，杜長大豬比運輸前、后有顯著和極顯著降低，說明大約克和杜長大靜養(yǎng)14 h后機體脂質(zhì)過氧化程度有明顯的改善；總抗氧化能力大約克在運輸前、后及屠宰時3個時間節(jié)點上差異不顯著，說明運輸應(yīng)激對大約克的總抗氧化能力沒有明顯影響，但運輸后比運輸前有降低，杜長大豬在運輸前最強，運輸后次之，屠宰時最弱，但運輸前、后沒有顯著差異，屠宰時比運輸前顯著降低，說明運輸應(yīng)激降低了杜長大豬的總抗氧化能力，且屠宰時機體抗氧化能力最低，與運輸前相比有顯著的降低。這與邵斌等[2]報道的運輸后仔豬肝臟總抗氧化能力顯著下降，脂質(zhì)過氧化物丙二醛含量顯著上升的結(jié)果不一致，原因可能與試驗豬體重、運輸時間不同有關(guān)；相同時間段兩品種間比較，大約克和杜長大豬運輸前、后及屠宰時血清丙二醛、總抗氧化能力差異不顯著，說明兩個品種豬在相同的時間段機體的脂質(zhì)過氧化程度、總抗氧化能力沒有明顯差異。

3.2 運輸對大約克和杜長大豬能量代謝指標(biāo)的影響

乳酸是糖無氧代謝的最終產(chǎn)物。當(dāng)劇烈運動時，氧的供應(yīng)量不足以進行糖的有氧氧化，糖無氧代謝加強，糖原或葡萄糖分解為乳酸，血乳酸水平成倍增加。而糖有氧代謝提高后，完成同樣的運動，血乳酸相對減少。因此血乳酸是評定糖無氧代謝和有氧代謝的重要指標(biāo)。高得儀等[3]利用4月齡豬在最高溫30℃下，用汽車運輸4 h多，運輸前和運輸后連續(xù)5 d采集靜脈血液，進行主要生化指標(biāo)檢驗。結(jié)果表明，在運輸停止時和停止后第1～3天，血液乳酸增多，但統(tǒng)計學(xué)檢驗差異不顯著。蘆春蓮等[4]用20頭體質(zhì)量500 kg左右的西門塔爾雜交牛運輸12 h（約720 km）研究肉牛宰前運輸應(yīng)激對其血液理化指標(biāo)及免疫機能的影響，結(jié)果顯示血清乳酸含量顯著升高。本試驗表明，與運輸前相比，運輸停止時血清乳酸含量大約克顯著降低，杜長大也是降低，但差異不顯著，屠宰時血清乳酸含量大約克和杜長大都比運輸前降低，但與運輸前相比沒有顯著差異。該結(jié)果與高得儀等和蘆春蓮等研究結(jié)果不一致，可能與品種、運輸時間、運輸時氣溫等有關(guān)。相同時間段兩品種間比較，大約克和杜長大豬運輸前、后及屠宰時血清乳酸含量沒有明顯差異。

血清肌酸激酶是反映機體能量代謝的重要生化指標(biāo)。劇烈運動、肌肉損傷或肌肉疲勞時，血液中血清肌酸激酶含量增加，且血清肌酸激酶是肌細胞特異酶，其活性顯著升高是肌細胞膜系統(tǒng)受損的一個指示劑[3]。高得儀等[3]報道，與運輸前相比，試驗豬在運輸停止時和運輸停止后1 d血清肌酸激酶有極顯著和顯著升高。蘆春蓮等[4]報道，與運輸前相比，運輸后試驗牛血清肌酸激酶水平顯著升高。曲月秀等[5]報道，運輸前后試驗羊血液中肌酸激酶含量無顯著差異。本次試驗表明，與運輸前相比，大約克和杜長大兩品種豬血清肌酸激酶變化一致，都是運輸后及屠宰時血清肌酸激酶極顯著升高，這與高得儀等、蘆春蓮等報道基本一致，與曲月秀等研究結(jié)果不一致。相同時間段比較，大約克和杜長大血清肌酸激酶水平兩品種間沒有明顯的差異。

3.3 運輸對大約克和杜長大豬內(nèi)分泌激素的影響

動物在應(yīng)激狀態(tài)下血液中皮質(zhì)醇含量會發(fā)生明顯變化，皮質(zhì)醇被認為是評價動物應(yīng)激程度的客觀指標(biāo)。李留安等[6]報道，與上車前15 min相比，二花臉斷奶仔豬上車后血漿皮質(zhì)醇水平顯著上升（P＜0.05），出發(fā)15 min后升至峰值，且維持這種高水平直至2 h運輸結(jié)束，下車后15 min皮質(zhì)醇水平即恢復(fù)到上車前15 min時的基線水平。李留安等[7]比較研究了二花臉和皮特蘭豬在2 h運輸過程中血漿ACTH、皮質(zhì)醇等的動態(tài)變化，結(jié)果顯示，運輸前皮質(zhì)醇水平二花臉顯著高于皮特蘭豬，上車后兩品種豬皮質(zhì)醇均迅速上升，出發(fā)后15 min達到峰值，下車后15 min均快速恢復(fù)至基礎(chǔ)水平，運輸過程中皮特蘭皮質(zhì)醇上升的幅度顯著高于二花臉。高得儀等[3]研究表明在運輸停止時皮質(zhì)醇濃度下降，運輸后第1～4天絕對值升高。王雍等[8]研究表明，與對照組相比，肉牛在運輸3 h和運輸6 h后血清中皮質(zhì)醇濃度均未發(fā)生顯著性變化。曲月秀等[5]報道，試驗羊在運輸10 h后，其血液中皮質(zhì)醇含量與運輸前相比無顯著差異。許利凡等[9]利用8頭體重相近的8月齡健康夏南牛研究運輸應(yīng)激對其血清促腎上腺皮質(zhì)激素、皮質(zhì)醇、腫瘤壞死因子等水平的影響，結(jié)果表明，與運輸前1 h相比，皮質(zhì)醇在運輸過程中顯著升高，在運輸后2 d恢復(fù)到正常水平。本試驗測得大約克和杜長大豬的血清皮質(zhì)醇濃度都在運輸后降低，與運輸前比較差異不明顯，該結(jié)果與高得儀等、王雍等、曲月秀等研究報道相一致。屠宰時大約克和杜長大血清皮質(zhì)醇濃度比運輸前、后都有極顯著升高。相同時間段的大約克和杜長大兩個豬種間比較，運輸前、后及屠宰時血清皮質(zhì)醇濃度品種間沒有明顯差異，這與李留安等報道的二花臉和皮特蘭豬運輸前后品種間差異顯著不一致，原因可能與豬品種有關(guān)。

促腎上腺皮質(zhì)激素由垂體前葉釋放，在動物出現(xiàn)應(yīng)激時其水平會出現(xiàn)不同程度的上升，以此來刺激皮質(zhì)醇的分泌。蘆春蓮等[4]研究表明，肉牛經(jīng)過12 h長途運輸后促腎上腺皮質(zhì)激素水平運輸前后差異不顯著。許利凡等[9]研究報道，與運輸前1 h相比，促腎上腺皮質(zhì)激素在運輸中2、4、10、20 h及運輸后15 h極顯著升高，在運輸后30 h恢復(fù)到正常水平。李留安等[7]報道，上車后二花臉和皮特蘭兩品種豬ACTH水平緩慢上升，60 min后達到峰值，下車后15 min恢復(fù)到基礎(chǔ)水平，運輸過程中ACTH水平及變化幅度均未表現(xiàn)顯著的品種差異。本次試驗表明，大約克豬運輸前后血清促腎上腺皮質(zhì)激素沒有明顯差異，屠宰時血清中含量顯著高于運輸前，杜長大血清促腎上腺皮質(zhì)激素運輸前后及屠宰時都沒有顯著差異，相同時間段比較，大約克和杜長大都沒有表現(xiàn)出顯著的品種差異。該研究結(jié)果與蘆春蓮等、李留安等報道一致。

腎上腺素是由腎上腺髓質(zhì)分泌的一種兒茶酚胺類神經(jīng)遞質(zhì)，兒茶酚胺包括多巴胺、去甲腎上腺素和腎上腺素。它是酪氨酸的衍生物，為R-構(gòu)型。在應(yīng)激狀態(tài)、內(nèi)臟神經(jīng)刺激和低血糖等情況下，釋放入血液循環(huán)，促進糖原分解并升高血糖，促進脂肪分解，引起心跳加快。本次試驗得出，大約克血清去甲腎上腺素運輸前、后沒有顯著差異，但屠宰時血清中含量極顯著高于運輸前、后；杜長大血清去甲腎上腺素運輸后比運輸前有顯著升高，屠宰時比運輸前極顯著升高，運輸后與屠宰時沒有明顯差異。相同時間段的品種間比較，運輸前、后及屠宰時大約克與杜長大兩品種間都沒有明顯差異。多巴胺，大約克和杜長大血清多巴胺含量在運輸前、后及屠宰時都沒有明顯差異，相同時間段品種間比較，大約克和杜長大間也沒有明顯差異。腎上腺素，蘆春蓮等報道，肉牛血清腎上腺素水平運輸前后差異不顯著。本試驗得出，大約克運輸前后沒有明顯差異，與蘆春蓮等報道的一致，屠宰時含量比運輸前后都有極顯著降低；杜長大豬運輸后比運輸前極顯著升高，屠宰時比運輸前、后極顯著降低。相同時間段的品種間比較，大約克和杜長大兩品種間在運輸前、后及屠宰時都沒有明顯差異。

3.4 運輸對大約克和杜長大豬細胞因子的影響

細胞因子是由免疫細胞生成具有調(diào)節(jié)免疫功能的一類蛋白質(zhì)。細胞因子也是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)之間信息交流的重要介質(zhì)。白細胞介素-1β和腫瘤壞死因子是由單核細胞和T細胞分泌的促進細胞免疫的細胞因子[10]。王雍等報道，與對照組相比，試驗肉牛在運輸3 h后血清中白細胞介素-1濃度未發(fā)生顯著性變化，而在運輸6 h后，白細胞介素1濃度呈顯著性水平升高。蘆春蓮等報道，試驗肉牛血清白細胞介素-1β運輸前后變化不大。本試驗得出，與運輸前相比，大約克豬血清白細胞介素-1β在運輸后極顯著升高，屠宰時顯著升高，杜長大運輸前后差異不顯著，屠宰時與運輸前相比沒有明顯差異，但與運輸后相比差異顯著。大約克運輸前后白細胞介素-1β的變化與王雍等報道的運輸6 h后結(jié)果類似；杜長大運輸前后白細胞介素-1β的變化與蘆春蓮等報道的一致。相同時間段品種間比較，運輸前杜長大血清白細胞介素-1β含量與大約克相比極顯著升高，運輸后和屠宰時品種間沒有明顯差異。

腫瘤壞死因子，蘆春蓮等報道，試驗肉牛血清腫瘤壞死因子運輸前后變化不大。王雍等[8]報道，與對照組相比，試驗肉牛在運輸3 h后血清中腫瘤壞死因子濃度未發(fā)生顯著性變化，而在運輸6 h后，腫瘤壞死因子濃度呈顯著性水平升高。許利凡等[9]研究報道，與運輸前1 h相比，夏南牛血清中腫瘤壞死因子含量在運輸中6 h極顯著升高。本次試驗表明，與運輸前相比，大約克和杜長大血清中腫瘤壞死因子運輸后及屠宰時都有極顯著升高，屠宰時比運輸后也有極顯著升高，這與蘆春蓮等報道的不一致，與許利凡等結(jié)果一致，與王雍等報道的運輸6 h后結(jié)果相類似；相同時間段品種間比較，運輸前后血清中腫瘤壞死因子大約克和杜長大沒有明顯差異，但屠宰時杜長大顯著高于大約克。

3.5 運輸對大約克和杜長大豬血清結(jié)合珠蛋白的影響

結(jié)合珠蛋白，又稱觸珠蛋白，是一種分子量為85 000 Da的酸性糖蛋白，廣泛存在于人類和多種哺乳動物的血清及其他體液中。結(jié)合珠蛋白的主要功能是與游離血紅蛋白結(jié)合成穩(wěn)定的復(fù)合物，然后被單核-巨噬細胞系統(tǒng)處理掉，避免游離血紅蛋白對腎小管的損害。結(jié)合珠蛋白又是一種急性期時相反應(yīng)蛋白。當(dāng)機體處在應(yīng)激狀態(tài)時，血液中的結(jié)合珠蛋白明顯增多。曲月秀等[5]報道，試驗羊血液中結(jié)合珠蛋白含量在運輸后1 h與運輸前比較升高極顯著。本次試驗得出，與運輸前相比，大約克運輸后血清中結(jié)合珠蛋白含量降低但沒有顯著差異，屠宰時有極顯著降低，與運輸后相比，屠宰時血清中結(jié)合珠蛋白也有顯著降低。杜長大運輸前后沒有明顯的差異，但屠宰時與運輸前相比顯著降低。該結(jié)果與曲月秀等報道的不一致。相同時間段的品種間比較，大約克和杜長大間沒有明顯差異。