徐逸男，張海華，王 靜，霍自雙，許 愿，溫 彬，白秀娟，李光玉*

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)春 130112；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030)

藍(lán)狐(alopexlagopus)因其皮張品質(zhì)的優(yōu)勢(shì)在國(guó)際毛皮行業(yè)享有盛譽(yù)。礦物質(zhì)元素對(duì)毛皮動(dòng)物的健康生長(zhǎng)和生產(chǎn)起著重要的作用，但應(yīng)用中過量和缺乏都會(huì)影響毛皮動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育、毛皮的品質(zhì)及引起環(huán)境的污染等[1]。鈣的主要功能是促進(jìn)骨的形成、肌肉收縮和激素分泌[2-4]。維生素D3的生理功能是促進(jìn)腸道鈣吸收，誘導(dǎo)骨質(zhì)鈣磷沉著，維持血漿和骨骼中鈣的內(nèi)穩(wěn)態(tài)和防止佝僂病和骨質(zhì)疏松癥等[5-7]。7～37周齡藍(lán)狐的飼糧風(fēng)干基礎(chǔ)鈣的需要量是0.5%～0.6%[8]。飼糧中鈣磷比例會(huì)影響鈣磷的吸收，研究表明，當(dāng)水貂每天每只采食100 IU VD3，適宜的鈣磷比為0.75～1.7[9]。由于藍(lán)狐近年來養(yǎng)殖水平的不斷提高和品種的改善，體型逐漸變大，營(yíng)養(yǎng)需求也隨之改變[10-11]。而目前，我們配制飼糧只有NRC這個(gè)比較早期的研究數(shù)據(jù)做參考[12]。因此，探究藍(lán)狐飼糧精準(zhǔn)的鈣和維生素D3需要量對(duì)提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益尤為迫切。

本試驗(yàn)通過固定飼糧鈣磷比，研究飼糧不同鈣和維生素D3水平對(duì)冬毛期藍(lán)狐生產(chǎn)性能、脛骨發(fā)育和臟器指數(shù)的影響，以確定適宜的冬毛期藍(lán)狐飼糧鈣和維生素D3的適宜添加范圍，為藍(lán)狐生產(chǎn)實(shí)踐提供理論指導(dǎo)，降低排放物對(duì)環(huán)境的壓力。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)方法

飼養(yǎng)試驗(yàn)地點(diǎn)為農(nóng)業(yè)部長(zhǎng)白山野生生物資源重點(diǎn)野外科學(xué)觀測(cè)試驗(yàn)站。試驗(yàn)從2016年9月12日開始至12月8日結(jié)束。135只120日齡的藍(lán)狐公狐((4.03±0.25) kg)隨機(jī)分成9組，每組15個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只。采用3×3雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，9組 飼糧分別包含3個(gè)鈣水平0%、0.4%和0.8%，3個(gè) 維生素D3水平1 000、2 000和4 000 IU·kg-1?；A(chǔ)日糧中鈣與維生素D3水平分別為0.8%與327 IU·kg-1。所以9種飼糧的鈣與維生素D3水平分別為0.8%與1 327 IU·kg-1、0.8%與2 327 IU·kg-1、0.8% 與4 327 IU·kg-1、1.2%與1 327 IU·kg-1、1.2%與2 327 IU·kg-1、1.2%與4 327 IU·kg-1、1.6%與1 327 IU·kg-1、1.6%與2 327 IU·kg-1、1.6%與4 327 IU·kg-1。飼糧根據(jù)NRC[9]中關(guān)于藍(lán)狐冬毛期營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需要量，以膨化玉米、魚粉等為主要原料配制，飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平如表1所示。鈣磷比固定為1.4/1.0。試驗(yàn)預(yù)飼期1周，試驗(yàn)期87 d。所有藍(lán)狐均在南面單籠飼養(yǎng)，以消除日照不均對(duì)試驗(yàn)的影響。每日08:00和15：00點(diǎn)各飼喂1次，自由飲水。

粗蛋白質(zhì)含量根據(jù)GB/T6432，采用凱氏定氮法測(cè)定；粗脂肪含量根據(jù)GB/T6433，采用索氏浸提法測(cè)定。

1.2 生產(chǎn)性能測(cè)定

藍(lán)狐末體重為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)早上空腹活體重，每組隨機(jī)選擇8只藍(lán)狐取皮，藍(lán)狐的體長(zhǎng)為將藍(lán)狐放于水平地面上，鼻尖至尾根的距離。皮長(zhǎng)為取皮刮油烘干后在楦板上鼻尖至尾根的距離。

1.3 脛骨的測(cè)定

將脛骨剔除肉等組織后，測(cè)量脛骨長(zhǎng)度，粉碎后測(cè)定脛骨的粗灰分、鈣和磷的含量。飼料樣品和脛骨樣中的灰分含量、鈣和磷含量測(cè)定分別用灰化法(GB6438-2007)、EDTA-2Na 絡(luò)合滴定法(GB6436-2002) 、釩鉬酸銨法(GB6437-2002) 進(jìn)行測(cè)定。

1.4 臟器指數(shù)的測(cè)定

藍(lán)狐取皮后迅速取出心、肝、脾和腎，用濾紙吸干臟器表面的血液后進(jìn)行稱重記錄，然后計(jì)算各臟器指數(shù)：臟器指數(shù)=器官重量÷體重×100%。

表1冬毛期藍(lán)狐試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

Table1Compositionandnutrientlevelsofexperimentaldietsingrowing-furringbluefoxes(air-drybasis) %

項(xiàng)目Item組別 GroupⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨ原料 Ingredient膨化玉米粉 Extruded corn39.8439.8439.8438.1638.1638.1636.2636.2636.26豆粕 Soybean meal20.0020.0020.0020.0020.0020.0020.0020.0020.00DDGS5.005.005.005.005.005.005.005.005.00玉米蛋白粉Corn protein meal11.3011.3011.3011.5411.5411.5412.0412.0412.04魚粉Fish meal10.0010.0010.0010.0010.0010.0010.0010.0010.00雞肉粉Chicken meal2.002.002.002.002.002.002.002.002.00磷酸氫鈣 CaHPO40.000.000.001.401.401.402.802.802.80石粉Limestone0.860.860.860.900.900.900.900.900.90豆油 Soybean oil10.0010.0010.0010.0010.0010.0010.0010.0010.00預(yù)混料 Premix1)1.001.001.001.001.001.001.001.001.00合計(jì) Total100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient level2)代謝能/(MJ·kg-1)ME14.0714.0714.0713.9813.9813.9814.0114.0114.01粗蛋白質(zhì)CP30.2430.2430.2430.2030.2030.2030.3230.3230.32粗脂肪EE10.7510.7510.7510.6410.6410.6410.7310.7310.73鈣Ca0.840.840.841.211.211.211.591.591.59總磷TP0.600.600.600.890.890.891.141.141.14鈣磷比Ca/P1.401.401.401.361.361.361.391.391.39維生素D3/(IU·kg-1)VD31 3272 3274 3271 3272 3274 3271 3272 3274 327

1).預(yù)混料為每千克飼糧提供：維生素A 10 000 IU；維生素E 60 mg；鐵80 mg；鋅 60 mg；錳 15 mg；銅10 mg；碘0.5 mg；硒 0.2 mg；鈷 0.3 mg；維生素K31.6 mg；維生素B120 mg；維生素B210 mg；維生素B610 mg；維生素B120.1 mg；煙酸 40 mg；泛酸 20 mg；葉酸 1 mg；生物素0.5 mg；VC 120 mg；膽堿 400 mg。2).代謝能為計(jì)算值，其余為實(shí)測(cè)值

1). Premix provided per kilogram of diet: vitamin A 10 000 IU; vitamin E 60 mg; Fe 80 mg; Zn 60 mg; Mn 15 mg; Cu 10 mg; I 0.5 mg; Se 0.2 mg; Co 0.3 mg; vitamin K31.6 mg; vitamin B120 mg; vitamin B210 mg; vitamin B610 mg; vitamin B120.1 mg; niacin 40 mg; pantothenic acid 20 mg; folic acid 1 mg; biotin 0.5 mg; vitamin C 120 mg; choline 400 mg.2).ME was a calculated value, the others were measured values

1.5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用Excel 2017進(jìn)行整理，并用SAS 9.4軟件中的一般線性模型(GLM)程序進(jìn)行有交互作用的雙因素方差分析(two-way ANOVA)，并采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)藍(lán)狐生產(chǎn)性能和皮張長(zhǎng)度的影響

如表2所示，隨著飼糧鈣添加水平的增加，藍(lán)狐末重和體長(zhǎng)顯著降低(P<0.05)，飼糧鈣添加水平為0%時(shí)，藍(lán)狐末重和體長(zhǎng)最大。維生素D3水平對(duì)藍(lán)狐末重、體長(zhǎng)和皮長(zhǎng)均無顯著影響(P>0.05)。

2.2 飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)藍(lán)狐脛骨發(fā)育的影響

如表3所示，隨著飼糧鈣添加水平的增加，藍(lán)狐脛骨鈣含量顯著提高(P<0.05)，飼糧鈣添加水平為0.8%時(shí)，藍(lán)狐脛骨鈣含量最高。維生素D3水平對(duì)藍(lán)狐脛骨灰分含量有顯著影響(P<0.05)。

2.3 飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)藍(lán)狐臟器指數(shù)的影響

如表4所示，飼糧鈣的添加顯著降低了心臟和肝臟指數(shù)，對(duì)脾臟和腎臟指數(shù)的影響不顯著(P<0.05)。

表2飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)冬毛期藍(lán)狐生產(chǎn)性能和皮張長(zhǎng)度的影響

Table2EffectsofdietaryCaandVD3supplementallevelsonthegrowthperformanceandpeltlengthofgrowing-furringmalebluefoxes

項(xiàng)目Item鈣/%Ca level維生素D3/(IU·kg-1)VD3 level00.40.81 0002 0004 000SEMP 值P-valueCaVD3Ca×VD3末重/kg Final BW6.24a6.03b6.03b6.176.106.060.1300.0460.5400.241體長(zhǎng)/cm Body length72.58a71.54a70.08b70.9271.2572.044.4500.0010.1740.189皮長(zhǎng)/cm Pelt length95.9195.2296.7396.1995.7496.0513.1270.4270.9320.227

同行數(shù)據(jù)后所標(biāo)字母相異表示處理間差異顯著(P<0.05)，所標(biāo)字母相同或無字母表示處理間差異不顯著(P>0.05)。下同

In the same row, values with different letter superscripts indicate significant difference between treatments (P<0.05), values with the same or no letter superscripts indicate no significant difference between treatments(P>0.05).The same as below

表3飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)冬毛期藍(lán)狐脛骨發(fā)育的影響

Table3EffectsofdietaryCaandVD3supplementallevelsonthetibiadevelopmentofgrowing-furringmalebluefoxes

項(xiàng)目Item鈣/%Ca level維生素D3/(IU·kg-1)VD3 level00.40.81 0002 0004 000SEMP 值P-valueCaVD3Ca×VD3脛骨長(zhǎng)度/cm Tibia length13.3613.2713.4713.2513.4013.450.2470.3700.3490.612鈣含量/% Ca22.37c23.93b25.07a23.6723.8424.060.813<0.0010.100<0.001磷含量/% P8.998.829.369.109.248.730.5830.1460.2600.020灰分含量/% Ash60.9260.5461.1761.33a60.56b60.69ab1.1660.1340.049<0.001

表4飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)冬毛期藍(lán)狐臟器指數(shù)的影響

Table4EffectsofdietaryCaandVD3supplementallevelsonvisceraindicesofgrowing-furringmalebluefoxes

項(xiàng)目Item鈣/%Ca level維生素D3/(IU·kg-1)VD3 level00.40.81 0002 0004 000SEMP 值P-valueCaVD3Ca×VD3心臟指數(shù) Heart index0.60a0.56ab0.54b0.560.560.580.0050.0360.6430.942肝臟指數(shù) Liver index3.36a3.01b2.99b3.093.133.110.2810.0400.9380.907脾臟指數(shù) Spleen index0.080.090.090.090.080.09<0.0010.0720.4370.229腎臟指數(shù) Kidney index0.220.220.220.230.210.21<0.0010.9060.2320.237

3 討 論

3.1 飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)藍(lán)狐生產(chǎn)性能和皮張長(zhǎng)度的影響

本研究表明，飼糧鈣的水平顯著影響藍(lán)狐的末重，最高的末重出現(xiàn)在0%的鈣試驗(yàn)組。推測(cè)可能是在冬毛期的鈣的需要量較少。在生長(zhǎng)期，藍(lán)狐表現(xiàn)快速增長(zhǎng)，到10月末，藍(lán)狐處于毛的生長(zhǎng)高峰期，增加鈣的添加量反而會(huì)抑制藍(lán)狐的生長(zhǎng)[13]。Gautier等[14]的試驗(yàn)中，用玉米豆粕型飼糧(飼糧鈣的水平為0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%和1.6%)飼喂2～23日齡的肉雞，研究飼糧鈣水平對(duì)肉雞的影響，研究發(fā)現(xiàn)，增加鈣的濃度會(huì)降低肉雞的生產(chǎn)性能，與本試驗(yàn)的研究結(jié)果一致。Rao等[15]研究表明，14、28和42日齡的商品肉雞增重和采食量隨著鈣水平的增加而下降(NPP為3和3.5 g·kg-1飼糧)，這些負(fù)面的影響會(huì)隨著鈣水平的降低而減輕。飼糧維生素D3對(duì)藍(lán)狐末重影響不顯著，但是有隨著維生素D3的升高而降低的趨勢(shì)，我們推測(cè)，在冬毛期，維生素D31 000 IU·kg-1已經(jīng)滿足藍(lán)狐的營(yíng)養(yǎng)需要，而并非越高越好。

關(guān)于飼糧鈣和維生素D3對(duì)藍(lán)狐毛皮的影響報(bào)道相對(duì)較少。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)狐飼喂鈣0%組飼糧的藍(lán)狐體長(zhǎng)顯著高于0.4%和0.8%組的體長(zhǎng)。藍(lán)狐飼喂鈣0%組飼糧的藍(lán)狐體重也是顯著高于0.4% 和0.8%組的體重，與體長(zhǎng)的結(jié)果一致，可以推測(cè)體長(zhǎng)與體重呈正相關(guān)。衡量毛皮動(dòng)物皮張價(jià)值的兩個(gè)重要因素就是尺碼和品質(zhì)，而在動(dòng)物打皮時(shí)的體重和體長(zhǎng)與皮張的尺碼顯著相關(guān)[16-17]，一般體重和體長(zhǎng)越大，皮張的尺碼就越大。有報(bào)道稱，在11月份皮毛動(dòng)物的體重和毛皮長(zhǎng)度間有特殊的線性關(guān)系[18]。皮長(zhǎng)也會(huì)受到加工過程中從取皮到烘干的各個(gè)環(huán)節(jié)的影響[19]。綜上可知，當(dāng)添加0%的鈣，1 000 IU·kg-1維生素D3，飼糧中總鈣為0.8%，維生素為1 327 IU·kg-1時(shí)就可滿足冬毛期藍(lán)狐的需要。

3.2 飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)藍(lán)狐脛骨發(fā)育的影響

常見脛骨性能評(píng)價(jià)指標(biāo)主要有脛骨鈣含量、磷含量、灰分含量等。脛骨灰分含量與骨骼發(fā)育成正相關(guān)，是骨骼礦物質(zhì)元素儲(chǔ)備狀況的主要反映參數(shù)[20]。本試驗(yàn)中，隨著鈣含量的增加脛骨鈣含量逐漸增加，說明飼糧中的鈣有一部分沉積到骨骼中。飼糧中的鈣越高，沉積到骨骼中的鈣就越多。Dhandu和Angel[21]研究表明，在骨骼指標(biāo)中灰分重和灰分含量是最敏感的指標(biāo)。本試驗(yàn)中，灰分也隨著飼糧鈣含量的增加略有增加，但變化不顯著。推測(cè)可能是藍(lán)狐在冬毛期生長(zhǎng)緩慢，所以雖然脛骨的鈣含量隨著鈣的添加量增加而增加，但灰分含量增加不顯著。洪平等[22]研究得出，不同飼糧鈣水平對(duì)22～42日齡黃羽肉雞脛骨鈣磷含量具有顯著的影響。Varley等[23]的試驗(yàn)表明，試驗(yàn)飼糧的鈣磷比為1.6/1，隨著膳食磷水平的提高，飲食鈣水平也隨著增高，30 kg豬的高磷飼糧組的骨灰分含量高于中、低磷組，也就是高鈣組的骨灰分含量會(huì)高于其他組。綜上所述，如果動(dòng)物處于生長(zhǎng)階段，脛骨的灰分含量顯著增加，表明骨骼生長(zhǎng)發(fā)育迅速，而過了生長(zhǎng)階段，即使有鈣沉積，灰分含量增加也不明顯，骨骼發(fā)育減緩。從本試驗(yàn)得出，藍(lán)狐的灰分含量無明顯增加，說明冬毛期骨骼發(fā)育減緩。維生素D3對(duì)藍(lán)狐脛骨灰分的影響顯著，隨著維生素D3的升高灰分含量降低，可以推測(cè)維生素D3較適宜的添加量為1 000 IU·kg-1。

3.3 飼糧鈣和維生素D3水平對(duì)藍(lán)狐臟器指數(shù)的影響

本研究主要測(cè)定了心、肝、脾和腎的重量。動(dòng)物的臟器指數(shù)是其重要的生物學(xué)特性指標(biāo)之一，臟器指數(shù)的相對(duì)大小，從一定程度上可說明其功能的強(qiáng)弱[24-25]。肝是體內(nèi)重要的代謝器官和消化器官，脾是重要的免疫器官。自身細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育和分裂導(dǎo)致免疫器官的重量增加，意味著機(jī)體免疫系統(tǒng)成熟較快，免疫功能較強(qiáng)；免疫器官相對(duì)重量減少意味著機(jī)體免疫系統(tǒng)萎縮或成熟較慢，免疫功能較差[26-28]。本試驗(yàn)中，飼糧中添加鈣對(duì)心臟和肝臟指數(shù)影響顯著，隨著鈣含量的增加，心和肝的重量顯著降低。這可能是由于藍(lán)狐在鈣含量適宜的情況下，發(fā)育完善，鈣促進(jìn)體內(nèi)器官細(xì)胞的發(fā)育和增殖，使得重量增加，而鈣含量過高，會(huì)造成代謝負(fù)擔(dān)，降低臟器指數(shù)。張淑云[29]的研究結(jié)果表明，增加維生素D3添加量有利于肉雞細(xì)胞和體液免疫功能的增強(qiáng)，而高水平鈣則不利于肉雞體液免疫功能增強(qiáng)，對(duì)免疫器官的指數(shù)有影響。綜上所述，本試驗(yàn)中0%的鈣添加量對(duì)藍(lán)狐的心臟和肝臟指數(shù)有益，鈣含量增加對(duì)臟器造成負(fù)擔(dān)，而維生素D3對(duì)臟器指數(shù)沒有顯著影響。

4 結(jié) 論

綜合以上指標(biāo)，在本試驗(yàn)條件下，藍(lán)狐飼糧中添加0%鈣、1 000 IU·kg-1維生素D3，飼糧中總鈣含量為0.8%，總維生素D3含量為1 327 IU·kg-1時(shí)，能夠改善藍(lán)狐的生產(chǎn)性能、增加藍(lán)狐的體長(zhǎng)、調(diào)節(jié)脛骨發(fā)育和臟器指數(shù)。