李宏光，余 萍，闕勁松，劉春明，BUDAHN Holger，李勇軍，朋金娥，羅紅梅，張紹松*

(1.云南省煙草公司紅河州公司，云南 彌勒 652300；2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所/農(nóng)業(yè)部西南作物基因資源與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/云南省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650223；3.Julius Kühn-Institut, Institute for Breeding Research on Horticultural Crops, Quedlinburg 06484)

【研究意義】植物寄生線蟲是農(nóng)作物的一大類病害，全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)因其每年造成的損失約1570億美元[1]。根結(jié)線蟲(Root-knot nematode)是植物寄生線蟲病原中一個(gè)重要屬，該屬有90多個(gè)種，寄主多達(dá)5500多種植物[2]，如該屬的南方根結(jié)線蟲(Meloidogyneincognita)幾乎可侵染所有的栽培植物[3]。根結(jié)線蟲是煙草生產(chǎn)中的主要病害之一[4]，根據(jù)2002年的中國煙草業(yè)統(tǒng)計(jì)，全國根結(jié)線蟲發(fā)生面積為10.83萬hm2，直接危害造成的煙葉經(jīng)濟(jì)損失達(dá)7917.84萬元，占侵染性病害所致?lián)p失的5.7 %[5]。由于根結(jié)線蟲病害在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中造成重大經(jīng)濟(jì)損失，國內(nèi)外眾多學(xué)者對該病害從多角度進(jìn)行了研究?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】在病原根結(jié)線蟲侵染寄主方面，作者曾對根結(jié)線蟲分離和苗期接種方法進(jìn)行了探索[6]；李秀花等探索出“一種準(zhǔn)確測定土壤根結(jié)線蟲種群數(shù)量的方法”[7]；時(shí)立波等對根圍土壤根結(jié)線蟲二齡幼蟲與自由生活線蟲數(shù)量的關(guān)系進(jìn)行了研究[8]；Jun-hai Niu等研發(fā)出對土壤和根中根結(jié)線蟲屬4個(gè)種的快速檢測方法[9]；作者對病原根結(jié)線蟲的染色方法進(jìn)行了研究[10]；鞏彪等則從大蒜秸稈對根結(jié)線蟲及根際微生態(tài)互作方面進(jìn)行了探討[11]。國內(nèi)外一些學(xué)者對病原侵入寄主根系組織病理學(xué)方面進(jìn)行了研究[12-18]；可見，有關(guān)病原種群及其侵染寄主就有眾多的研究報(bào)道，但未見有關(guān)移栽初期病原侵染寄主狀態(tài)的報(bào)道?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】文章針對病原侵染寄主的初期，探索根際土壤中病原種群、數(shù)量和侵染寄主根組織的動(dòng)態(tài)。【擬解決的關(guān)鍵問題】探明重病的烤煙田病原根結(jié)線蟲種群及其移栽初期侵染動(dòng)態(tài)，為該病害有效防控提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 煙草種子與煙苗 煙草(NicotianatabacumLinn)品種：室內(nèi)和田間試驗(yàn)的煙草品種均為紅花大金元。室內(nèi)試驗(yàn)的種子由云南省煙草公司紅河州公司提供，育苗常規(guī)基質(zhì)選用云南省彌勒市煙用物資有限責(zé)任公司的產(chǎn)品，煙苗培育參見文獻(xiàn)[19]，田間試驗(yàn)的種子和煙苗由紅河州煙草公司建水縣分公司提供。

1.1.2 煙田病圃與病原根結(jié)線蟲雌蟲 紅河州建水縣南莊煙站片區(qū)，在烤煙采烤結(jié)束，根據(jù)前期煙株生長狀況和煙農(nóng)采烤煙葉情況，分析煙田中根結(jié)線蟲危害嚴(yán)重，將其作為病圃，挖取煙株根系及其根際土壤，作為病圃土在室內(nèi)進(jìn)行煙苗移栽試驗(yàn)，并從根系采集病原根結(jié)線蟲的雌蟲，用于種群分析。同時(shí)，作為下一年田間試驗(yàn)的病圃。

1.1.3 染料及其染液配制 病原根結(jié)線蟲雌蟲會(huì)陰花紋與根系組織內(nèi)J2的染色觀察參見文獻(xiàn)[10]，分別采用Cochenille Red A(德國AppiChem公司)和溴酚藍(lán)(天津市瑞金特化學(xué)品有限公司)，2種染液的配制方法同文獻(xiàn)[10]。

1.1.4 試劑 次氯酸鈉(有效氯天津市富宇精細(xì)化化工有限公司，AR)；無水乙醇(四川西隴化工有限公司，AR)；異丁醇(西隴化工股份有限公司，AR)；蔗糖(天津市瑞金特化學(xué)品有限公司，CR)。

1.1.5 儀器 解剖鏡和顯微鏡：Olympus SZX10解剖鏡、Olympus BX51光學(xué)顯微鏡。

1.2 方法

1.2.1 煙田病圃土及病株根系取樣 病株根系與根際病圃土取樣：2013年9月23日，通過煙田挖根調(diào)查和分析，確定根結(jié)線蟲病危害嚴(yán)重的煙田，農(nóng)戶采烤煙葉結(jié)束后，采用5點(diǎn)取樣法，在煙田中選5個(gè)點(diǎn)，依次編號為A、B、C、D和E，每個(gè)點(diǎn)挖取3株根系，以A1、A2和A3;B1,B2……分別編號。同時(shí)，挖取每株根際土壤約30 kg，裝入蛇皮袋，裝運(yùn)回云南省農(nóng)科院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所，用于雌蟲采集，種群分析和室內(nèi)移栽煙苗的侵染試驗(yàn)。

煙苗移栽前病圃土取樣：2014年4月15日，前往上述建水縣南莊根結(jié)線蟲病害發(fā)生較重的煙田，農(nóng)戶已對前茬煙樁進(jìn)行了翻耕處理。病圃土的采集采用5點(diǎn)取樣法，在煙田中選5個(gè)點(diǎn)，依次編號為A、B、C、D和E，每個(gè)點(diǎn)在約5 m2煙田的范圍內(nèi)，鏟除表層5 cm的土壤，挖取煙田病圃土壤3袋，約500 g/袋，裝入自封袋中，每袋作為該點(diǎn)的1個(gè)重復(fù)，裝運(yùn)回云南省農(nóng)科院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所，用于檢測移栽煙苗前煙田病圃土單位體積中二齡幼蟲的數(shù)量。

1.2.2 煙草病株上根結(jié)線蟲雌蟲采集與會(huì)陰花紋觀察 雌蟲采集：從云南省建水縣南莊煙田采集的煙株根系，洗去根系土，按編號依次在每株煙根系上選3～5個(gè)根結(jié)，用手術(shù)刀直接將根結(jié)剖開，置于解剖鏡下，挑取根結(jié)線蟲的雌蟲。每株煙挑取10條雌蟲。

雌蟲會(huì)陰部分切片、染色制片和顯微觀察：雌蟲會(huì)陰部分制片與觀察方法同文獻(xiàn)[10]。

1.2.3 病株根際土壤單位體積中線蟲J2數(shù)量檢測 上述在2014年4月15日，以5點(diǎn)取樣法獲得的15袋煙田土壤，按編號依次量取50 mL土壤，并分別稱重。土壤中J2幼蟲數(shù)量檢測方法同文獻(xiàn)[6]和[10]，采用高滲蔗糖溶液分離與分樣篩分離相結(jié)合的分離方法，并在解剖鏡下測定每個(gè)土壤樣品單位體積中線蟲J2數(shù)量。

1.2.4 煙苗培育、田間與室內(nèi)病圃土中移栽 室內(nèi)試驗(yàn)的煙苗培育：取紅花大金元品種的種子，用169穴/盤的漂盤和煙草育苗專用基質(zhì)，點(diǎn)種培養(yǎng)4盤，在室內(nèi)采用漂浮育苗常規(guī)方法[19]育苗。

室內(nèi)病圃土盆栽：上述9月23日從建水縣南莊采回的病圃土，從蛇皮袋中倒出，拌勻。取底部有孔的塑料瓶[6]，將采集的病圃土分裝入塑料瓶中(約1 kg/瓶)，共150瓶。

田間試驗(yàn)煙苗與移栽：煙苗由建水縣煙草分公司南莊煙站育苗點(diǎn)常規(guī)漂浮育苗培養(yǎng)的紅花大金元品種的健壯煙苗中取150株，苗齡約50 d，采用常規(guī)移栽方法，2014年4月29日，將煙苗移栽至發(fā)病較嚴(yán)重的煙田病圃中，其余病圃田同時(shí)栽種紅花大金元品種的煙苗，澆適量定根水。

室內(nèi)試驗(yàn)煙苗與移栽：通過常規(guī)漂浮育苗法培育的紅花大金元品種健壯煙苗中取150株，苗齡為50 d，2013年10月7日，分別將煙苗移栽至裝有病圃土的塑料瓶中，1苗/瓶，澆適量定根水(約100 mL)。

煙苗培養(yǎng)：將上述移栽至塑料瓶中的煙苗置于培養(yǎng)間中培養(yǎng)，光照時(shí)間為每天12 h；白天室內(nèi)氣溫為25 ℃(由培養(yǎng)間中安裝的空調(diào)調(diào)節(jié))、土壤溫度約22 ℃，與光照的開關(guān)時(shí)間同步；夜間室內(nèi)氣溫自然(約14～16 ℃，空調(diào)關(guān)閉)。根據(jù)煙苗生長狀況，適時(shí)澆水。田間試驗(yàn)煙苗按常規(guī)烤煙種植方法管理。

1.2.5 田間和室內(nèi)煙苗移栽初期根系組織中病原根結(jié)線蟲檢測 煙苗移栽后，從第6天開始，每3 d取樣1次，室內(nèi)與田間每次隨機(jī)取樣20株完整的煙苗與根系。建水南莊試驗(yàn)田的取樣煙苗當(dāng)天經(jīng)快遞送達(dá)云南省農(nóng)科院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所，當(dāng)天采用溴酚藍(lán)染色法進(jìn)行檢測。取清洗干凈的根系組織，參照文獻(xiàn)[10，20]，在0.5 %(1 %的次氯酸鈉溶液中，浸泡4(8 h；水洗后，在50 %酒精溶液中浸泡5 min；在溴酚藍(lán)染液中染色4 h，顯出細(xì)微結(jié)構(gòu)后，用0.1 %稀染液復(fù)染12(16 h，依次用50 %、70 %酒精和70 %異丁醇處理20 min，用水沖洗干凈，待鏡檢。

經(jīng)染色處理和水洗后的根系樣品，在解剖鏡下從根尖至根基部逐株檢查。發(fā)現(xiàn)有J2幼蟲侵入根系組織的部位，用解剖刀切下根段置于載玻片上，再用OlympusBX51光學(xué)顯微鏡觀察，調(diào)節(jié)清晰度，利用Olympus DP-70成像系統(tǒng)采集圖像(一般為4×或10×物鏡下采集)。

2 結(jié)果與分析

2.1 煙田病圃煙株根系中根結(jié)線蟲種群調(diào)查

建水縣南莊根結(jié)線蟲病危害嚴(yán)重的煙田(約0.2 hm2)，煙葉采烤完后(9月)，按5點(diǎn)采樣法，每點(diǎn)挖取3株根系，共采集15病株，從每一病株根結(jié)部位挑取約10條雌蟲，共挑取171條雌蟲，通過染色、制片，置顯微鏡下觀察會(huì)陰花紋，結(jié)果如表1所示。煙株根系的病原線蟲種類共有3種，分別為南方根結(jié)線蟲、爪哇根結(jié)線蟲和花生根結(jié)線蟲，未發(fā)現(xiàn)北方根結(jié)線蟲。花生根結(jié)線蟲為該煙田中的優(yōu)勢種群，占觀察雌蟲總數(shù)的52.6 %，爪哇根結(jié)線蟲次之，南方根結(jié)線蟲種群較低。5個(gè)采樣點(diǎn)中，只有A采樣點(diǎn)病株中，爪哇根結(jié)線蟲種群略顯優(yōu)勢(42.4 %)。A、B、C和D的4個(gè)采樣點(diǎn)中均有病株，未檢查到南方根結(jié)線蟲。

表1 煙株根系中病原根結(jié)線蟲種群

表2 煙株根際土壤單位體積(50 mL)中J2數(shù)量

表3 室內(nèi)移栽煙苗后侵染初期根組織內(nèi)病原根結(jié)線蟲J2調(diào)查

2.2 病圃煙株根際土壤中線蟲J2數(shù)量檢測

移栽煙苗前7 d(4月15日)，煙田已翻犁過，按5點(diǎn)取樣區(qū)域，每點(diǎn)采集3個(gè)樣品。通過蔗糖溶液離心分離與分樣篩收集相結(jié)合的方法[5]，將每一土壤樣品中收集到的J2，在解剖鏡下統(tǒng)計(jì)J2數(shù)量，結(jié)果參見表2。

表2中5個(gè)點(diǎn)15個(gè)樣品的檢測數(shù)據(jù)顯示，50 mL土樣中J2平均數(shù)量為8.4條，經(jīng)方差分析，5個(gè)采樣點(diǎn)的單位體積根際土壤中線蟲J2數(shù)量差異顯著(F=6.18>F0.05=5.96)，表明煙田不同區(qū)位，單位體積根際土壤中J2數(shù)量存在明顯的差異。調(diào)查的結(jié)果顯示，同一塊煙田的不同重復(fù)小區(qū)根結(jié)線蟲危害程度差異極大，同一重復(fù)小區(qū)的不同煙株間，危害程度也存在差異。從15個(gè)土壤樣品分離收集到的126條J2中，較為活躍的有25條(19.8 %)。解剖鏡觀察幼蟲形狀，約80 %的幼蟲已不動(dòng)和僵化，推測其已喪失侵染性。此外，前茬烤煙采烤結(jié)束時(shí)間為2013年9月上旬，此次采集土壤樣品時(shí)間為2014年4月15日，期間經(jīng)歷冬季共7個(gè)月，故檢測到的J2多數(shù)已死亡，推測檢測到較活躍的幼蟲是土壤中孵化成長的J2。

2.3 室內(nèi)病圃土中移栽煙苗初期病原根結(jié)線蟲侵染調(diào)查

將煙苗移栽在花盆內(nèi)根結(jié)線蟲病危害嚴(yán)重的病圃土中，自移栽后第6天開始，每3 d采集20株生長健壯的煙苗根系，共調(diào)查了6次。采用溴酚藍(lán)染色法，在顯微鏡下觀測侵入每株煙苗根系的二齡幼蟲，結(jié)果見表3。

從煙苗移栽后的第6天開始，已檢測到根結(jié)線蟲的二齡幼蟲侵入煙株的根組織中，或許有的更早。移栽后第9天，大部分植株的根系中存在J2的侵染，呈現(xiàn)J2侵染煙株根系的高峰期。在檢測的根系組織樣品中，部分未檢測到幼蟲；有些只在1根的根毛組織內(nèi)檢測到1條幼蟲(圖1A)；如有植株1根的根毛組織中發(fā)現(xiàn)2條(圖1B)或3條(圖1C)；多的則有5條(圖1D)。移栽后第12天開始，煙株根系組織中，J2的數(shù)量呈現(xiàn)明顯下降的趨勢。在顯微鏡下觀測的結(jié)果顯示，自移栽后15 d，煙株的部分根系開始變粗，其表皮變厚，溴酚藍(lán)染液較難滲透到根組織內(nèi)部，根組織內(nèi)的幼蟲，一般在新長出的根毛組織內(nèi)。究其原因，自移栽后12 d開始，侵染入煙苗根系組織的J2數(shù)量呈現(xiàn)出減少的趨勢，是因?yàn)殡S著煙苗的生長，早期長出的根系變粗變厚，經(jīng)染色未能使幼蟲著色，顯微鏡下觀測不到根組織內(nèi)幼蟲[10]，觀測到的是新長出根組織內(nèi)的幼蟲。此外，二齡幼蟲侵染入根組織內(nèi)，建立起取食位點(diǎn)(Feeding site)，形成巨型細(xì)胞[21]，雌蟲開始進(jìn)一步發(fā)育，蟲體變短變粗，巨型細(xì)胞也變大，在根毛外形上該部位顯現(xiàn)出根結(jié)(Gall)的形狀。此時(shí)，溴酚藍(lán)染液較難使雌蟲著色。因此，對根結(jié)線蟲幼蟲侵染入根系組織的觀測最佳時(shí)期應(yīng)掌握在煙苗移栽后的15 d內(nèi)。

圖1 根結(jié)線蟲侵入煙草不同根毛組織中J2Fig.1 J2 of root-knot nematode infected into different root tissue of tobacco

調(diào)查項(xiàng)目Item移栽后天數(shù)(d)Days after transplanting6912151821調(diào)查植株數(shù)202020202020侵染植株數(shù)112943侵染根數(shù)1131274根內(nèi)線蟲總數(shù)114221526單株根內(nèi)J2平均0.050.050.21.10.751.3

2.4 煙田病圃中移栽煙苗初期病原根結(jié)線蟲侵染調(diào)查

與室內(nèi)移栽初期調(diào)查的時(shí)間和方法相同，在煙田移栽煙草苗后，經(jīng)取樣和檢測，結(jié)果見表4。

在田間移栽煙苗的調(diào)查結(jié)果表明，第6天采集的20株煙苗中，只有1株煙苗的根系被1條幼蟲侵染，明顯比室內(nèi)侵染率低。此后，被侵染植株的數(shù)量和侵染入根系組織內(nèi)的幼蟲數(shù)量逐漸上升，至移栽后15 d，呈現(xiàn)第1個(gè)侵染高峰期，此后有下降趨勢，接著又出現(xiàn)侵染數(shù)量增加的現(xiàn)象。與室內(nèi)試驗(yàn)相比，相同之處：移栽后6 d(第1次)均已檢測到根系組織內(nèi)J2；室內(nèi)與田間試驗(yàn)均出現(xiàn)侵染的高峰時(shí)期;；侵染高峰期后，均出現(xiàn)侵染的植株數(shù)和侵入根系組織內(nèi)的幼蟲數(shù)減少的趨勢，推測其原因如上所述。不同之處：第1次調(diào)查(移栽后第6天)，室內(nèi)的受侵染植株數(shù)與侵入根組織內(nèi)的J2數(shù)量均顯著高于田間，推測與試驗(yàn)時(shí)間有關(guān)，室內(nèi)試驗(yàn)在烤煙采烤結(jié)束約1個(gè)月即移栽，此時(shí)土壤中含有相當(dāng)數(shù)量的活幼蟲，有可能在較短的時(shí)間內(nèi)侵入煙苗根系組織內(nèi)，而田間試驗(yàn)則距烤煙采烤結(jié)束時(shí)間約7個(gè)月，J2在田間不能存活幾個(gè)月的時(shí)間，推測侵入根系組織的J2為剛孵化不久的幼蟲；出現(xiàn)侵染高峰的時(shí)間有差異，室內(nèi)的侵染高峰期為移栽煙苗后第9天，田間試驗(yàn)則在第15天，此后第21天還出現(xiàn)更高侵染率，此現(xiàn)象進(jìn)一步說明侵入根組織內(nèi)的J2極有可能是由蟲卵剛孵化的幼蟲，因而，隨著煙株生長的進(jìn)程會(huì)出現(xiàn)不同的侵染高峰；室內(nèi)的溫度、光照、土壤水分等條件易于控制和穩(wěn)定，田間則波動(dòng)較大，呈現(xiàn)室內(nèi)試驗(yàn)的侵染高峰期后J2數(shù)量迅速下降的趨勢，而田間試驗(yàn)的下降趨勢表現(xiàn)不突出。從曲線趨勢，推測很有可能存在更高侵染率的高峰。但是，隨著煙株和侵入根組織內(nèi)J2的生長發(fā)育，早期侵入根組織內(nèi)的已不能檢測到，故在侵入根組織內(nèi)15 d以上的侵染部位已形成憑眼可見的小根結(jié)(圖2)。

圖2 室內(nèi)與田間根結(jié)線蟲J2侵入根組織比較Fig.2 Comparing the J2 of root-knot nematode infected into tobacco root tissue between lab and field

3 討 論

根結(jié)線蟲最重要的傳播途徑之一為土壤攜病原傳播，農(nóng)作物栽培過程中，種植地土壤中含有病原，是引發(fā)該病害發(fā)生、流行和爆發(fā)的根本原因。當(dāng)栽培地土壤中含有病原，具備適宜寄主的溫度、水分等條件，根結(jié)線蟲病害的發(fā)生成為必然。云南省氣候、土壤等條件較適宜于病原根結(jié)線蟲的生長繁殖，僅煙草生產(chǎn)中每年該病害發(fā)生面積約2萬hm2，重病田病株率達(dá)100 %，減產(chǎn)50 %[22]，給煙草產(chǎn)業(yè)帶來極大的經(jīng)濟(jì)損失。根結(jié)線蟲由蟲卵變成成熟雌蟲需經(jīng)歷4次脫皮，產(chǎn)生4種蟲態(tài)，以二齡幼蟲侵染入寄主組織內(nèi)[23]。移栽烤煙苗時(shí)若土壤中含有大量的J2，易在移栽初期侵染寄主。據(jù)作者近期調(diào)查，移栽煙苗35 d，即發(fā)現(xiàn)煙株根系產(chǎn)生蟲卵，該結(jié)果說明，從煙苗移栽至采烤完畢5個(gè)月的栽培過程中，有可能發(fā)生4次侵染循環(huán)，重復(fù)侵染煙株根系，多數(shù)植株的葉片變黃、變枯，即使進(jìn)行烘烤，也不能獲得具有價(jià)值的煙葉，導(dǎo)致絕產(chǎn)。如果病原在作物收割快結(jié)束時(shí)侵染，則對作物的產(chǎn)質(zhì)量影響較小。所以，移栽初期對根結(jié)線蟲病害進(jìn)行防控顯得極為重要。一般而言，根結(jié)線蟲的蟲卵可在土壤中存活較長時(shí)間，但J2在田間土壤中存活時(shí)間短，作者在室內(nèi)分離收集的J2一般在室溫下30 d蟲體即僵硬，但在8 ℃的冷藏柜中60 d時(shí)，多數(shù)J2還在運(yùn)動(dòng)。因而，筆者認(rèn)為，田間種植煙草的過程中，第一輪侵染循環(huán)中的J2，多數(shù)是從土壤中的蟲卵孵化而來，若此判斷正確，那么在田間防控移栽初期的侵染，其關(guān)鍵是防控土壤中蟲卵的孵化。

本研究對病圃中的病原優(yōu)勢種群，田間移栽前病圃土壤中J2的數(shù)量進(jìn)行了檢測，比較了室內(nèi)與田間煙苗移栽初期受根結(jié)線蟲病原侵染的動(dòng)態(tài)，初步表明，田間侵染寄主煙苗根系的病原根結(jié)線蟲J2是從土壤中蟲卵孵化而來。研究過程中，未對室內(nèi)移栽的病圃土進(jìn)行單位體積土壤中的J2數(shù)量檢測，但筆者在烤煙田間栽培過程中，分不同時(shí)期進(jìn)行過單位體積根際土壤中J2數(shù)量的檢測，采烤煙葉結(jié)束后，發(fā)生根結(jié)線蟲病害嚴(yán)重的煙株，其根際土壤的J2數(shù)量一般高于1000條/50 mL土，本研究中，室內(nèi)移栽之前，已對采集的病圃土進(jìn)行了翻拌混勻，距病圃中采烤結(jié)束時(shí)間約15 d，土壤中含有大量的活幼蟲，故初期侵染較為嚴(yán)重。下一步，作者擬探索從土壤中檢測根結(jié)線蟲數(shù)量的方法，以便更好地從多角度探索病原根結(jié)線蟲對農(nóng)作物的初期侵染規(guī)律。

病原根結(jié)線蟲已對越來越多的農(nóng)作物構(gòu)成嚴(yán)重的危害，病原侵染不同農(nóng)作物的初期，具有共性。探明共性侵染機(jī)制，研發(fā)有效防控措施，可適用于多種農(nóng)作物上根結(jié)線蟲病害的防控。

4 結(jié) 論

煙田病圃中按種群優(yōu)勢依次分布有花生根結(jié)線蟲(52.6 %)，爪哇根結(jié)線蟲(31.6 %)和南方根結(jié)線蟲(15.8 %)。移栽煙苗前煙田的50 mL土壤中平均J2數(shù)量為8.4條。分別在室內(nèi)和煙田取樣的 20株樣品中，移栽煙苗后第6天均有植株被檢測出根組織內(nèi)有J2，移栽初期都出現(xiàn)侵染高峰期，但室內(nèi)移栽的侵染高峰期更為明顯，所需的時(shí)間短，侵染率顯著高于田間試驗(yàn)。

致謝：魯發(fā)周和段虎練同志在本研究中做了許多幫助，特此感謝！