楊華 趙婭南 劉同方

胰腺癌是我國常見的一種惡性腫瘤。近年來，針對(duì)胰腺癌的病因?qū)W和分子生物學(xué)進(jìn)行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)半乳凝素（Galectin）在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用，包括發(fā)育、分化、細(xì)胞間粘附、細(xì)胞間基質(zhì)相互作用、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)、細(xì)胞凋亡、RNA剪接和腫瘤轉(zhuǎn)移[1-5]，其中半乳凝素-3研究最為廣泛。研究證明半乳凝素-3可以在胰腺癌中檢測(cè)到，可以作為一種潛在的胰腺癌生物標(biāo)志物[6-7]，且其與胰腺癌的預(yù)后有關(guān)[8]。本研究擬通過檢測(cè)血清中半乳凝素-3的含量，評(píng)價(jià)其在胰腺癌早期診斷的臨床應(yīng)用價(jià)值，以期為胰腺癌的早期診斷提供一種潛在的輔助檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本

經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)同意，本研究選自2015年6月—2017年6月本院的胰腺癌患者78例，平均年齡為（58±11）歲，其中女性31例，男性47例。慢性胰腺炎患者46例，平均年齡為（56±13）歲，其中女性19例，男性27例。胰腺癌患者均經(jīng)病理學(xué)確診，未接受過任何化療或放療，且無與本研究相關(guān)的重大疾病。健康對(duì)照人群募集自本院健康體檢中心，各項(xiàng)血液學(xué)和影像檢查指標(biāo)的健康人群101例，其中女性44例，男性57例，平均年齡為（54±10）歲，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組年齡與性別比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 檢測(cè)試劑與方法

采集入組人群的清晨空腹血，常規(guī)離心后獲得血清。CA199檢測(cè)試劑盒購自羅氏中國診斷有限公司，校標(biāo)后，在羅氏E170全自動(dòng)免疫分析儀上機(jī)檢測(cè)，原理為電化學(xué)發(fā)光法，正常參考值為37 U/ml。半乳凝素-3 Elisa檢測(cè)試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司。采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。血清5倍稀釋后，按照操作說明，在450 nm處檢測(cè)其OD值，然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其相應(yīng)的濃度。試劑盒的靈敏度小于0.1 ng/ml，板內(nèi)和板間變異系數(shù)均小于10%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，CA199和半乳凝素-3的含量均以中位數(shù)表示，多組間的分析比較采用單因素方差分析，如數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，使用LSD檢驗(yàn)，如數(shù)據(jù)呈非正態(tài)分布，則使用Tamhane’s T2檢驗(yàn)。CA199和半乳凝素-3的聯(lián)合檢測(cè)分析采用二元logistic回歸法。診斷價(jià)值的評(píng)價(jià)使用受試者工作特征曲線（receiver operator characteristic curve，ROC）。聯(lián)合檢測(cè)和單個(gè)指標(biāo)檢測(cè)曲線下面積（area under curve，AUC）的對(duì)比使用Z score檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CA199和半乳凝素-3在各組血清含量的比較

與健康對(duì)照組相比較，慢性胰腺炎組的CA199和半乳凝素-3差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），胰腺癌組的CA199和半乳凝素-3差異也均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與慢性胰腺炎組相比較，胰腺癌組的CA199和半乳凝素-3差異也均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 評(píng)價(jià)CA199和半乳凝素-3單獨(dú)檢測(cè)對(duì)于胰腺癌的臨床價(jià)值

當(dāng)兩種指標(biāo)單獨(dú)用于區(qū)分健康對(duì)照組和胰腺癌組時(shí)，CA199的曲線下面積為0.72（95%CI為0.61～0.83），診斷靈敏性和特異性分別為69.23%和70.30%，半乳凝素-3的曲線下面積為0.83（95%CI為0.69～0.92），診斷靈敏性和特異性則分別為71.79%和81.19%；當(dāng)兩種指標(biāo)單獨(dú)用于區(qū)分慢性胰腺炎組和胰腺癌組時(shí)，CA199的曲線下面積為0.63（95%CI為0.54～0.71），診斷靈敏性和特異性分別為61.53%和67.39%，半乳凝素-3的曲線下面積為0.75（95%CI為0.66～0.84），診斷靈敏性和特異性則分別為73.08%和71.74%。見表2。

表1 CA199和半乳凝素-3在各組血清含量的比較[中位數(shù)（25%，75%）]

表2 評(píng)價(jià)CA199和半乳凝素-3單獨(dú)對(duì)于胰腺癌的臨床價(jià)值

2.3 評(píng)價(jià)CA199和半乳凝素-3聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于胰腺癌的臨床價(jià)值

當(dāng)兩種指標(biāo)聯(lián)合用于區(qū)分健康對(duì)照組和胰腺癌組時(shí)，其曲線下面積為0.89（95%CI為0.84～0.95），診斷靈敏性和特異性分別為83.12%和85.15%，結(jié)果見圖1A，其曲線下面積與兩者單獨(dú)檢測(cè)時(shí)相比，均顯著升高（P＜0.05）；當(dāng)兩種指標(biāo)聯(lián)合用于區(qū)分慢性胰腺炎組和胰腺癌組時(shí)，CA199的曲線下面積為0.80（95%CI為0.69～0.91），診斷靈敏性和特異性分別為79.49%和83.17%，結(jié)果見圖1B，其曲線下面積與兩者單獨(dú)檢測(cè)時(shí)相比，均顯著升高（P＜0.05）。

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)半乳凝素-3可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、抗凋亡、介導(dǎo)細(xì)胞黏附和參與新生血管的形成，進(jìn)而廣泛參與到腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中[9-12]。對(duì)某些腫瘤的早期診斷、療效評(píng)價(jià)和預(yù)后評(píng)估具有重要意義[13]。免疫組化結(jié)果證明胰腺癌組織中半乳凝素-3的mRNA和蛋白均呈高表達(dá)，且其表達(dá)水平與胰腺癌的分期及預(yù)后相關(guān)[14]。血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明正常人、胰腺炎及胃腸道腫瘤患者血清標(biāo)本中均未檢出半乳凝素-3，且胰腺癌陽性率僅為30%。與本研究結(jié)果不一致的是，其檢測(cè)試劑盒靈敏度較低，而本研究的檢測(cè)試劑盒靈敏度小于0.1 ng/ml。另有其他研究表明胰腺癌患者血清半乳凝素-3明顯高于健康人及良性胰腺疾病患者，其診斷胰腺癌的敏感性與CAl9-9相仿，且與CEA及CAl9-9均無相關(guān)性[15]。其聯(lián)合CAl9-9檢測(cè)，可提高診斷敏感性，表明半乳凝素-3對(duì)胰腺癌的診斷具有較好的臨床價(jià)值，其檢測(cè)結(jié)果與本研究相似[16-17]。

本研究證明血清半乳凝素-3可以作為一種具有潛在價(jià)值的胰腺癌輔助診斷標(biāo)志物，且與CA199聯(lián)合檢測(cè)，具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。然而，本研究尚存在一定的不足之處：（1）本研究為回顧性研究，在進(jìn)一步研究中需進(jìn)行前瞻性驗(yàn)證兩者的臨床應(yīng)用價(jià)值；（2）本研究樣本量較小，導(dǎo)致研究結(jié)果可能存在一定的偏差，需進(jìn)行大樣本量進(jìn)行驗(yàn)證；（3）本研究未對(duì)胰腺癌進(jìn)行分期，其早期診斷價(jià)值未進(jìn)行評(píng)價(jià)。

圖1 A． CA199和半乳凝素-3聯(lián)合檢測(cè)區(qū)分健康對(duì)照組和胰腺癌組；B． CA199和半乳凝素-3聯(lián)合檢測(cè)區(qū)分慢性胰腺炎組和胰腺癌組