谷 磊， 楊玉芹， 王 霞

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 淮安 223300）

細(xì)菌感染引起的新生兒敗血癥是目前活產(chǎn)新生兒常見(jiàn)的感染性疾病之一。傳統(tǒng)診斷常以外周血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果作為診斷新生兒細(xì)菌性敗血癥的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，但正常新生兒的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)波動(dòng)范圍很大。國(guó)外有報(bào)道指出，患敗血癥的新生兒有50%白細(xì)胞計(jì)數(shù)可在參考區(qū)間內(nèi)，即使不正常的白細(xì)胞計(jì)數(shù)也可能出現(xiàn)在其他病理情況下，如新生兒顱內(nèi)出血、新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎等[1]。另外，血培養(yǎng)是診斷新生兒細(xì)菌性敗血癥的金標(biāo)準(zhǔn)，但培養(yǎng)需要的時(shí)間約為72 h，最快也需要36～48 h才能證實(shí)菌種，而且在有感染癥狀的患兒血中未必都能分離出細(xì)菌。

1993年，ASSICOT等[2]首先報(bào)道，沒(méi)有感染的患兒血清降鈣素原（procalcitonin，PCT）水平很低（＜0.1 ng/mL），而嚴(yán)重細(xì)菌感染患兒PCT水平升高。1996年，GENDREL等[3]發(fā)現(xiàn)所有全身性細(xì)菌感染的新生兒PCT水平均明顯升高，而病毒感染、局部感染及非感染性疾病患兒的PCT水平正?；騼H輕度升高。C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）應(yīng)用于臨床后，眾多學(xué)者研究證實(shí)，CRP在多種感染或炎癥反應(yīng)中與其他急性時(shí)相蛋白相比升高最快[4-9]。高敏C反應(yīng)蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）具有采用微量全血、報(bào)告快速、結(jié)果定量等優(yōu)點(diǎn)，且敏感性和精確度高，更適宜于兒科臨床運(yùn)用。

目前，對(duì)于PCT、hs-CRP等指標(biāo)在新生兒細(xì)菌性敗血癥早期診斷中的價(jià)值尚有爭(zhēng)論，PCT、hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)的臨界值的界定仍無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)[10-13]。為此，本研究擬評(píng)價(jià)PCT、hs-CRP單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)在新生兒細(xì)菌性敗血癥中的價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

病例組為南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院2014年12月—2016年12月收治的新生兒敗血癥患兒156例，對(duì)照組為同期南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院產(chǎn)科出生的新生兒245例。2個(gè)組之間日齡、性別以及病因等差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。根據(jù)新生兒出生日齡以及中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)新生兒學(xué)組2003年昆明會(huì)議制定的新生兒敗血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)（血培養(yǎng)陽(yáng)性）進(jìn)行細(xì)菌性敗血癥及非敗血癥患兒分組。

1.1.1 出生日齡≤3 d組 該組包括根據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為細(xì)菌性敗血癥（包括臨床敗血癥）的患兒88例，對(duì)照組為無(wú)敗血癥的患兒162例，均為新生兒呼吸窘迫綜合征和新生兒窒息患兒。

1.1.2 出生日齡4～28 d組 該組包括確診敗血癥及合并嚴(yán)重并發(fā)癥（敗血癥并發(fā)化膿性炎癥等）、發(fā)病48 h內(nèi)且未使用抗菌藥物的患兒68例，對(duì)照組為無(wú)敗血癥的患兒83例，亦均為新生兒呼吸窘迫綜合征和新生兒窒息患兒。

1.2 樣本處理和儲(chǔ)存

抽取研究對(duì)象血樣，按不同組別分別進(jìn)行處理和儲(chǔ)存。

1.2.1 敗血癥組 入院首次留取樣本后即送檢hs-CRP、血常規(guī)及血培養(yǎng)，剩余約2 mL血樣以800×g離心5～10 min，取上清置于-20 ℃的冰箱中保存，統(tǒng)一檢測(cè)PCT。

1.2.2 對(duì)照組 因?qū)φ战M均為新生兒呼吸窘迫綜合征和新生兒窒息患兒，入院后首次抽取的血樣部分送檢血常規(guī)及血培養(yǎng)、hs-CRP，剩余血樣及隨后時(shí)間段抽取的血樣以800×g離心5～10 min，取上清置于-20 ℃的冰箱中保存，統(tǒng)一檢測(cè)PCT。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)和方法

hs-CRP采用i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀（韓國(guó)BodiTech Med公司）及配套試劑盒（免疫熒光法）檢測(cè)，檢測(cè)范圍為0.5～200 mg/L。PCT采用VIDAS全自動(dòng)熒光免疫分析儀（法國(guó)生物梅里埃公司）及配套VIDAS B.R.A.H.M.S PCT試劑盒（酶聯(lián)熒光法）進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)范圍為0.05～200 ng/mL。hs-CRP和PCT的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：hs-CRP＞2 mg/L，PCT≥0.5 ng/mL。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料采用中位數(shù)（范圍）表示。采用四格表法計(jì)算各項(xiàng)抗體或抗體組合對(duì)新生兒診斷的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值及約登指數(shù)等。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PCT檢測(cè)的價(jià)值

病例組和對(duì)照組非感染新生兒出生后72 h內(nèi)均存在PCT生理性高峰，最高值主要分布于出生后12～36 h內(nèi)，隨后PCT水平開(kāi)始逐漸下降，但對(duì)照組在出生后60 h內(nèi)仍未降至成人參考區(qū)間（＜0.5 ng/mL），而是在出生后60～72 h才降至成人參考區(qū)間。見(jiàn)表1、圖1。

對(duì)對(duì)照組中確定為無(wú)細(xì)菌感染的新生兒進(jìn)行分析，得出非感染新生兒各時(shí)間段PCT的95%參考區(qū)間：0～12 h為＜0.49 ng/mL，＞12～36 h為＜4.38 ng/mL，＞36～60 h為＜1.62 ng/mL，＞60～72 h為＜0.39 ng/mL。

表1 病例組與對(duì)照組出生不同時(shí)間PCT水平的比較 [中位數(shù)（范圍）]

圖1 病例組與對(duì)照組出生不同時(shí)間PCT變化的趨勢(shì)

將所有研究對(duì)象的PCT檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)（血培養(yǎng)）進(jìn)行對(duì)比。計(jì)算得各組的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值和約登指數(shù)，其中≤3 d組分別為94.3%、39.5%、45.9%、92.7%、0.34；4～28 d組分別為85.3%、86.7%、84.1%、87.8%、0.72。見(jiàn)表2。

2.2 hs-CRP檢測(cè)的價(jià)值

將所有研究對(duì)象的hs-CRP檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比，計(jì)算得≤3 d組的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、約登指數(shù)分別為85.2%、83.3%、73.5%、91.2%、0.69；4～28 d組的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、約登指數(shù)分別為83.8%、83.1%、80.3%、86.2%、0.67。見(jiàn)表3。

表2 PCT檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比四格表

2.3 PCT和hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)的價(jià)值

以血培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，≤3 d組和4~28 d組PCT和hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值及約登指數(shù)分別為80.7%、90.1%、81.6%、89.6%、0.71和77.9%、90.4%、86.9%、83.3%、0.72。見(jiàn)表4。

表3 hs-CRP檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比

3 討論

本研究通過(guò)對(duì)156例新生兒細(xì)菌性敗血癥患兒及245例新生兒呼吸窘迫綜合征和新生兒窒息患兒的PCT、hs-CRP進(jìn)行檢測(cè)，并與血培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，分析PCT、hs-CRP及二者聯(lián)合檢測(cè)在新生兒敗血癥診斷中的價(jià)值。

表4 PCT和hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比

本研究結(jié)果顯示，病例組和對(duì)照組非感染新生兒出生后72 h內(nèi)均存在PCT生理性高峰，因此，以PCT作為敗血癥單一診斷指標(biāo)時(shí)，雖然敏感性較高，但對(duì)于≤3 d的新生兒，PCT檢測(cè)的特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及約登指數(shù)均較低，容易出現(xiàn)誤診，診斷時(shí)應(yīng)采用不同的臨界值。

以hs-CRP作為敗血癥單一診斷指標(biāo)時(shí)，雖然其敏感性略低于PCT，但對(duì)于≤3 d的新生兒，hs-CRP的特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和約登指數(shù)均較高，說(shuō)明以hs-CRP作為診斷指標(biāo)優(yōu)于PCT；對(duì)于4～28 d的新生兒，PCT各項(xiàng)指標(biāo)均略優(yōu)于hs-CRP，說(shuō)明二者均可作為診斷指標(biāo)，但PCT相對(duì)真實(shí)性更好。

采用PCT和hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，在特異性及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值明顯提高的同時(shí)，敏感性、陰性預(yù)測(cè)值及約登指數(shù)與單項(xiàng)指標(biāo)一樣，基本維持在較高水平，說(shuō)明聯(lián)合檢測(cè)的準(zhǔn)確性和真實(shí)性更好。

綜上所述，建議在新生兒細(xì)菌性敗血癥的診斷中，對(duì)于≤3 d的新生兒，采用hs-CRP作為診斷指標(biāo)；對(duì)于4～28 d的新生兒，采用PCT作為診斷指標(biāo)；在條件允許時(shí)，應(yīng)優(yōu)先采用PCT和hs-CRP聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果作為診斷標(biāo)準(zhǔn)，以提高診斷的準(zhǔn)確性。