陳 蘇,高翠紅

(1唐山市第四醫(yī)院檢驗(yàn)科,唐山 063000;2唐山市婦幼保健院檢驗(yàn)科)

腦出血(intracerebral hemorrhage,ICH)是臨床上常見的神經(jīng)科疾病,多發(fā)于老年人,近年來有年輕化的趨勢,該疾病致殘率、病死率高,嚴(yán)重威脅人類的健康。腦出血的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全清楚,近年來有學(xué)者發(fā)現(xiàn)S100B蛋白和神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)在腦出血的發(fā)病中起重要作用,可反映腦出血損傷程度[1,2]。本研究通過聯(lián)合測定腦出血患者血清和腦脊液中S100B和NSE的水平來探討兩種指標(biāo)對腦出血患者腦損傷的評估價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014-04～2015-04于我院住院治療的腦出血患者86例為病例組,其中男性47例,女性39例,年齡40-75歲,平均年齡(54.5±14.3)歲,所有病例均經(jīng)頭顱CT或MRI確診,均符合腦出血診療指南[3]。采血和抽取腦脊液前未用藥物,無嚴(yán)重心、肝、腎、肺功能衰竭、腫瘤、并排除消化道出血、血液病等并排除顱內(nèi)感染,符合腦脊液抽取的適應(yīng)證條件。按神經(jīng)功能的缺損程度評分標(biāo)準(zhǔn)[4]將腦出血患者分為輕度組(0-15分),中度組(16-30分)，重度組(31-45分)。本次研究病例為輕度組46例,重度組40例。選取對照組30例,均為因手術(shù)行腰麻的無神經(jīng)系統(tǒng)疾病的患者,其中男性17例,女性13例,年齡38-72歲,平均年齡(52.3±12.7)歲。病例組和對照組性別、年齡均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),經(jīng)患者及家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集與處理 抽取腦出血患者入院后次日晨起空腹靜脈血3 ml于干凈的干燥管中。對疑有顱內(nèi)出血,劇烈頭痛、昏迷、抽搐或癱瘓癥狀而原因不明者,腰穿抽取無菌腦脊液2 ml,所有標(biāo)本均3 000 r/min,離心10 min,取上清-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法測定S100B和NSE水平(試劑盒均為美國貝克曼公司提供),嚴(yán)格參照說明書執(zhí)行。檢測儀器為美國Thermo公司酶標(biāo)儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 一般資料

兩組患者性別構(gòu)成、年齡的比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,見表1)。

組別n男/女年齡(歲)病例組8647/3954.5±14.3對照組3017/1352.3±12.7

2.2 病例組與對照組腦脊液中S100B、NSE水平的比較

重度組ICH腦脊液中S100B、NSE水平均高于輕度組和對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),輕度組S100B、NSE水平與對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,見表2)。

2.3 病例組與對照組血清中S100B、NSE的比較

重度組ICH血清中S100B、NSE水平均高于輕度組和對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),輕度組S100B、NSE水平與對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,見表3)。

組別nS100BNSE輕度組464.5±1.25.9±3.7重度組408.7±3.4*#15.2±4.5*#對照組304.2±1.05.1±3.0F3.8757.114P<0.05<0.05

與對照組比較,*P<0.05;與輕度組比較,#P<0.05

組別nS100BNSE輕度組461.9±1.04.3±1.9重度組402.8±1.8*#12.0±2.9*#對照組301.5±0.84.0±1.5F3.4646.832P<0.05<0.05

與對照組比較,*P<0.05;與輕度組比較,#P<0.05

2.4 病例組血清、腦脊液中S100B、NSE的相關(guān)性分析

腦出血患者血清與腦脊液中S100B含量正相關(guān)(r=0.85,P<0.05),腦出血患者血清與腦脊液中NSE含量呈正相關(guān)(r=0.92,P<0.05)。

2.5 腦出血患者血清中S100B和NSE聯(lián)合檢測的ROC曲線分析

圖1和表4顯示,S100B診斷腦出血的曲線下面積為0.777,NSE診斷的曲線下面積為0.721,兩者聯(lián)合檢測的曲線下面積為0.917,聯(lián)合檢查的靈敏度和特異度最高。

圖1 S100B和NSE聯(lián)合檢測腦出血的ROC曲線Figure 1 ROC curves of S100B,NSE or their combination in diagnosis of intracerebral hemorrhage

表4腦出血血清中S100B和NSE聯(lián)合檢查的ROC曲線分析的結(jié)果

Table4TheresultsofROCcurvesofS100B,NSEortheircombinationinserumforcerebralhemorrhage

指標(biāo)AUC靈敏度特異度標(biāo)準(zhǔn)誤 S100B0.77776.8%80.6%0.034 NSE0.72174.6%84.4%0.038 S100B+NSE0.91794.1%93.0%0.028

3 討論

腦出血是臨床常見的影響人類健康的疾病。S100B蛋白和NSE是目前檢測腦損傷的常見指標(biāo)。

S100B為腦特異性蛋白,是由神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞合成和分泌的一種酸性鈣結(jié)合蛋白,腦組織中的S100B含量很高,低濃度的S100B具有神經(jīng)營養(yǎng)作用,促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的再生及修復(fù),參與細(xì)胞內(nèi)外鈣離子的調(diào)節(jié)及能量代謝,并維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等[5]。高濃度的S100B具有神經(jīng)毒性,損傷的膠質(zhì)細(xì)胞大量釋放S100B,后者刺激星形膠質(zhì)細(xì)胞等產(chǎn)生大量一氧化氮和致炎因子,通過一氧化氮依賴途徑導(dǎo)致神經(jīng)元功能障礙。腦出血損傷后,膠質(zhì)細(xì)胞破壞,血腦屏障通透性增加,S100B釋放增加。通過血腦屏障進(jìn)入外周血,導(dǎo)致血液中S100B也增加,并與腦脊液中S100B水平正相關(guān)[6]。這與本研究的血清腦脊液中S100B水平正相關(guān)一致。本實(shí)驗(yàn)還顯示S100B在重度組ICH患者血清腦脊液中比輕度組顯著升高,證明腦損傷的嚴(yán)重程度與S100B的水平密切相關(guān),與Unden等[7]的研究結(jié)果一致。

NSE是糖酵解途徑中的關(guān)鍵酶[8],存在于神經(jīng)元細(xì)胞中,是神經(jīng)元的標(biāo)志酶,腦出血時(shí),腦神經(jīng)元變性壞死,血腦屏障通透性增加,NSE經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞釋放入到血液及腦脊液中,血液及腦脊液中NSE水平升高,腦神經(jīng)功能損傷程度越重,NSE釋放的越多,血液及腦脊液中NSE水平越多,且血液腦脊液中NSE的變化成正相關(guān),本研究也顯示,腦出血組比對照組NSE顯著增加,且重度組比輕度組顯著升高,因此血液及腦脊液中NSE可作為腦出血損傷的標(biāo)記物,并與病情相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示,輕度組與對照組相比,S100B、NSE含量無顯著變化,說明輕度組神經(jīng)細(xì)胞尚未破壞,血腦屏障通透性未改變。重度組S100B、NSE高于輕度組,癥狀越重,兩者含量越高,表明腦出血患者S100B、NSE含量增加與疾病嚴(yán)重程度相關(guān),S100B在腦脊液和血清中的含量呈正相關(guān)變化,NSE在腦脊液和血清中的含量也呈正相關(guān)變化(P<0.05),ROC曲線綜合了靈敏度和特異性兩個(gè)診斷指標(biāo),客觀地評價(jià)試驗(yàn)的準(zhǔn)確性[9],根據(jù)Sweets的判斷標(biāo)準(zhǔn),面積在0.5以下,說明試驗(yàn)沒有診斷價(jià)值,面積在0.5-0.7之間有較低的準(zhǔn)確性,面積在0.7-0.9之間有一定的準(zhǔn)確性,面積>0.9則有較高的準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果顯示,NSE在ROC曲線下面積為0.721,S100B在ROC曲線下面積0.777,NSE+S100B聯(lián)合檢測在ROC曲線下面積為0.917,提示NSE+S100B聯(lián)合檢測腦出血血清,診斷價(jià)值最高。

因此,本研究證實(shí)S100B、NSE水平可作為腦出血損傷的標(biāo)記物,參與腦出血發(fā)生、發(fā)展的過程,并且可判斷病情指導(dǎo)預(yù)后。S100B聯(lián)合NSE水平檢測腦出血具有較高的診斷價(jià)值。由于抽取腦脊液受到患者身體條件的限制,推薦臨床醫(yī)生以血清檢測為主。