潘同斌 葉雷雷 馬兵 李娜 仝昕煒 汪亞如

1揚州大學(xué)體育學(xué)院（揚州 225009）

2南京體育學(xué)院訓(xùn)練處（南京 210014）

骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞是肌肉組織的前體細(xì)胞，位于肌纖維的肌膜與基底膜之間，它在骨骼肌的生長、發(fā)育、損傷及修復(fù)過程中起著重要的作用[1]。Notch信號系統(tǒng)在維持骨骼肌的形態(tài)和調(diào)節(jié)肌衛(wèi)星細(xì)胞的細(xì)胞周期等方面有決定性作用[2]，它可以通過調(diào)節(jié)肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖和分化從而促進(jìn)受損骨骼肌的生長和修復(fù)。Pax（paired-box）轉(zhuǎn)錄因子Pax7是一種常用的衛(wèi)星細(xì)胞的分子標(biāo)記[3]，Pax7的表達(dá)量能很好地反映出衛(wèi)星細(xì)胞的數(shù)量，且Pax7調(diào)控著肌衛(wèi)星細(xì)胞的分化，在大鼠骨骼肌損傷愈合期間的衛(wèi)星細(xì)胞監(jiān)測中，Pax7、MyoD呈時間依賴性表達(dá)。

轉(zhuǎn) 錄 因 子 CBF1（C-promoter binding factor-1，CBF1）又名RBP-JK[4]，是Notch信號途徑目前已知的細(xì)胞核內(nèi)唯一的調(diào)控因子，被證明參與多種細(xì)胞的分化調(diào)控。研究表明γ分泌酶抑制劑DAPT（γ-secretase in?hibitor）作為Notch信號通路的阻斷劑，能特異地阻斷γ分泌酶的作用，進(jìn)而阻止Notch信號通路的活化；而γ分泌酶（γ-secretase)對Notch受體在S3切割位點的水解很關(guān)鍵，是調(diào)節(jié)Notch信號通路的核心環(huán)節(jié)。Kuang等[5]研究結(jié)果顯示，利用DAPT來抑制Notch信號通路能夠使成肌調(diào)節(jié)因子MyoD（Myogenic Differentiation）陽性和Pax7陰性的衛(wèi)星細(xì)胞趨向分化。

離心力竭運動引起骨骼肌微損傷已為許多報道及本研究室前期研究所證實，鈍挫傷作為顯著的損傷模型，其研究機制亦有相關(guān)研究涉及[6]，但二者的同步比較還未見報道。本研究通過建立大鼠力竭運動、急性鈍挫傷兩種模型，旨在比較測定其相關(guān)因子Pax7、CBF1、DAPT，初步探索其與Notch信號通路及肌衛(wèi)星細(xì)胞之間的關(guān)系及可能機制，為骨骼肌損傷修復(fù)提供理論依據(jù)，有其特定的意義。

1 材料和方法

1.1 動物分組與取材

選用7周齡清潔級SD雄性大鼠24只，均由江蘇大學(xué)實驗動物中心提供，許可證號：SCXK（蘇）2013-0011。隨機分為4組，每組6只，即：安靜對照組（Con?trol，C組）；力竭運動即刻組（Exhaustive，E0組）；力竭運動后24 h組（E24組）；力竭運動后48 h組（E48組）。另取18只SD大鼠，分為3組，每組6只：鈍挫傷即刻組（contusion，D0組）；鈍挫傷后24 h組（D24組）；鈍挫傷后48 h組（D48組）。

安靜對照組、力竭運動組、鈍挫傷組分別于安靜狀態(tài)、力竭運動后和鈍挫傷后不同時間點，進(jìn)行宰殺取血，分離血清。并取下右側(cè)腓腸肌，將腓腸肌分為兩份，一份立即進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實驗，另一份和血清一起在－80℃冰箱保存，用ELISA法檢測Pax7、CBF1、DAPT的含量變化。另取新生3日齡鼠3只，宰殺后同樣取右側(cè)腓腸肌進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實驗。

1.2 力竭運動模型的建立

參考鄭陸的動物訓(xùn)練模型[7]，運動組大鼠均進(jìn)行一次性的力竭離心運動（即持續(xù)下坡跑），依次進(jìn)行第Ⅰ級負(fù)荷（相當(dāng)于53%VO2max強度）：0°，8.2 m/min，15 min；第Ⅱ級負(fù)荷（相當(dāng)于64%VO2max強度）：－5°，15 m/min，15 min；第Ⅲ級負(fù)荷（相當(dāng)于76%VO2max強度）：－10°，19.3 m/min，直至力竭。力竭標(biāo)準(zhǔn)：大鼠無法跟上跑臺速度總是滯留于跑臺的后端，已不能使用后肢的蹬力讓自己跑動而伏地，用毛刷、聲、光、電刺激尾部或人為驅(qū)趕都無法刺激使大鼠繼續(xù)運動，據(jù)此判定達(dá)到了力竭。

1.3 鈍挫傷模型的建立

參照Kami等的方法[8]，采用自制的打擊裝置，為金屬圓柱體，質(zhì)量為200 g。底面面積2.25πcm2，下降高度為36 cm，動能0.7 J。將大鼠右后肢置于伸膝、踝背屈位置，以2 s的間隔連續(xù)擊打5次。經(jīng)解剖發(fā)現(xiàn)，局部出現(xiàn)腫脹和輕度瘀血，證實肌肉鈍挫傷模型建模的成功率為100%。

1.4 細(xì)胞培養(yǎng)儀器及試劑

培養(yǎng)基系Gibco公司產(chǎn)品：高糖DMEM培養(yǎng)基，占78%；標(biāo)準(zhǔn)馬血清，占10%；胎牛血清，占10%；青/鏈霉素，占2%。主要儀器：采用日本OLYMPUS公司的光學(xué)倒置顯微鏡，日本尼康的NikonE600顯微照相圖像采集系統(tǒng)，賽默飛世爾（Thermo）科技公司的CO2恒溫培養(yǎng)箱。

1.5 大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離和培養(yǎng)方法

（1）取少許肌肉樣本，放入少量含2%雙抗的hanks液中，使用眼科剪將組織剪成1 mm3大小的肉糜，并將hanks緩慢倒掉。（2）放入少量0.25%的胰蛋白酶，使之消化至組織沉淀，洗滌后倒掉液體，留下沉淀。（3）再加入0.25%胰蛋白酶溶液5 m l左右，震蕩后移至離心管，然后放入37℃水浴箱消化50～60 min。（4）依次用200目、400目的篩網(wǎng)進(jìn)行過濾，收集濾液離心10 min，轉(zhuǎn)速2000 r/min，取沉淀，并加入適量的培養(yǎng)液培養(yǎng)。（5）每隔60 min進(jìn)行一次差速貼壁，共兩次。然后在第二次貼壁的培養(yǎng)瓶中，加入新鮮的培養(yǎng)液培養(yǎng)。每隔24 h更換培養(yǎng)液，用倒置顯微鏡進(jìn)行觀察，拍攝并定性分析圖像。觀察、分析各組第1天、第5天、第7天的衛(wèi)星細(xì)胞變化情況。

1.6 骨骼肌及血清中Pax Pax7 7、CBF CBF1 1、DAPT DAPT含量的測定

采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）：Pax7、CBF1、DAPT的 ELISA試劑盒均購自上海博谷生物有限公司。美國ELX800型酶標(biāo)儀，操作按照試劑盒說明，所有樣本采用平行管測定。定氮用考馬斯亮蘭法。

1.7 統(tǒng)計學(xué)分析

用Microsoft Excel處理數(shù)據(jù)，計算平均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)差。數(shù)據(jù)統(tǒng)計用SPSS21.0軟件系統(tǒng)，組間及各時相的差異，均采用One-way ANOVA程序進(jìn)行單因素方差分析，P＜0.05為顯著性差異。

2 實驗結(jié)果

2.1 力竭運動組、鈍挫傷組及新生鼠不同時期衛(wèi)星細(xì)胞的體外培養(yǎng)結(jié)果

2.1.1 各組培養(yǎng)1 1天后骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞生長狀況

當(dāng)各組大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)1天時，安靜對照組、力竭運動組和鈍挫傷組均未看到增殖和分化的肌衛(wèi)星細(xì)胞，部分只有少量未被過濾的肌纖維細(xì)胞，新生鼠組可觀察到有少量的梭形肌衛(wèi)星細(xì)胞。

2.1.2 各組培養(yǎng)5 5天后骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞生長狀況

圖1為各組大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)5天后圖片狀況：安靜對照組（C組）仍未看到有衛(wèi)星細(xì)胞痕跡；其余各組肌衛(wèi)星細(xì)胞增長趨勢良好，數(shù)量上比之前幾天均明顯增多，鈍挫傷組在增長數(shù)量上要高于力竭各組。新生鼠衛(wèi)星細(xì)胞在數(shù)量上依然占據(jù)首位，已經(jīng)完全覆蓋培養(yǎng)皿，細(xì)胞大量富集，表明肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)第5天各組開始大量增殖。力竭運動各組（E0、E24、E48）之間和鈍挫傷各組（D0、D24、D48）之間相比較，骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量隨時間延長呈遞增趨勢。

圖1各組培養(yǎng)5天后骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞生長狀況（n=6）

2.1.3 各組培養(yǎng)7 7天后骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞生長狀況

由圖2可見，安靜對照組（C組）依舊未出現(xiàn)衛(wèi)星細(xì)胞，其余各組比前幾天均出現(xiàn)不同程度的大量增殖，到第7天時均在培養(yǎng)皿中有較密的分布。力竭運動和鈍挫傷各組骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖分化為紡錘形和星形，細(xì)胞呈集落樣，并且細(xì)胞之間不同程度地出現(xiàn)少量交叉融合現(xiàn)象，折光性好且可見細(xì)胞中央的透明細(xì)胞核，少量正在趨向融合。鈍挫傷各組細(xì)胞已布滿培養(yǎng)皿，D0組和D24組肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖、遷移并逐漸規(guī)律性地沿一個方向平行排列并伴有少量相互融合現(xiàn)象。新生鼠（N）組培養(yǎng)7天后培養(yǎng)皿細(xì)胞已達(dá)到飽和，細(xì)胞開始由增殖分化逐漸轉(zhuǎn)換為融合。

2.2 力竭運動及鈍挫傷各個時期大鼠骨骼肌、血清中CBF CBF1 1含量變化

從表1可見，與安靜對照組對比，力竭運動及鈍挫傷各組骨骼肌和血清中CBF1的含量均上調(diào)，且均具有顯著差異（P＜0.05），其中D0組差異極顯著（P＜0.01），且明顯高于其他各組（P＜0.05）；但力竭運動各組（E0、E24、E48）和鈍挫傷D24、D48組之間差異不顯著（P＞0.05）。

表1各組大鼠骨骼肌、血清中轉(zhuǎn)錄因子CBF1含量的變化（n=6）

圖2各組培養(yǎng)7天后骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞生長狀況（n=6）

2.3 力竭運動及鈍挫傷各個時期大鼠骨骼肌、血清中DAPT DAPT含量變化

表2結(jié)果顯示：與安靜對照組對比，力竭運動及鈍挫傷各組骨骼肌和血清中DAPT的含量均下調(diào)，且均具有顯著差異（P＜0.05）；其中D0組差異極顯著（P＜0.01），且明顯低于其他各組（P＜0.05）；但力竭運動各組（E0、E24、E48）和鈍挫傷D24、D48組之間差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 力竭運動及鈍挫傷各個時期大鼠骨骼肌、血清中Pax Pax7 7含量變化

從表3可見，與安靜對照組對比，力竭運動及鈍挫傷各組骨骼肌和血清中Pax7的含量均上調(diào)，且均具有顯著差異（P＜0.05）；其中D24、D48兩組差異極顯著（P＜0.01），且明顯高于其他各組（P＜0.05）；但力竭運動各組（E0、E24、E48）和鈍挫傷D0組之間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 鈍挫傷、力竭運動對衛(wèi)星細(xì)胞的激活及體外培養(yǎng)增殖分化情況對比

目前關(guān)于力竭運動、鈍挫傷對衛(wèi)星細(xì)胞激活的比較研究還少見報道。骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞是一種具有一定自我更新能力及某種程度定向分化的成體組織內(nèi)的干細(xì)胞[1]，一般情況下保持靜止?fàn)顟B(tài)、不分裂，但受到創(chuàng)傷、負(fù)重鍛煉、牽拉等刺激后，肌衛(wèi)星細(xì)胞從靜息轉(zhuǎn)向激活狀態(tài)，胞質(zhì)擴(kuò)張。當(dāng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、核糖體和高爾基體等變得清晰明顯時，進(jìn)入分裂、增殖期，產(chǎn)生肌前體細(xì)胞，并分化、融合成肌管，再形成肌細(xì)胞。如果用伽馬射線進(jìn)行破壞，即使再進(jìn)行抗阻訓(xùn)練，肌肉也不會再有所增長。因此肌肉的損傷，衛(wèi)星細(xì)胞的激活是肌纖維再生、修復(fù)的前提，其增殖和分化也是肌細(xì)胞肥大、數(shù)目增多及肌纖維轉(zhuǎn)化的重要機制[9]。

表2各組大鼠骨骼肌、血清中轉(zhuǎn)錄因子DAPT含量的變化（n=6）

表3各組大鼠骨骼肌、血清中轉(zhuǎn)錄因子Pax7含量的變化（n=6）

有研究表明，當(dāng)骨骼肌受到鈍挫傷后，其損傷區(qū)域就會出現(xiàn)大量肌衛(wèi)星細(xì)胞的激活和增殖。于秋華等[6]通過建立鈍挫傷模型，采用免疫組化方法測定肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）的表達(dá)，結(jié)果在損傷后第1天，大鼠腓腸肌損傷組織中開始出現(xiàn)肌衛(wèi)星細(xì)胞PCNA陽性核表達(dá)；到損傷后的第14天，受損組織中仍有衛(wèi)星細(xì)胞PCNA陽性核呈現(xiàn)。將培養(yǎng)成功并經(jīng)過熒光標(biāo)記的肌衛(wèi)星細(xì)胞移植到大鼠的鈍挫傷部位，在鈍挫傷部位修復(fù)后，可出現(xiàn)帶有熒光的肌細(xì)胞核，且移植的大鼠比未移植大鼠的鈍挫傷修復(fù)部位的肌細(xì)胞排列更加緊密，說明衛(wèi)星細(xì)胞在骨骼肌鈍挫傷修復(fù)中有著重要作用。Bickel等[10]選擇8位不常運動的健康男性，讓其進(jìn)行離心踢腿運動，結(jié)果顯示4天后肌衛(wèi)星細(xì)胞的數(shù)目顯著增加，隨后又選取11名老年男性，經(jīng)過14周的耐力訓(xùn)練，結(jié)果衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)目在股外側(cè)肌增加了29%，這表明衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)目受運動影響較大，其數(shù)目增加可防止肌肉的萎縮，并維持老年人的肌肉體積和肌肉質(zhì)量。

本實驗通過對新生鼠組、力竭運動組及鈍挫傷組分別進(jìn)行骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外培養(yǎng)，結(jié)果顯示，不同模型刺激后的衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量和體外增殖速度也不同。大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)1天后，安靜對照組未見梭形或圓形細(xì)胞，力竭組、鈍挫傷組中雖未見梭形細(xì)胞，但可見少許的圓形細(xì)胞，還未明顯激活；此時新生鼠組可見少量激活的梭形肌衛(wèi)星細(xì)胞。當(dāng)各組骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)3天及5天時，除安靜對照組外，均可見梭形的肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖。到第7天時均達(dá)到各自的增殖高峰期。力竭運動和鈍挫傷各組骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖分化為紡錘形和星形，細(xì)胞呈集落樣，并且細(xì)胞之間不同程度地出現(xiàn)少量交叉融合現(xiàn)象，折光性好且可見細(xì)胞中央的透明細(xì)胞核，少量正在趨向融合。新生鼠的肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量明顯多于其它各組，可見新生鼠肌衛(wèi)星細(xì)胞尚未進(jìn)入休眠狀態(tài)，此時活性最強，增殖和分化速度最快，有利于骨骼肌的快速生長和發(fā)育。而鈍挫傷組的肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量明顯多于力竭運動組，可能由于鈍挫傷對骨骼肌造成的損傷程度較重，亦能較強地刺激衛(wèi)星細(xì)胞的激活、增殖，進(jìn)而促進(jìn)骨骼肌的損傷修復(fù)。此外，力竭運動各組（E0、E24、E48）之間和鈍挫傷各組（D0、D24、D48）之間相比較，骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量隨著時間延長呈遞增趨勢，體現(xiàn)了衛(wèi)星細(xì)胞激活的時間效應(yīng)。關(guān)于衛(wèi)星細(xì)胞在體數(shù)量的變化，還有待進(jìn)一步研究。

3.2 CBF CBF1 1與Notch Notch信號通路在骨骼肌損傷修復(fù)的作用

Notch信號通路是一個多因素、多步驟參與的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，且高度保守，在細(xì)胞分化和胚胎發(fā)育中起重要作用[11]。除Notch及其配體Delta外，參與Notch信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子還包括下游效應(yīng)子Hes、轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子CBF1等。D'Souza等[12]報道，Ⅰ型糖尿病人和小鼠由于Notch信號的改變，會引起衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量和功能減退。Divya等[13]報道，激活轉(zhuǎn)錄因子2（ATF2）作為神經(jīng)前體細(xì)胞的一個因子，通過CBF1/Notch信號通路，可協(xié)同激活Notch依賴性神經(jīng)前體細(xì)胞Hes-1的表達(dá)。CBF1又名RBP-Jκ，是目前已知的Notch信號途徑中細(xì)胞核內(nèi)唯一的調(diào)控因子，Notch/CBF1途徑已被證明參與多種細(xì)胞的分化調(diào)控[4]，例如其參與了小鼠骨組織的發(fā)生發(fā)育的全過程，可能也參與了成熟骨組織的代謝和改建。王勝朝[14]等在成骨前體細(xì)胞中檢測發(fā)現(xiàn)：CBF1作為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子瞬時表達(dá)，可以促進(jìn)核心結(jié)合因子Cbfa1基因啟動子和骨鈣素基因啟動子區(qū)域Ose2元件的啟動子活性，提示CBF1可能對前體細(xì)胞的骨形成分化有正向調(diào)節(jié)作用。

目前有關(guān)運動及鈍挫傷對CBF1、DAPT、Pax7與Notch的影響研究少見報道，大都研究其與疾病及衛(wèi)星細(xì)胞的關(guān)系。本實驗?zāi)Ｐ拖?，與安靜對照組相比，力竭運動和鈍挫傷可以使大鼠骨骼肌和血清CBF1和Pax7的含量上升，但下調(diào)DAPT的含量。表明CBF1和Pax7可能在骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活及骨骼肌損傷修復(fù)中起著正向調(diào)節(jié)的作用，而DAPT可能起著負(fù)向調(diào)節(jié)作用。

3.3 DAPT DAPT與Notch Notch信號通路在骨骼肌損傷修復(fù)中的作用

穆樹云[15]通過對生長期小鼠進(jìn)行下坡跑運動、平坡跑運動和游泳運動等3種不同方式的運動干預(yù)，研究對生長期小鼠骨密度、骨礦物質(zhì)含量及骨代謝關(guān)鍵因子表達(dá)的影響，結(jié)果顯示：跑臺運動能夠顯著上調(diào)Notch信號通路中γ-分泌酶的表達(dá)，而DAPT可特異性地抑制γ分泌酶從而阻斷Notch信號通路。該研究還顯示，激活Notch通路可促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone mesenchymal stem cells，BMSC）的增殖，但抑制Notch通路可促進(jìn)BMSC成骨分化。Wang等[16]研究報道，Lingo-1 shRNA和Notch信號抑制劑DAPT可促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞分化成神經(jīng)元。Kuang等[5]研究結(jié)果顯示，如果利用γ-分泌酶的抑制劑DAPT來抑制Notch信號通路，能夠使成肌調(diào)節(jié)因子MyoD（myogenic differentia?tion）陽性和Pax7陰性的衛(wèi)星細(xì)胞趨向分化。由于一部分衛(wèi)星細(xì)胞的不對稱分裂，導(dǎo)致了Numb（一個重要的細(xì)胞命運決定子）的不均勻分布。Numb能抑制Notch信號通路，其作用方式為通過結(jié)合到Notch受體胞內(nèi)段（notch intracellula domain，NICD）上來抑制細(xì)胞核的易位。本實驗?zāi)Ｐ拖?，力竭運動和鈍挫傷均可下調(diào)DAPT的含量，可能通過降低DAPT對Notch信號通路的抑制作用，而在骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活及骨骼肌損傷修復(fù)中起著正向調(diào)節(jié)作用。

3.4 Pax Pax7 7對衛(wèi)星細(xì)胞及骨骼肌損傷修復(fù)的影響

Pax7是pax基因家族的第Ⅲ組，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)和骨骼肌的發(fā)育有著很重要的作用，是一種強有力的生肌性誘導(dǎo)物，尤其在骨骼肌受到損傷時對修復(fù)起到重要作用，且Pax7是肌再生的上游調(diào)節(jié)者[17]。當(dāng)Pax7基因表達(dá)被干擾后，肌肉不能正常發(fā)育；Pax7基因可作為靶標(biāo)基因來治療肌肉萎縮或肌肉發(fā)育障礙等肌肉疾病。當(dāng)缺少pax7時，由于細(xì)胞周期缺陷而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，出生后衛(wèi)星細(xì)胞將會急劇丟失，故表達(dá)Pax7細(xì)胞的數(shù)量能夠很好地反映出衛(wèi)星細(xì)胞的數(shù)量[18]。在激活的衛(wèi)星細(xì)胞中，pax7有重要的抗凋亡作用，這是pax3所不能補償?shù)摹?/p>

王今越[19]研究發(fā)現(xiàn)，Pax7在衰老組（40 d D-半乳糖注射致衰老）下降，運動組（40 d D-半乳糖注射+6周跑臺運動的衰老運動組）Pax7上調(diào)，提示運動后Pax7的升高明顯對肌肉流失起到抑制作用。Zheng等[20]研究了Pax7，MyoD，Myf5在肌再生與分化中的甲基化特征，發(fā)現(xiàn)在成肌細(xì)胞的融合進(jìn)程中，可見到Pax7，MyoD和Myf5基因前體和外顯子1的甲基化，且具有低甲基化與高表達(dá)之間的反向變化關(guān)系。結(jié)果顯示DNA的甲基化可能是細(xì)胞再生分化過程中調(diào)節(jié)Pax7和MRFs轉(zhuǎn)錄的重要機制。本研究結(jié)果顯示，力竭運動和鈍挫傷在對衛(wèi)星細(xì)胞激活增強的同時，Pax7也呈現(xiàn)出同步增高，顯示了一定的平行關(guān)系和相關(guān)性。

綜上所述，在骨骼肌的生長發(fā)育和再生過程中，衛(wèi)星細(xì)胞均發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，CBF1、DAPT、Pax7與Notch信號通路是調(diào)節(jié)這一過程的重要信號通路。本研究建立大鼠力竭運動、鈍挫傷兩種模型，初步比較了在不同模型下的衛(wèi)星細(xì)胞激活及體外培養(yǎng)情況，以及CBF1、DAPT、Pax7在不同程度損傷修復(fù)中的含量變化，并對相關(guān)機理進(jìn)行了初步探討，為骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞在肌肉損傷修復(fù)中的作用及機制提供了參考依據(jù)，對于肌肉疾病的診斷、治療和預(yù)后具有參考意義。

4 結(jié)論

（1）鈍挫傷及力竭運動均可激活肌衛(wèi)星細(xì)胞激活，并使其增殖分化，且鈍挫傷組的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖數(shù)量明顯多于力竭運動組，可能由于鈍挫傷對衛(wèi)星細(xì)胞的刺激更強所致。

（2）鈍挫傷和力竭運動可以使大鼠骨骼肌和血清Pax7和CBF1的含量上升，但下調(diào)DAPT的含量。Pax7和CBF1可能在骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活及骨骼肌損傷修復(fù)中起著正向調(diào)節(jié)的作用，而DAPT可能起著負(fù)向調(diào)節(jié)作用。