閻 歡, 吳 楠, 吳 靜, 劉素娜, 白 潔

(東北制藥集團(tuán)股份有限公司, 遼寧 沈陽(yáng) 110027)

替格瑞洛是一種新型的、具有選擇性的小分子抗凝血藥,用于治療急性冠脈綜合癥(不穩(wěn)定性心絞痛、非ST段抬高心肌梗死或ST段抬高心肌梗死),包括藥物治療和經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入(PCI)治療,可降低血栓性心血管事件的發(fā)生率.替格瑞洛化合物最早是由阿斯利康公司開發(fā)的，并申請(qǐng)了專利,但是這條路線反應(yīng)步驟較多,并用到了三溴甲烷、三氟醋酸酐等有毒氣體,不利于工業(yè)生產(chǎn).國(guó)內(nèi)有很多報(bào)道合成替格瑞洛的制備方法,分析公開的文獻(xiàn)可以看出大多數(shù)都是將替格瑞洛分成3個(gè)片段,運(yùn)用這3個(gè)片段不同的反應(yīng)順序和鏈接次序來制備替格瑞洛[1-3].經(jīng)過分析文獻(xiàn)和大量實(shí)驗(yàn)操作,以購(gòu)買的原料4,6-二氯-2-(丙巰基)-5-氨基嘧啶和2-[[(3AR,4S,6R,6AS)-6-氨基四氫-2,2-二甲基-4H-環(huán)戊并-1,3-二惡茂-4-基]氧基]-乙醇在高溫密封條件下反應(yīng)得到中間體1;再經(jīng)過亞硝酸鈉、冰乙酸環(huán)合成三氮唑得到中間體2;中間體2再與購(gòu)買的原料(1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙胺對(duì)接消除一分子鹽酸得到中間體3;經(jīng)甲醇鹽酸水解得到目標(biāo)產(chǎn)物替格瑞洛粗品;最后用乙酸乙酯和正庚烷精制后得到替格瑞洛成品.這條路線簡(jiǎn)短、省時(shí),操作簡(jiǎn)單,適合工業(yè)化生產(chǎn).其工藝路線如下:

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器和藥品

電子天平，YP602N，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司； NMR儀，AV-600，BRUKER；UV-VIS檢測(cè)器，BRUKER；氣相色譜儀，6890N，安捷倫科技有限公司；傅里葉變換紅外光譜儀，iS10型， NICOLET；超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，Aquaty-Xevo TQ型 ，Waters；分光光度計(jì)，UV/VIS Lambda 35，Perkin Elmer；核磁共振儀，ARX-300，BRUKER.購(gòu)買的原料2、3、6分別為4,6-二氯-2-(丙巰基)-5-氨基嘧啶、2-[[(3AR,4S,6R,6AS)-6-氨基四氫-2,2-二甲基-4H-環(huán)戊并-1,3-二惡茂-4-基]氧基]-乙醇、(1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙胺，均由南京克萊森公司生產(chǎn)，其它試劑由天津博迪化工有限公司生產(chǎn).

1.2 操作法

1.2.1 中間體4的制備

將15.4 g(65 mmol)原料2加入到100 mL 1,4-二氧六環(huán)中,攪拌下加入18 mL三乙胺,加入9.0 g(41 mmol)原料3、1.0 g碘化鉀,密封反應(yīng),升溫至110～l20 ℃之間,攪拌反應(yīng)7 h,降溫,40～50 ℃下減壓蒸去溶劑,得到粘稠液,加入100 mL乙酸乙酯和100 mL水,攪拌10 min后分層,50 mL乙酸乙酯洗水相,合并有機(jī)相,50 mL飽和氯化鈉水溶液洗有機(jī)相一次,靜置10 min后分層,減壓蒸去溶劑,得到油狀物,加入100 mL正己烷,攪拌析出固體,攪拌2 h后過濾,得到12.0 g中間體4.

1.2.2 中間體5的制備

將12 g中間體4溶于40 mL冰醋酸中,攪拌溶解后冷卻至5 ℃以下,10 min內(nèi)分批加入2.7 g亞硝酸鈉固體,加畢,自然升溫至20～25 ℃,攪拌30 min后TLC顯示反應(yīng)完全.加入乙酸乙酯100 mL和水100 mL,攪拌10 min后,分層.30 mL乙酸乙酯洗水相一次,分層后,合并有機(jī)相.將有機(jī)相冷卻至10 ℃以下,用飽和碳酸鈉水溶液調(diào)pH值至7,分出有機(jī)相,用5 g硫酸鈉干燥1 h后過濾,30 ℃以下減壓濃縮濾液,得到棕紅色油狀物(中間體5).

1.2.3 中間體7的制備

向上述制備的中間體5中加入50 mL乙腈,攪拌溶解后,加入9.2 g(54 mmol)原料6,20 ℃下滴加10.5 mL三乙胺,完畢,室溫下攪拌反應(yīng)8 h,TLC顯示反應(yīng)完全,減壓濃縮蒸去大部分乙腈,加入100 mL乙酸乙酯和100 mL水,攪拌10 min后分液,分出有機(jī)層,30 ℃以下減壓濃縮得到棕紅色油狀物(中間體7).

1.2.4 替格瑞洛的合成

向上述制備的中間體7中加入150 mL甲醇,攪拌溶解后,降溫至5 ℃以下,滴加45.5 mL 3 mol/L鹽酸,滴畢,自然升溫至室溫,攪拌反應(yīng)24 h,TLC顯示反應(yīng)完全.10 ℃下反應(yīng)液以稀氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.2,減壓除去甲醇.加入乙酸乙酯100 mL和水100 mL,攪拌10 min后分層.分別用30 mL乙酸乙酯洗水相兩次,分層后,合并有機(jī)相.50 mL飽和氯化鈉洗有機(jī)相一次,分層,5 g硫酸鎂干燥脫水1 h后過濾,濾液內(nèi)加入5 g活性炭,40～45 ℃下攪拌，脫色2 h后過濾,除活性炭.30 ℃下減壓濃縮,蒸出大部分乙酸乙酯后,加20 mL正庚烷,攪拌析晶3 h后過濾,得到8.3 g淺黃色固體.

1.2.5 替格瑞洛的精制

向反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入8.3 g粗品、42 mL乙酸乙酯,攪拌加熱至55 ℃,溶清,50 ℃下滴加12 mL正庚烷,10 min內(nèi)滴畢,自然降溫,析出固體,室溫下攪拌3 h后過濾,得到7.3 g白色固體,精制收率87.9 %,總收率為22 %.

2 結(jié)果與討論

2.1 結(jié)構(gòu)確證研究

2.1.1 核磁

(1)儀器型號(hào)及測(cè)試條件

儀器:BRUKER AV-600型NMR儀;

溶劑:DMSO.

(2)測(cè)定數(shù)據(jù)

1H NMR(DMSO,600 MHz)δ:9.40(1H,d,J=3.3 Hz,NH),7.36～7.26(2H,m,Ar-H),7.08(1H,m,Ar-H),5.18(1H,d,J=6.4 Hz,CH),5.11(1H,d,J=3.6 Hz,CH),5.02～4.98(1H,q,J=9.0 Hz,CH),4.66～4.60(2H,m,CH2),3.98(1H,m,OH),3.79(1H,m,OH),3.66～3.50(4H,m,O-CH2CH2),3.18～3.10(1H,m,OH),2.98～2.94(1H,m,OH),2.88～2.84(1H,m,CH),2.69(1H,m,CH),2.27和2.14(1H,m,CH),2.09～2.05(1H,m,CH),1.71～1.38(4H,m,-SCH2-CH2),0.83(3H,t,J=7.4 Hz,CH3),共有28個(gè)氫原子,歸屬各氫原子峰位及峰面積,與替格瑞洛結(jié)構(gòu)相符合.

13C NMR(CDCl3,300 MHz)δ:169.3,154.1,150.3,149.6,148.7,147.1,139.4,123.3,117.1,114.9,81.9,74.5,73.8,70.9,60.6,60.4,34.2,33.3,32.4,24.2,22.4,15.1,13.0,共有23個(gè)碳原子,歸屬各碳原子峰位,與替格瑞洛結(jié)構(gòu)相符合.

2.1.2 質(zhì)譜

(1) 儀器及質(zhì)譜聯(lián)用條件

儀器:Waters Aquaty-Xevo TQ 超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀.

色譜柱:ACQUITY UPLCR BEH C18,2.1 mm×50 mm,1.7 μm,Waters公司;

液相條件:乙腈-質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1 %甲酸水溶液(體積比為40∶60)為流動(dòng)相，流速0.4 mL/min，柱溫40 ℃,進(jìn)樣量1 mL.

質(zhì)譜條件:電噴霧離子源正離子檢測(cè)(ESI+),m/z掃描范圍50～800,毛細(xì)管電壓3 kV,錐孔電壓15 V,脫溶劑溫度500 ℃,脫溶劑氣1 000 L/h,碰撞氣0.16 mL/min,碰撞電壓30 V.

(2)樣品溶液制備

分別取替格瑞洛對(duì)照品、樣品適量,50 %(體積分?jǐn)?shù))乙腈稀釋制成0.11 g/L作為供試品溶液.

(3)替格瑞洛質(zhì)譜結(jié)構(gòu)確證

替格瑞洛樣品與替格瑞洛對(duì)照品保留時(shí)間一致,皆為3.7 min;其一級(jí)質(zhì)譜圖中均掃描到m/z 523的(M+H)+峰、m/z 545的(M+Na)+峰、m/z 561的(M+K)+峰,與替格瑞洛對(duì)照品一級(jí)質(zhì)譜圖一致,且(M+H)+峰二級(jí)質(zhì)譜圖亦與替格瑞洛對(duì)照品一致,故確證樣品為替格瑞洛.

2.2 替格瑞洛質(zhì)量數(shù)據(jù)

通過三批產(chǎn)品15001、15002、15003表示替格瑞洛產(chǎn)品質(zhì)量，具體數(shù)據(jù)如表1所示.

表1 替格瑞洛質(zhì)量數(shù)據(jù)Table 1 The quality date of Ticagrelor

注：各批次性狀均為白色粉末，重金屬含量均符合規(guī)定.

由表1可知：替格瑞洛質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過99 %，單個(gè)雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)不超過0.1 %，總雜質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)不超過0.5 %，符合替格瑞洛的外購(gòu)標(biāo)準(zhǔn).

2.3 討 論

中間體4的制備過程中參考文獻(xiàn)[4]以乙醇為溶劑,高溫反應(yīng)30 h,得到的產(chǎn)品是油狀物;在本實(shí)驗(yàn)中改用二氧六環(huán)為反應(yīng)溶劑,加入碘化鉀為催化劑,大大縮短了反應(yīng)時(shí)間,而且反應(yīng)結(jié)束后加入正己烷可以析出固體.

替格瑞洛粗品的制備過程中文獻(xiàn)[4]需要柱分離得到粗品,改用加入正庚烷,無需柱分離直接可以得到淺黃色固體.

3 結(jié) 論

采用上述路線制備替格瑞洛,合成步驟少,反應(yīng)時(shí)間短,操作簡(jiǎn)單,避免用到柱分離等工業(yè)上難操作的方法,產(chǎn)物質(zhì)量好,純度能達(dá)到99.6 %,對(duì)環(huán)境污染小,適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn).