劉風(fēng)韻, 可成友

(沈陽(yáng)化工大學(xué) 制藥與生物工程學(xué)院， 遼寧 沈陽(yáng) 110142)

近年來(lái)，心腦血管病發(fā)病率和致死率逐年升高，心腦血管類藥物的研發(fā)及工藝改造面臨著更高的要求和挑戰(zhàn).馬來(lái)酸桂哌齊特是新一代的哌嗪類藥物，其在腦血管疾病[1-5]、心血管疾病[6-9]、外周血管疾病[10]等方面的治療效果已得到國(guó)內(nèi)外認(rèn)可，是目前治療心腦血管類疾病的一線藥物.目前，國(guó)內(nèi)市售的馬來(lái)酸桂哌齊特注射液均為水針劑，關(guān)于馬來(lái)酸桂哌齊特凍干劑的研究極少 .為滿足臨床用藥需求，提高產(chǎn)品穩(wěn)定性，填補(bǔ)凍干劑型市場(chǎng)空白，本文對(duì)馬來(lái)酸桂哌齊特凍干劑的工藝進(jìn)行了研究.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 藥品、試劑、儀器及設(shè)備

馬來(lái)酸桂哌齊特標(biāo)準(zhǔn)品(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.76 %)、馬來(lái)酸桂哌齊特順式異構(gòu)體(質(zhì)量分?jǐn)?shù)97.18 %)，上海江萊生物科技有限公司；馬來(lái)酸桂哌齊特(質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.21 %)，武漢風(fēng)竹林化學(xué)科技有限公司；山梨醇，山東壽光市華力糖醇有限公司；氫氧化鈉(分析純)，國(guó)藥集團(tuán)；活性炭，唐山華能科技炭業(yè)有限公司.

PHS-3C型pH計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；BSA224S-CW型電子分析天平，賽多利斯公司；RE-52型玻璃雙蒸水器，上海亞榮旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；xt20595型冷凍干燥機(jī)，北京百思佳特科技有限責(zé)任公司；LC20A型HPLC，島津公司.

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 溶液制備工藝

分別制備無(wú)輔料馬來(lái)酸桂哌齊特溶液和添加山梨醇或甘露醇的馬來(lái)酸桂哌齊特溶液：

(1)制備規(guī)格80 mg/支： 室溫下，稱量馬來(lái)酸桂哌齊特80 g，無(wú)輔料或加入輔料(山梨醇或甘露醇)60 g，溶于1 200 mL注射用水中；用1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為4±0.5，加水至2 000 mL，混勻；加入100 g的活性炭，在50 ℃下，攪拌吸附20 min，用雙層濾紙脫碳過(guò)濾；用0.22 μm微孔濾膜除菌過(guò)濾；分裝成2 mL/支，置5 mL西林瓶中.

(2)制備規(guī)格320 mg/支： 室溫下，稱量馬來(lái)酸桂哌齊特320 g，無(wú)輔料或加入輔料(山梨醇或甘露醇)300 g，溶于4 800 mL注射用水中；用 1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為4±0.5，加水至10 000 mL，混勻；加入500 g的活性炭，在50 ℃下攪拌吸附20 min，用雙層濾紙脫碳過(guò)濾；用0.22 μm微孔濾膜除菌過(guò)濾；分裝成10 mL/支，置20 mL西林瓶中.

1.2.2 凍干工藝

將西林瓶放在隔板上，隔板溫度設(shè)為0 ℃；封閉干燥，隔板溫度從0 ℃降至-35 ℃，對(duì)凍干溶液進(jìn)行固化4 h；打開(kāi)冷阱，維持18 h；將隔板溫度依次升至-5 ℃、20 ℃、40 ℃，且隔板在3個(gè)溫度水平分別維持5 h、4 h、2 h；封蓋，避光保存.

1.2.3 檢測(cè)方法

文中馬來(lái)酸桂哌齊特質(zhì)量分?jǐn)?shù)(以下簡(jiǎn)寫為“含量”)、pH值、水分及有關(guān)物質(zhì)均依據(jù)馬來(lái)酸桂哌齊特注射液國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)[WS1-(X-328)-2004Z]進(jìn)行測(cè)定.

水溶液pH值測(cè)定：取3.2 g馬來(lái)酸桂哌齊特干粉溶于100 mL水中，pH值應(yīng)為3.5～4.5(中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅵ H).

有關(guān)物質(zhì)測(cè)定：避光操作.取含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液.按照含量測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)定，精密量取對(duì)照溶液20 μL注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分峰的峰高約為滿量程的20 %；再精密量取供試品溶液和對(duì)照溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至供試品溶液主峰保留時(shí)間的2倍.供試品溶液色譜圖中，順式異構(gòu)體峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1/2；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1/10；其他未知雜質(zhì)峰面積之和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1/2.

水分測(cè)定：取注射用馬來(lái)酸桂哌齊特，按照水分測(cè)定法(中國(guó)藥典2010版附錄Ⅷ M 第一法A)測(cè)定，含水分不得過(guò)1.0 %(質(zhì)量分?jǐn)?shù)).

馬來(lái)酸桂哌齊特質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定：按照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)測(cè)定.

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈和0.05 mol/L磷酸氫二鈉緩沖液(用磷酸調(diào)pH值至4.5±0.1,體積比為40∶60)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，柱溫30 ℃.精密稱取馬來(lái)酸桂哌齊特順式異構(gòu)體對(duì)照品適量，加流動(dòng)相制成每1 mL中約含0.2 mg馬來(lái)酸桂哌齊特順勢(shì)異構(gòu)體的溶液(A)；精密量取溶液(A)1 mL，此溶液置50 mL量瓶中，加對(duì)照品溶液稀釋至刻度，搖勻，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液(B)；精密量取溶液(B)20 μL注入液相色譜儀，理論板數(shù)按馬來(lái)酸桂哌齊特峰計(jì)算，一般不低于5 000，馬來(lái)酸桂哌齊特與順式異構(gòu)體的分離度應(yīng)大于1.5.

馬來(lái)酸桂哌齊特質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定法：避光操作.取馬來(lái)酸桂哌齊特注射劑40 mg精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解后，稀釋制至刻度，搖勻，精密量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取馬來(lái)酸桂哌齊特對(duì)照品適量，同法測(cè)定.按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得馬來(lái)酸桂哌齊特質(zhì)量分?jǐn)?shù)，含馬來(lái)酸桂哌齊特應(yīng)為標(biāo)示量的95.0 %～105.0 %.

2 結(jié)果與討論

文中涉及百分?jǐn)?shù)除主體含量為標(biāo)示量的百分含量以外，其余均為質(zhì)量分?jǐn)?shù).

2.1 輔料的選擇

選用輔料需具有凍干屬性，結(jié)合主要雜質(zhì)馬來(lái)酸桂哌齊特順勢(shì)異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，選用符合要求的山梨醇和甘露醇兩種輔料進(jìn)行對(duì)比.

按1.2.2方法制備的注射用馬來(lái)酸桂哌齊特質(zhì)量情況見(jiàn)表1.

表1 注射用馬來(lái)酸桂哌齊特質(zhì)量情況Table 1 The quality of maleate injection cinepazide

從表1數(shù)據(jù)可知：加入輔料的注射用馬來(lái)酸桂哌齊特平均含水量比未加入輔料的馬來(lái)酸桂哌齊特平均含水量高(均≤1 %)；加入山梨醇的注射用馬來(lái)酸桂哌齊特平均主體含量均比加入甘露醇的注射用馬來(lái)酸桂哌齊特平均主體含量高，且前者平均雜質(zhì)總含量均低于后者，所以，選用山梨醇作為凍干劑.

2.2 山梨醇的影響

《輔料大全》中對(duì)山梨醇相關(guān)性質(zhì)進(jìn)行了較為詳盡的闡述，詳見(jiàn)表2.

表2 山梨醇物理性質(zhì)及用途Table 2 The physical properties and uses of sorbitol

按1.2.2方法制備注射用馬來(lái)酸桂哌齊特(80 mg/支)7批，每批8 000 mg，制備完成后于4 500 lx光照條件下放置5 d，其穩(wěn)定性結(jié)果見(jiàn)表3.表3數(shù)據(jù)顯示：在光照條件(4 500 lx)下，馬來(lái)酸桂哌齊特注射劑(80 mg/支)含量降低，雜質(zhì)增加；在馬來(lái)酸桂哌齊特注射劑中加入山梨醇后，對(duì)雜質(zhì)增加程度起到緩解作用，且隨山梨醇加入比例增加，雜質(zhì)增加程度降低.對(duì)于320 mg/支規(guī)格的馬來(lái)酸桂哌齊特注射劑，加入相同量的山梨醇后，其主藥與山梨醇的用量比要小于80 mg/支規(guī)格的注射劑，所以，向320 mg/支規(guī)格的馬來(lái)酸桂哌齊特注射劑中加入相同量的山梨醇，其穩(wěn)定性應(yīng)不低于80 mg/支規(guī)格的注射劑.

表3 山梨醇不同用量下注射用馬來(lái)酸桂哌齊特(80 mg/支)穩(wěn)定性Table 3 The sorbitol different amount bet Injection(80 mg/branch) Stability

注：光照度4 500 lx.

2.3 凍干劑與水針劑的比較

根據(jù)1.2.3的投料情況，規(guī)格為80 mg/支和規(guī)格為320 mg/支的注射用馬來(lái)酸桂哌齊特小試實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)結(jié)果分別見(jiàn)表4，表5.

從小試樣品制備及檢驗(yàn)結(jié)果可知：經(jīng)凍干工藝制備的注射用馬來(lái)酸桂哌齊特，主體含量≥99.0 %，pH在3.5～4.5，雜質(zhì)總含量≤1.0 %，符合國(guó)家藥品監(jiān)督管理局規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).

與市售馬來(lái)酸桂哌齊特注射劑(規(guī)格：2 mL，80 mg，批號(hào)2015011629，生產(chǎn)廠家：北京四環(huán)制藥有限公司)對(duì)比結(jié)果見(jiàn)表6.

表4 小試實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)結(jié)果(規(guī)格：80 mg/支)Table 4 The small scale experimental sample test results (Specifications:80 mg/support)

表5 小試實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)結(jié)果(規(guī)格：320 mg/支)Table 5 The small scale experimental sample test results (Specifications:320 mg/support)

從表6對(duì)比結(jié)果可知：自制樣品含量與市售品接近，主要雜質(zhì)馬來(lái)酸桂哌齊特順式異構(gòu)體含量不高于市售品，其他雜質(zhì)含量明顯低于市售品.

表6 實(shí)驗(yàn)樣品與市售品情況對(duì)比結(jié)果Table 6 Test samples and commercially available product comparison results case

3 結(jié) 論

(1) 在馬來(lái)酸桂哌齊特注射液中加入山梨醇后運(yùn)用凍干工藝，對(duì)馬來(lái)酸桂哌齊特注射液主要雜質(zhì)(馬來(lái)酸桂哌齊特順式異構(gòu)體)增加程度起到緩解作用，即通過(guò)加入山梨醇和運(yùn)用凍干工藝可提高馬來(lái)酸桂哌齊特注射液的穩(wěn)定性.

(2) 注射用馬來(lái)酸桂哌齊特工藝路線為：室溫下，將60 g馬來(lái)酸桂哌齊特粉末溶于900 mL注射用水中，充分?jǐn)嚢瑁挥? mol/L NaOH調(diào)節(jié)pH值為4±0.5，加水至足量，混勻；加入100 g的活性炭，在50 ℃下攪拌吸附20 min，用雙層濾紙脫碳過(guò)濾；用0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾；使馬來(lái)酸桂哌齊特為標(biāo)示量的95.0 %～105.0 %，pH值調(diào)至4±0.5；規(guī)格為80 mg/支的分裝成2 mL/支，置5 mL西林瓶中(規(guī)格為320 mg/支的分裝成10 mL，置20 mL西林瓶中)；將西林瓶放在隔板上，隔板溫度設(shè)為0 ℃；封閉干燥，隔板溫度從0 ℃降至-35 ℃，對(duì)凍干溶液進(jìn)行固化4 h ；打開(kāi)冷阱，維持18 h；將隔板溫度依次升至-5 ℃、20 ℃、40 ℃溫度水平，且隔板在3個(gè)溫度水平分別維持5 h、4 h、2 h；封蓋，避光保存.