（鎮(zhèn)江市公安局，江蘇 鎮(zhèn)江 212000）

1 案 例

1.1 簡要案情

某年12月，本地發(fā)生一起故意傷害致一死一傷案件?，F(xiàn)場(chǎng)提取附著有明顯血跡的兇器1件（圖1）、死者薛某心血、傷者張某血樣以及50余份現(xiàn)場(chǎng)血跡。據(jù)現(xiàn)場(chǎng)法醫(yī)介紹，薛某被刺中心臟，導(dǎo)致心臟破裂引起大出血死亡，張某被刺中大腿等處。為明確薛某與張某是否為同一兇器所傷，委托本鑒定所對(duì)兇器與兩個(gè)被害人之間的關(guān)系進(jìn)行鑒定。

圖1 兇器背面取樣點(diǎn)分布圖

1.2 檢驗(yàn)情況

1.2.1 初檢

兇器正反兩面均有大量明顯血跡，采用濕棉簽分別在兇器兩面各提取血跡10處，經(jīng)抗人血紅蛋白金標(biāo)試劑條法檢驗(yàn)，均呈陽性。再用聚苯乙烯二乙烯基苯樹脂法提取上述20份血樣DNA，使用AmpF?STR?Identifiler?Plus PCR擴(kuò)增試劑盒（美國Thermo Fisher Scientific公司），經(jīng)9700型PCR儀（美國AB公司）進(jìn)行PCR復(fù)合擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物應(yīng)用3130xl基因分析儀（美國AB公司）分析，結(jié)果20份血樣的基因分型均與張某血樣分型結(jié)果一致，未檢出薛某的基因分型。

薛某心血和張某血樣作為已知樣本獨(dú)立檢驗(yàn)，檢驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 薛某和張某基因分型

1.2.2 復(fù)檢

將兇器正反兩面雕刻雄鷹圖案部分各劃出前、中、后三個(gè)區(qū)域，每個(gè)區(qū)域取5個(gè)采集點(diǎn)，共取30個(gè)點(diǎn)（圖1）。采用毛坤云等[1]報(bào)道的載體法提取微量血跡，用細(xì)小的濕棉線擦取直徑1～2mm圓形區(qū)域的血樣，棉線微微發(fā)紅后放入96孔PCR板中。取樣完成后將PCR板于95℃下烘干3min，然后采用直接擴(kuò)增技術(shù)，每孔加入10 μL Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A［基點(diǎn)認(rèn)知技術(shù)（北京）有限公司］PCR反應(yīng)液（內(nèi)含PCR緩沖液4.0μL，引物混合物2.0μL，Taq聚合酶 0.16 μL，去離子水 3.84 μL），震蕩混勻，1 000×g離心1 min后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)程序：95℃5min；94℃ 30s，60℃ 1min，70℃ 1min，循環(huán) 28 次；60℃ 60min。經(jīng)3130xl基因分析儀分析，共有28個(gè)樣本檢出STR分型，其中24個(gè)樣本為張某DNA分型，4個(gè)樣本為張某和薛某的混合分型（圖2）。4個(gè)混合分型的取樣位置均處在兇器背面的12～15號(hào)采集點(diǎn)（圖1）?；旌戏中蛨D譜中等位基因峰高、面積表現(xiàn)完全符合來自張某和薛某兩人混合基因型的特點(diǎn)。

圖2 混合分型圖譜

1.3 現(xiàn)場(chǎng)勘驗(yàn)及尸體檢驗(yàn)

據(jù)現(xiàn)場(chǎng)勘驗(yàn)員介紹，案發(fā)時(shí)，兇手將薛某刺倒后追刺張某。張某在逃跑過程中，多處被刺，現(xiàn)場(chǎng)地面殘留大量滴落狀血跡。

尸體檢驗(yàn)見薛某內(nèi)衣上血跡較多，外衣表面及其倒地處地面無明顯血跡。左胸部刺創(chuàng)，心臟破裂。胸腔內(nèi)見2000mL積血。

2 討 論

結(jié)合案情分析兇器上薛某血跡極少的原因，案發(fā)時(shí)天氣寒冷，薛某衣著厚實(shí)，血液流出時(shí)受到衣物阻擋未大量噴濺。兇器在被拔出薛某身體時(shí)受到多層衣物的擦拭，損失了部分血跡。兇手追砍張某時(shí)揮動(dòng)兇器，也會(huì)造成血跡損失。兇器在多次刺入和拔出張某身體時(shí)，反復(fù)受到肌肉組織和衣物的擦拭，最終造成薛某血跡損失殆盡，或混在大量的張某血跡中。復(fù)檢結(jié)果印證了上述猜測(cè)，由于刺入深度和角度的客觀限制，處于兇器后部某一面的薛某血跡有機(jī)會(huì)殘留下來。為了避免優(yōu)勢(shì)擴(kuò)增現(xiàn)象[2]，復(fù)檢時(shí)采用了單次取樣范圍最小、模板量最少的載體法。由于載體法省去了PCR模板的純化過程，血跡中的抑制劑必然存在于擴(kuò)增體系中，因此復(fù)檢擴(kuò)增時(shí)改用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A[3]，該試劑盒具有較強(qiáng)的抗血紅素抑制能力和破碎細(xì)胞膜的功能，最終獲得了理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。本案例提示，在致傷多人兇器血跡的檢驗(yàn)鑒定中，應(yīng)充分了解案情，當(dāng)未能檢出第一受傷者的血跡時(shí)，應(yīng)側(cè)重檢驗(yàn)兇器后部，分區(qū)域、多點(diǎn)、微量提取，可較常規(guī)方法獲得更好的檢驗(yàn)效果。本案選用的檢驗(yàn)方法靈敏度極高，操作時(shí)鑒定人應(yīng)戴口罩、手套，同時(shí)保證眼科剪、眼科鑷等器材的潔凈，嚴(yán)防污染。