李曉梅 陳萌 張鐵剛 董梅 苗良 王凌云 劉維祥 楊潔 孫美平 陳麗娟 黃芳 盧莉

開展疫苗免疫成功率監(jiān)測(cè)的主要目的，是考核和評(píng)價(jià)疫苗、接種的質(zhì)量和效果，并作為調(diào)整免疫規(guī)劃的依據(jù)[1]?，F(xiàn)匯總1987-2014年北京市百白破疫苗基礎(chǔ)免疫后抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果，分析結(jié)果波動(dòng)的影響因素，提升對(duì)歷史資料的科學(xué)利用與評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1資料來源 監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)來源于1987-2014年歷次北京市百白破疫苗基礎(chǔ)免疫后血清學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果。

1.2監(jiān)測(cè)周期與采樣變化 北京市自1987年開始百白破疫苗基礎(chǔ)免疫后抗體水平監(jiān)測(cè)，每年1次，在城區(qū)、近郊區(qū)、遠(yuǎn)郊區(qū)各選擇1個(gè)區(qū)，每個(gè)區(qū)選擇嬰兒35人在完成百白破疫苗基礎(chǔ)免疫3劑次后1～2個(gè)月時(shí)，采集末梢血，分別檢測(cè)白喉和百日咳抗體水平。自1996年開始同時(shí)監(jiān)測(cè)破傷風(fēng)抗體。2003年開始每年監(jiān)測(cè)2個(gè)區(qū)，在城郊(城區(qū)和近郊區(qū))和遠(yuǎn)郊區(qū)各選擇1個(gè)區(qū)。2007年及以后改為每?jī)赡瓯O(jiān)測(cè)一次。2003年及以前血標(biāo)本采集方式為末梢血，2014年后所有標(biāo)本均采集靜脈血。

1.3檢測(cè)方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1白喉抗體： 2003年及以前，采用間接血凝法檢測(cè)凝集抗體，判斷標(biāo)準(zhǔn)為：≥0.01 IU/mL為陽性，即為保護(hù)水平。標(biāo)準(zhǔn)白喉抗毒素、致敏血球與對(duì)照血球，均由中國藥品生物制品檢定所提供。2004年及以后使用ELISA方法檢測(cè)白喉IgG抗體，判斷標(biāo)準(zhǔn)為：≥0.1 IU/mL為陽性，即為保護(hù)水平。2004年使用德國IBL公司生產(chǎn)的白喉ELISA試劑盒；2006-2014年，使用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司的ELISA classic白喉IgG試劑盒。

1.3.2百日咳抗體： 2004年及以前，采用凝集試驗(yàn)(微量法)檢測(cè)，血清抗體滴度≥1∶320則判為具有保護(hù)水平。百日咳菌液和標(biāo)準(zhǔn)血清由北京生物制品研究所和中國藥品生物制品檢定所提供。2012年及以后，使用ELISA檢測(cè)百日咳毒素IgG抗體，2012年使用德國歐盟ELISA百日咳 PT(IgG)試劑盒，判斷標(biāo)準(zhǔn)為：≥28 IU/mL為陽性，2014年使用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司生產(chǎn)的賽潤ELISA classic百日咳毒素IgG試劑盒，判斷標(biāo)準(zhǔn)為：≥30 IU/mL為陽性。

1.3.3破傷風(fēng)抗體： 2007年及以前，采用間接血凝法檢測(cè)，判斷標(biāo)準(zhǔn)為：≥0.01 IU/mL為陽性即達(dá)到保護(hù)水平。破傷風(fēng)抗毒素標(biāo)準(zhǔn)品、致敏血球和對(duì)照血球分別由中國藥品生物制品檢定所和北京生物制品研究所提供。2009年及以后，使用ELISA方法檢測(cè)破傷風(fēng)IgG抗體，使用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司生產(chǎn)的賽潤ELISA classic破傷風(fēng)IgG試劑盒，>0.1 IU/mL為陽性，即為保護(hù)水平。以上所有檢測(cè)均由北京市疾病預(yù)防控制中心完成。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 百白破疫苗基礎(chǔ)免疫后抗體水平監(jiān)測(cè)資料，進(jìn)行描述性分析。使用WPS Office 2016的WPS表格建立數(shù)據(jù)庫，計(jì)算各監(jiān)測(cè)年白喉抗體、百日咳抗體、破傷風(fēng)抗體的陽性率和平均抗體濃度。

2 結(jié)果

2.1白喉抗體水平 白喉基礎(chǔ)免疫后抗體水平監(jiān)測(cè)始于自1987年，已進(jìn)行23次(表1)，陽性率均在97%～100%。抗體濃度各次監(jiān)測(cè)波動(dòng)較大，1987-2001年抗體濃度在0.38～1.07 IU/mL，2002年以后都在1 IU/mL以上，各年抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果都高于保護(hù)水平0.1 IU/mL。

2.2百日咳抗體水平 百日咳基礎(chǔ)免疫后抗體水平監(jiān)測(cè)起自1987年，共進(jìn)行19次(表1)。陽性率波動(dòng)較大，1990年以前較低，為42.86%～77.13%，1991-2004年陽性率維持較穩(wěn)定，除1997年為76.83%以外，其余年均在84.03%以上，2012-2016年陽性率波動(dòng)更大，為8.14%～81.03%。2004年以前抗體水平以幾何平均滴度顯示，波動(dòng)在1∶144～1∶3 387；2012年以后為抗體濃度，波動(dòng)在33.18～72.60 IU/mL。

2.3破傷風(fēng)抗體水平 破傷風(fēng)基礎(chǔ)免疫后抗體水平監(jiān)測(cè)始自1996年，已進(jìn)行14次(表1)，陽性率都在98%以上。雖然抗體濃度各次監(jiān)測(cè)波動(dòng)較大，在0.49～9.98 IU/mL，各年抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果都高于保護(hù)水平0.1 IU/mL。

表1 1987-2014年北京市百白破疫苗基礎(chǔ)免疫后抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果

注：A為1991年以前使用百日咳、白喉、破傷風(fēng)混合制劑，1991年及以后使用吸附百白破聯(lián)合疫苗;B為2006年及以后使用吸附無細(xì)胞百白破疫苗；C為2003年及以前采用間接血凝法檢測(cè)凝集抗體，2004年及以后使用ELISA方法檢測(cè)白喉IgG抗體；D為2004年及以前采用凝集試驗(yàn)(微量法)檢測(cè)凝集抗體，2012年及以后使用ELISA檢測(cè)百日咳毒素IgG抗體；E為2007年及以前采用間接血凝法檢測(cè)凝集抗體，2009年及以后使用ELISA方法檢測(cè)破傷風(fēng)IgG抗體。

2.4抗體波動(dòng)影響因素 1991年以前使用百日咳、白喉、破傷風(fēng)混合制劑，1991及以后使用吸附百白破聯(lián)合疫苗，疫苗轉(zhuǎn)換后白喉、百日咳的抗體濃度和百日咳的陽性率均較前有所升高。使用ELISA檢測(cè)方法后白喉、破傷風(fēng)的抗體濃度較凝集法有升高。凝集法和ELISA方法檢測(cè)的百日咳抗體不同，不能直接比較(表2)。

表2 白喉抗體、百日咳、破傷風(fēng)抗體波動(dòng)的影響因素

3 討論

3.1從歷次白喉監(jiān)測(cè)結(jié)果看，抗體陽性率變化不大，但抗體水平波動(dòng)較大，分析影響因素有以下幾方面。首先，疫苗變化影響抗體水平，如北京市1991年使用吸附百白破疫苗，使用吸附劑可以增強(qiáng)抗原的免疫原性，因此1991年以后白喉抗體水平較20世紀(jì)80年代有所提高[2]。其次，檢測(cè)方法變化可導(dǎo)致抗體水平波動(dòng)。2003年以前的白喉抗體檢測(cè)方法采用間接血凝法，間接血凝法使用的致敏血球批次間差異較大，檢測(cè)結(jié)果由人工主觀判定,導(dǎo)致這種檢測(cè)方法的重復(fù)性和穩(wěn)定性較差，另外由于血凝法的單位與國際單位不同,其僅能反映抗體高低的變化趨勢(shì)[3]，2004年以后，北京市逐漸采用ELISA方法檢測(cè)白喉抗體。檢測(cè)方法改變導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的最大值也發(fā)生了變化，白喉抗體的最大值從>1.0 IU/mL變?yōu)?2.0 IU/mL，抗體平均水平也明顯升高。2014年檢測(cè)最大值白喉抗體為>20.0 IU/mL，其抗體平均值明顯高于既往歷年監(jiān)測(cè)結(jié)果。由此可見，在比較歷年監(jiān)測(cè)結(jié)果時(shí)，除了要考慮接種對(duì)象、疫苗變化外，還要考慮檢測(cè)方法、試劑、陽性標(biāo)準(zhǔn)的變化、檢測(cè)結(jié)果最大值和最小值的處理，這都會(huì)直接影響監(jiān)測(cè)結(jié)果的分析和利用。

3.2破傷風(fēng)抗體水平的變化與白喉相似，2007年及以前破傷風(fēng)抗體的檢測(cè)方法都采用間接血凝法，也可造成不同監(jiān)測(cè)年度之間結(jié)果波動(dòng)較大[4]。2009年后，采用ELISA方法檢測(cè)破傷風(fēng)抗體，檢測(cè)結(jié)果的最大值從>1.0 IU/mL變?yōu)?5.0 IU/mL，抗體平均水平也明顯升高。2014年檢測(cè)最大值為40.239 IU/ml，當(dāng)年的抗體平均值明顯高于既往歷年監(jiān)測(cè)結(jié)果。

3.32006年以前，北京市使用全細(xì)胞百白破疫苗，采用微量凝集試驗(yàn)檢測(cè)百日咳抗凝集原抗體(抗-AGGs)水平[5]。2006年以后，使用無細(xì)胞百白破疫苗替代全細(xì)胞百白破疫苗，我國自主研發(fā)的無細(xì)胞百日咳疫苗采用的是共同提取有效組分的共純化工藝，以百日咳毒素(PT)和絲狀血凝素(FHA)為主要有效成分[6]。由于凝集原不是主要成分，微量凝集試驗(yàn)不適用于評(píng)價(jià)接種無細(xì)胞百日咳疫苗產(chǎn)生的抗體水平，檢測(cè)方法改為ELISA方法檢測(cè)百日咳毒素的IgG抗體。2012-2014年進(jìn)行了2次監(jiān)測(cè)，百日咳抗體陽性率和抗體水平波動(dòng)較大?？紤]原因可能由于檢測(cè)試劑不同、陽性標(biāo)準(zhǔn)不同、疫苗批次間PT含量不一致等有關(guān)。2012年使用的德國歐盟ELISA百日咳 PT(IgG)試劑盒，≥28 IU/mL為陽性，而2014年使用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司生產(chǎn)的賽潤ELISA classic百日咳毒素IgG試劑盒，≥30 IU/ml為陽性,這會(huì)造成前后兩年結(jié)果的差異。我國共純化工藝生產(chǎn)的無細(xì)胞百日咳疫苗不易進(jìn)行質(zhì)量控制[6]，中國藥品生物制品檢定所曾對(duì)國內(nèi)幾家生產(chǎn)廠家送檢的無細(xì)胞百日咳疫苗原液進(jìn)行PT和FHA含量測(cè)定，結(jié)果顯示同一廠家送檢的每批原液之間PT和FHA含量不一致[7,8]，疫苗抗原含量的差異也可以造成抗體水平的差異。

綜上，在評(píng)價(jià)、利用歷史監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)時(shí)，要考慮檢測(cè)方法、試劑、檢測(cè)的目標(biāo)抗體、陽性標(biāo)準(zhǔn)、極值的處理等方面的變化對(duì)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的干擾后，再評(píng)價(jià)疫苗、接種質(zhì)量和免疫效果,而不能簡(jiǎn)單的僅由抗體水平升高值得出疫苗免疫效果提高的結(jié)論，從而提升對(duì)歷史監(jiān)測(cè)資料的科學(xué)利用與評(píng)價(jià)水平。