丁玉潔

(南通市第二人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江蘇 南通 226000)

KL-6是與肺腺癌相關(guān)的一種抗原，它是一種大分子量糖蛋白[1]。在正常的肺組織中，KL-6表達(dá)于Ⅱ型肺泡細(xì)胞、呼吸性細(xì)支氣管上皮細(xì)胞和支氣管腺漿液細(xì)胞[2]。血清KL-6能夠反映肺泡損傷、Ⅱ型肺泡細(xì)胞再生和多種間質(zhì)性肺疾病的活動度[3]。臨床研究表明KL-6高水平表達(dá)可能與肺間質(zhì)性疾病、急性損傷性肺炎、腫瘤等疾病相關(guān)聯(lián)，其作用機(jī)制可能是通過促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖和遷徙，從而影響纖維化的發(fā)生和發(fā)展[4]。本研究通過觀察血清KL-6水平在老年ILD患者中的變化，比較不同疾病KL-6水平的差異以及探索KL-6水平與肺功能的相關(guān)性，以發(fā)掘KL-6在老年間質(zhì)性肺炎的臨床診斷和療效評估中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料收集2014年9月至2015年9月在南通市第二人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科就診的108例患者的臨床資料，分為老年間質(zhì)性肺炎患者(觀察組)、其他肺病患者(對照組)以及正常體檢老年人(正常組)，進(jìn)行分組對照研究。正常組35例(男20例，女15例)，年齡(60.85±6.39)歲；對照組36例(男20例，女16例)，包括慢阻肺14例、肺炎11例、支氣管擴(kuò)張11例，年齡(61.16±6.51)歲，病程(8.93±0.97)年；觀察組37例(男21例，女16例)，年齡(60.92±6.40)歲，病程(9.12±1.19)年。 三組參與者年齡、性別、病程等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)《呼吸系統(tǒng)疾病的診療指南》[5]，結(jié)合臨床癥狀、體征、影像學(xué)、肺功能等明確診斷為老年間質(zhì)性肺炎(靜息或活動后氣促，干咳或Velcro啰音，與臨床癥狀相符的ILD影像學(xué)表現(xiàn)，肺功能檢查示限制性通氣和(或)肺換氣功能障礙，排除自由職業(yè)、環(huán)境、藥物和心功能不全引起的肺部病變)。患者年齡60～75歲；所有患者均通過專家倫理委員會審核，并簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有其他嚴(yán)重呼吸系統(tǒng)疾病的患者；合并有嚴(yán)重心腦血管病變的患者；肝腎功能不全的患者；有精神異常，不能配合研究的患者；進(jìn)行治療期間，不能配合實(shí)施研究方案的患者。

1.2方法

1.2.1治療方法 所有患者均給予抗炎、抗感染、維持電解質(zhì)平衡、化痰止咳、解痙平喘、營養(yǎng)支持等常規(guī)治療。

1.2.2指標(biāo)檢測方法 (1)KL-6的檢測：對所有參與者治療前清晨8:00空腹取靜脈血，按照常規(guī)實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)靜置分離出血清，并嚴(yán)格按照KL-6 ELISA試劑盒(Yamasa公司，日本)說明書進(jìn)行操作，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光酶免疫分析( CLEIA) 法檢測血清KL-6水平，通過LUMIPULSE G1200全自動免疫分析儀(富士瑞必歐株式會社)進(jìn)行檢測。具體操作步驟為: 將稀釋后的血清樣品或KL-6校準(zhǔn)液分注到250 μL結(jié)合有KL-6抗體的抗體結(jié)合粒子溶液中，混勻，37 ℃下孵育10 min，去反應(yīng)液，洗凈后加入250 μL堿性磷酸酶標(biāo)記抗體，37 ℃下孵育10 min，再次去除反應(yīng)液，洗凈后加入底物200 μL，混勻，37 ℃下反應(yīng)5 min，在477 nm條件下測定吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)校正曲線計(jì)算血清樣本KL-6濃度。

(2)肺功能檢測：運(yùn)用Master Screen Body 型肺功能儀(美國BIO-RAD伯樂公司)檢測患者肺功能，記錄各項(xiàng)肺功能指標(biāo)。

2 結(jié)果

2.1三組一般資料比較見表1。

表1 三組一般資料比較

2.2三組KL-6平均濃度比較各疾病組與觀察組的陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 三組參與者的KL-6的平均濃度的比較

2.3治療前后對照組與觀察組患者血清KL-6水平比較治療前，觀察組的血清KL-6水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組(P<0.05)；治療后，兩組血清KL-6水平均明顯降低(P<0.05)，且兩組血清KL-6水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表3。

表3 治療前后兩組患者血清KL-6水平對比

注：組間比較為成組t檢驗(yàn)，前后比較為配對t檢驗(yàn)

2.4ILD患者血清KL-6濃度與肺功能指標(biāo)相關(guān)性分析血清KL-6濃度與VC呈負(fù)相關(guān)，r=-0.363，P<0.05；血清KL-6濃度與FVC呈負(fù)相關(guān)，r=-0.401，P<0.05；血清KL-6濃度與DLCO呈負(fù)相關(guān)，r=-0.396，P<0.05；血清KL-6 濃度與FEV1呈正相關(guān)，r=0.362，P<0.05。血清KL-6 濃度與其他指標(biāo)的相關(guān)性并不明確。見表4，表5。

表4 觀察組患者肺功能指標(biāo)實(shí)測值

表5 ILD 患者血清 KL-6 濃度與肺功能指標(biāo)相關(guān)性分析

注：VC為肺活量，F(xiàn)VC為用力肺活量，F(xiàn)EV1為第1秒末肺活量，MVV為每分鐘最大通氣量，DLCO為一氧化碳彌散量，VA為肺泡容量

3 討論

間質(zhì)性肺炎是不同類疾病群構(gòu)成的臨床病理實(shí)體的總稱，它主要以彌漫性肺實(shí)質(zhì)、肺泡炎和間質(zhì)纖維化為基本病理改變，臨床表現(xiàn)為活動性呼吸困難，胸片可見彌漫陰影，肺功能示限制性通氣障礙、彌散功能降低和低氧血癥[6]。老年人是間質(zhì)性肺炎的易患人群，而且病情常易纏綿不愈。一項(xiàng)統(tǒng)計(jì)研究表明，本病以40～70歲人群多發(fā)，美國ILD的發(fā)病率為20/10萬～40/10萬，關(guān)于ILD報(bào)道日見增多，其發(fā)病率也日見增長[17]。間質(zhì)性肺炎通常不是惡性的[8]，但據(jù)美國疾病控制中心統(tǒng)計(jì)，因炎癥后肺纖維化死亡者，男性由48.6/10萬(1979年)上升至50.9/10萬(1991年)，女性由21.4/10萬上升至27.2/10萬。另外，本病繼發(fā)感染時可有黏液膿痰，伴消瘦、乏力、食欲減退、四肢關(guān)節(jié)疼痛等全身癥狀，急性期可伴發(fā)熱[9]。

間質(zhì)性肺炎是發(fā)生在肺間質(zhì)組織的炎癥反應(yīng)，主要侵犯支氣管壁、肺泡壁，特別是支氣管周圍血管、周圍小葉間和肺泡間隔的結(jié)締組織，并且多呈壞死性的病變[10]。其致病因素有吸入粉塵、藥物、微生物感染和吸入氣體，但大部分感染是由包括腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒等在內(nèi)的病毒所致，其中尤以感染腺病毒和流感病毒較為多見，病情也比較嚴(yán)重，常易引起壞死性支氣管炎及支氣管肺炎，且病程遷延易演變?yōu)槁苑窝譡11]。間質(zhì)性肺炎的診斷主要通過病史、血液檢查、光學(xué)輔助檢查、以及肺功能檢查和肺活檢等來確診。治療方案則是以大劑量糖皮質(zhì)激素及機(jī)械通氣支持治療為主[12]。

Kohno在1987年發(fā)現(xiàn)KL-6是一種能夠識別唾液酸化的糖鏈的抗體，深入研究發(fā)現(xiàn)KL-6為一種高分子黏液素樣糖蛋白，主要表達(dá)于Ⅱ型肺泡細(xì)胞和支氣管上皮細(xì)胞[13]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，在血清和肺泡灌洗液中，細(xì)胞損傷或再生時，KL-6顯著升高，故推測血清KL-6水平是反映肺損傷的一個重要指標(biāo)。有研究發(fā)現(xiàn)，多種肺部疾病均會出現(xiàn)血清KL-6水平增高，但KL-6與肺間質(zhì)病變的相關(guān)性最高[14]。血清KL-6可在不同類型的ILD上表達(dá)，這為間質(zhì)性肺疾病的診斷、活動性評估、以及對預(yù)后的判斷提供了新的思路[15]。與傳統(tǒng)的放射X線、HRCT、肺功能等檢查相比較，它具有定量檢測、可重復(fù)測量、非損傷性、簡單易行等特點(diǎn)，在臨床診斷、治療間質(zhì)性肺疾病過程中有一定的優(yōu)勢。

本次研究發(fā)現(xiàn)，治療前正常組、對照組的KL-6平均水平及陽性率檢出率均明顯低于間質(zhì)性肺炎組(P<0.05)，說明KL-6在老年間質(zhì)性肺炎中具有較高的表達(dá)性，對間質(zhì)性肺炎的診斷提供了有力的證據(jù)。治療后，對照組與觀察組血清KL-6水平均明顯降低(P<0.05)，且兩組血清KL-6水平差異不明顯，接近正常組的平均水平(P>0.05)。說明抗炎、抗感染治療有效。血清KL-6濃度與VC、FVC、DLCO呈負(fù)相關(guān)，與FEV1呈正相關(guān)(P<0.05)，說明KL-6對于老年間質(zhì)性肺炎的診斷以及預(yù)后評估具有較為準(zhǔn)確的效果，這與姚莉和尤青海[16]的研究結(jié)果一致，她們發(fā)現(xiàn)當(dāng)自身免疫性疾病合并有ILD時，KL-6非常具有應(yīng)用價(jià)值。例如：系統(tǒng)性硬皮病合并ILD時，血清KL-6水平較單純系統(tǒng)性硬皮病患者顯著增加。

本實(shí)驗(yàn)通過對37例老年間質(zhì)性肺炎患者進(jìn)行研究分析，表明KL-6在老年間質(zhì)性肺炎中表達(dá)較高，且與患者的肺功能有較高的相關(guān)性，可作為老年間質(zhì)性肺炎的診斷以及康復(fù)評價(jià)指標(biāo)。