馬春梅,王　娟

(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生物工程系，江蘇 徐州　221006)

腦寧膠囊源于治療血管性頭疼的臨床驗方腦寧湯，由赤芍，川芎，水蛭，白芷，藁本，紅花，細(xì)辛，白附子八味中藥組成，具有活血化瘀、通絡(luò)止痛的功效[1]。本試驗在前期對各藥材提取工藝的研究基礎(chǔ)上，以堆積密度、休止角、臨界相對濕度為考察指標(biāo)，并根據(jù)《中國藥典》(2015版)[2]有關(guān)膠囊劑的各項要求，研究了腦寧膠囊的最佳制備工藝 。

1　儀器與試藥

1.1　儀器

FA20413分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，WF111710-849萬能粉碎機(jī)(江陰市萬通藥化機(jī)械設(shè)備有限公司)，DZF-6120恒溫干燥箱(中新醫(yī)療器械有限公司)，KQ-2500超聲清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司)，RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)。

1.2　試藥

乙醇(色譜純，北京化工廠)，β-環(huán)糊精(上海萬疆生物技術(shù)有限公司，批號為150503)，水為自制的純化水，其他試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1　半成品的制備

按處方規(guī)定用量稱取藥材細(xì)辛、赤芍、紅花、水蛭、白附子、川芎、藁本、白芷，將細(xì)辛和川芎經(jīng)超聲輔助水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油[3]，混合并用β-環(huán)糊精包合成包合物[4]，將藁本、白芷兩味藥材按照已優(yōu)化的工藝乙醇回流提取、將赤芍君藥用醇單獨提取[5]、紅花、水蛭、白附子三味藥材以水提工藝提取，將提取得到的浸膏混合干燥成浸膏粉末，加入混合揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包合物，干燥后制成腦寧膠囊半成品。

2.2　堆積密度的檢查

取半成品粉末約15g，填充于20mL的量筒中，將裝有藥粉的量筒放于平整的桌面上輕輕振動，讀取藥粉的體積，準(zhǔn)確稱取藥粉的質(zhì)量，藥粉的質(zhì)量和體積的比值即為該半成品的堆積密度，結(jié)果見表1。

表1　半成品粉堆積密度的測定結(jié)果

2.3　填充物流動性的測定

在膠囊的灌裝過程中，為了滿足膠囊分裝劑量的準(zhǔn)確均一，所填充物料必須具有良好的流動性。本研究按照藥典的規(guī)定中通過測定粉末的休止角的方法來考察所填充物料的流動性。本試驗采用三聯(lián)漏斗法測定藥粉流動性[6]，取3只漏斗串聯(lián)固定，使得漏斗距水平放置的坐標(biāo)紙1.5cm，將待測定的半成品藥物粉末沿頂端的漏斗內(nèi)壁慢慢倒入，坐標(biāo)紙上半成品藥物粉末圓錐體尖端接觸到漏斗的下口即停止倒入，借助坐標(biāo)紙測定圓錐底部的直徑，計算出休止角的值(tgA=2H/R)，平行測定三次，結(jié)果見表2。

表2　 腦寧膠囊填充物料休止角a(n=3)

測定結(jié)果表明：腦寧膠囊半成品的粉末的休止角均小于40°，流動性較為良好，能夠滿足膠囊劑的生產(chǎn)要求。

2.4　臨界相對濕度測定

藥物生產(chǎn)封裝過程中環(huán)境因素會直接影響藥品的質(zhì)量，在生產(chǎn)過程中相對濕度是主要的影響因素，本研究采對藥物粉末通過平衡吸濕性試驗，繪制吸濕平衡曲線，得到藥物粉末的臨界相對濕度，具體操作步驟如下：(1)取腦寧膠囊的填充物料粉末六份，每份約2g，分別置于已干燥恒重的稱量瓶中，精密稱定；(2)將稱量瓶在開蓋狀態(tài)下，分別置于底部盛有六種飽和溶液的玻璃干燥器，于不同濕度的干燥器中在25℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)放置24h；(3)取出稱量瓶加蓋精密稱定，計算藥物吸濕百分率；(4)吸濕百分率則為縱坐標(biāo)，相對濕度作為橫坐標(biāo)，繪制曲線，分析得到藥物的臨界濕度值，進(jìn)而確定分裝條件。試驗結(jié)果見表3，圖1。

表3　腦寧膠囊填充物的吸濕百分率

實驗結(jié)果表明腦寧膠囊的藥物粉末的臨界相對濕度是62.0%，腦寧膠囊填充藥物粉末在不同的相對濕度條件下，其濕度量變化明顯，故腦寧膠囊在制備過程時環(huán)境的相對濕度均應(yīng)控制在62.0%以下，腦寧膠囊的貯藏要密閉和防潮。

圖1　平衡吸濕曲線圖

2.5　最佳制備工藝

按處方量取八味中藥，稱取適量細(xì)辛和川芎飲片,釆用優(yōu)化得到的揮發(fā)油最佳提取工藝條件,即加6.5倍量水浸泡75min,蒸餾提取5.5h,連接揮發(fā)油測定裝置,采用水蒸氣蒸餾法依法提取[1]。混合揮發(fā)油在β-環(huán)糊精和揮發(fā)油用量比值為5∶1，包合溫度為45℃，超聲時間54min的條件下制成包合物后，在冰箱中放置12h待冷卻后，抽濾，加入少量乙醇后，在40℃的恒溫干燥箱中放置干燥1h[4]。處方中的赤芍采用醇提工藝提取[5]，加入其重量8倍量的乙醇，用90%的乙醇提取2次，每次提取90min，醇提液為記為醇提液a和藥渣a。 將藁本和白芷兩種藥材用8倍量的80%的乙醇浸泡1h后，回流提取3次，每次提取90min[3]，得到醇提取液b和藥渣b。紅花、水蛭和白附子三味藥材加入藥渣a和藥渣b，加其重量10倍的水浸泡1.5h后，回流提取3次，每次提取90min，得水提液。將水提液濃縮為在60℃下相對密度為1.15的浸膏，醇提液回收乙醇后，濃縮為相對密度為在60℃相對密度為1.08 的浸膏，將水提浸膏和醇提浸膏合并，加入10%的糊精攪拌均勻后，在75℃下干燥72h，并粉碎后過60目篩，加入混合揮發(fā)油的包合物混合均勻后，裝入膠囊。

2.6　日服劑量的確定及囊殼的選擇[7]

本方每粒相當(dāng)于原生藥材2.875g，按照最佳提取工藝制得浸膏粉末及混合揮發(fā)油的包合物藥粉為0.485g，每次服用4粒相當(dāng)于原生藥材11.5g,如果每天服用三次，相當(dāng)于服用34.5g的原生藥材，已知該粉末的堆積密度為0.65g/mL，0號膠囊的容積可達(dá)到約0.89 g/mL，可裝的容量為0.75×0.65=0.4875>0.485g,經(jīng)過驗證可以選用0號膠囊，每粒裝入內(nèi)容物0.49g。

2.7　放大試驗及一般雜質(zhì)檢查

按照研究優(yōu)選的工藝條件在學(xué)校藥物制劑實訓(xùn)車間連續(xù)生產(chǎn)數(shù)批藥品，對實驗優(yōu)選的制備工藝進(jìn)行放大試驗考察，隨機(jī)抽取其中三批進(jìn)行質(zhì)量檢測并對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行了分析結(jié)果見表4和表5。

表4　三批放大試驗數(shù)據(jù)

由放大試驗的結(jié)果分析可知，本品的擬定的制備工藝路線基本穩(wěn)定，具有可行性，具備了生產(chǎn)的基本條件。

表5　樣品的一般質(zhì)量檢查結(jié)果

通過放大實驗及隨機(jī)抽取的三批產(chǎn)品的質(zhì)量檢測數(shù)據(jù)可知，本試驗優(yōu)選的腦寧膠囊的制備工藝合理、可行。所生產(chǎn)的藥品質(zhì)量均符合膠囊劑的制劑通則各項指標(biāo)要求。

3　結(jié)論

3.1　制備工藝研究

在制備工藝的研究中依據(jù)藥物的特性及有效成分的溶解性能，對組方中的八味藥材的提取分為揮發(fā)油提取、醇提、水提三個步驟，相比較湯劑做到了去粗存精，減少了中藥資源的浪費(fèi)。將水提液濃縮為在60℃下相對密度為1.15的浸膏，醇提液回收乙醇后，濃縮為相對密度為在60℃相對密度為1.08的浸膏，將水提浸膏和醇提浸膏合并，加入10%的糊精攪拌均勻后，在75℃下干燥72h，并粉碎后過60目篩，加入混合揮發(fā)油的包合物。在該工藝下，川芎和細(xì)辛揮發(fā)油采用包合技術(shù)加入，浸膏粉加入糊精直接填充膠囊減少了制粒過程中原料的損耗，該工藝操作簡單、保證了藥物的穩(wěn)定性，可用于該制劑的實際生產(chǎn)。

3.2　中試試驗

為了給中試實驗提供理論依據(jù)，在此基礎(chǔ)上確定了腦寧膠囊半成品的制備工藝，并對腦寧膠囊的半成品的成型工藝進(jìn)行了初步的研究，測定了該半成品的堆積密度、物料的流動性以及物料的吸濕性，為最佳制備工藝的確立及日服劑量的選擇提供了理論依據(jù)，結(jié)果均符合制劑上產(chǎn)的要求。

3.3　放大實驗

通過放大實驗的驗證，檢查了該制劑的水分、質(zhì)量差異、崩解時限、微生物限度檢查和指標(biāo)性成分芍藥苷的含量測定對該工藝的可行性和合理性進(jìn)一步的驗證。