●楊曉光 張 桓（吉林市林業(yè)科學研究院 吉林 吉林 132013）

風箱果（Physocarpus amurensis）別名托盤幌，原產(chǎn)于黑龍江及俄羅斯遠東地區(qū)，屬薔薇科灌木，其花色秀美，為優(yōu)良的綠化樹種。為保護和開發(fā)利用風箱果種質(zhì)資源，并保持優(yōu)良個體遺傳性狀，筆者對其進行組織培養(yǎng)和離體快繁技術(shù)研究，為探索其發(fā)育規(guī)律性與開發(fā)利用起到促進作用。

1 材料與方法

1.1 試驗材料采集與預處理

2015年12月于吉林市北華大學校內(nèi)采集多年生健壯風箱果樹的休眠枝條用于試驗。材料取回后，用水洗凈，將枝條剪成70cm左右的長度，放入塑料桶內(nèi)水培。

1.2 外植體的滅菌

枝條萌發(fā)后，選取飽滿的腋芽，放入小燒杯中，蓋上紗布，用自來水反復沖洗至干凈為止。在超凈工作臺上先用0.1%的升汞溶液中浸泡10分鐘，取出后用無菌水反復沖洗6～8次。

1.3 培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件

以最常用的MS或WPM為基本培養(yǎng)基，附加外源激素BA（0.1～0.5mg/L）與NAA（0.1～0.5mg/L）。培養(yǎng)溫度25±5℃、濕度60%～70%、光照強度2000～2500lx。

1.4 誘導培養(yǎng)

將滅菌處理過的腋芽接種到設(shè)計好的誘導培養(yǎng)基上，及時觀察。

1.5 增殖與繼代培養(yǎng)

將誘導產(chǎn)生的愈傷組織轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，此時應特別注意叢生芽產(chǎn)生時間的長短與數(shù)量。

1.6 生根培養(yǎng)

當分化苗長到 4～5cm高時轉(zhuǎn)入到不同配比的生長培養(yǎng)基內(nèi)誘導生根，每瓶置8～10株，注意觀察生根情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 初代培養(yǎng)誘導愈傷組織情況

由于實驗操作方法的不完善，起初的污染率達50%以上，改善后污染基本能控制在10%左右。培養(yǎng)至第8天開始看到冬芽形態(tài)上有明顯的變化，發(fā)生變形。2周后出現(xiàn)顆粒狀的結(jié)構(gòu)。20天后，愈傷組織已明顯可見，可轉(zhuǎn)為繼代增殖培養(yǎng)。據(jù)統(tǒng)計，在WPM+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基上產(chǎn)生愈傷組織數(shù)最多，誘導率高達85%，平均誘導率達55.8%，具體情況見表1。

2.2 繼代增殖培養(yǎng)情況

將生長健壯的愈傷組織進行分割，每種處理接種20塊，培養(yǎng)20天后調(diào)查不定芽的分化情況，見表2。

表1 不同培養(yǎng)基對外植體誘導率情況

表2 不同激素配比對風箱果愈傷組織誘導不定芽的影響

在后3種培養(yǎng)基中，愈傷組織都有較高的增殖率，但在BA為0.5mg/L培養(yǎng)基中，生長較弱；而在BA為0.3mg/L的培養(yǎng)基中，長勢較強，所以愈傷組織的增殖選擇BA為0.3mg/L的兩種培養(yǎng)基，兩者的差異不顯著。

2.3 分化苗誘導生根培養(yǎng)情況

當分化苗長到4～5cm、具有5～7片葉時，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基內(nèi)誘導生根，每瓶置8～10株小苗，20天后小苗基部可分化出4cm左右的根。通過添加兩種濃度的NAA和IAA生長素的生根比較試驗，結(jié)果以添加NAA0.2mg/L的生根效果為最佳，見表3。

表3 兩種生長素和濃度對分化苗誘導生根的結(jié)果

3 煉苗與移栽

將已生根的試管苗置于溫室中，待條件適應后，逐漸揭去瓶蓋，煉苗3～5天，然后將苗取出用清水

4 小結(jié)與討論

通過試驗研究，掌握了風箱果的冬芽誘導愈傷組織、愈傷組織增殖及分化、分化苗生根等不同階段的生長特性，探索出各階段較為理想的培養(yǎng)基配方。

4.1 在不同激素配比對風箱果外殖體誘導影響的試驗中，以WPM+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L的培養(yǎng)基對外殖體誘導率最高，達85%。洗去根部培養(yǎng)基，洗凈后移栽到已用0.1%的高錳酸鉀溶液消毒后的珍珠巖基質(zhì)中，并適時澆營養(yǎng)液，澆水要少量多次。

4.2 在相同的基本培養(yǎng)基條件下，風箱果芽增殖的最佳培養(yǎng)基為WPM+BA0.3mg/L+NAA0.1mg/L，增殖率高達712%。

4.3 試驗結(jié)果證實，WPM+BA 0.3mg/L+NAA 0.2mg/L培養(yǎng)基為風箱果適宜的生根培養(yǎng)基，平均生根數(shù)達6.8個，且根系生長健壯。