羅素紅

湖北省英山縣人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，湖北英山 438700

病毒性心肌炎是由親心肌病毒引發(fā)的原發(fā)性心肌炎癥，多數(shù)患者經(jīng)及時(shí)治療后可治愈，但也有部分患者可進(jìn)展至慢性病毒性心肌炎甚至擴(kuò)張型心肌病[1]。研究認(rèn)為，病毒性心肌炎的發(fā)病機(jī)制包括病毒持續(xù)感染、免疫應(yīng)答、遺傳背景、氧化應(yīng)激等[2]。輔助性T細(xì)胞是介導(dǎo)免疫應(yīng)答的主要效應(yīng)細(xì)胞，已有研究發(fā)現(xiàn)，Th1/Th2失衡參與了心肌損傷的發(fā)生發(fā)展過程[3]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，作為一種不同于Th1、Th2的新型Th細(xì)胞，Th17與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病的發(fā)生密切相關(guān)[4]。此次研究即觀察Th17細(xì)胞變化對(duì)病毒性心肌炎病程進(jìn)展的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在征得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后，于2015年3月至2017年9月，選取符合1999年全國(guó)心肌炎心肌病會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]的173例病毒性心肌炎患者，納入病毒性心肌炎組，并選取同期50例擴(kuò)張型心肌病患者、50名健康體檢者，分別納入擴(kuò)心病組、健康對(duì)照組；受試者均自愿參與此次研究并簽署知情同意書。3組均排除合并感染性疾病者以及其他自身免疫性疾病者。3組受試者性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測(cè)方案

抽取受試者入組次日外周靜脈血6 mL，取標(biāo)本3 mL，使用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，以Partec CyFlow Cube流式細(xì)胞儀（德國(guó)Partec公司）對(duì)其外周血Th17、Treg細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)值以Th17/CD4+T、Treg/CD4+T表示；取剩余3 mL標(biāo)本，使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法），對(duì)其血清白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-17、IL-21以及抗心肌抗體（AHA）進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒均購(gòu)自美國(guó)R&D公司，其中，AHA檢測(cè)結(jié)果以陽(yáng)性率計(jì)，在健康對(duì)照組血清為陰性對(duì)照下，酶標(biāo)儀450 nm處光密度值與陰性對(duì)照標(biāo)本光密度值≥21即判定為陽(yáng)性[6]。

1.3 分析方法

按照病毒性心肌炎組患者病程，將其分別納入急性期組、遷延及慢性期組、恢復(fù)期組，分組標(biāo)準(zhǔn)[7]：急性期組：病程＜6個(gè)月，臨床癥狀及檢查結(jié)果明顯陽(yáng)性；遷延及慢性期組：病程＞1年，臨床癥狀及檢查結(jié)果遷延不愈或反復(fù)變化；恢復(fù)期組：病程≥6個(gè)月，臨床癥狀及檢查結(jié)果明顯好轉(zhuǎn)但暫未達(dá)到治愈標(biāo)準(zhǔn)。比較病毒性心肌炎組、擴(kuò)心病組、健康對(duì)照組以及不同病程病毒性心肌炎患者檢測(cè)指標(biāo)差異，采用SPSS 19.0軟件分析，運(yùn)用Pearson法，計(jì)算外周血Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞表達(dá)水平的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 3組受試者血清及外周血指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

病毒性心肌炎組血清IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21濃度均高于擴(kuò)心病組、健康對(duì)照組，其外周血Th17/CD4+T、Treg/CD4+T、Th17/Treg亦高于其余2組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），擴(kuò)心病組、健康對(duì)照組血清及外周血指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

病毒性心肌炎組AHA陽(yáng)性率為92.49%（160/173），高于擴(kuò)心病組的54.00%（27/50），健康對(duì)照組AHA均為陰性，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 3組患者血清及外周血指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較（x±s）

2.2 不同病程病毒性心肌炎患者血清及外周血指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

遷延及慢性期組血清IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21濃度均高于急性期，其外周血Th17/CD4+T、Treg/CD4+T、Th17/Treg亦高于后者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），急性期組上述血清及外周血指標(biāo)均高于恢復(fù)期組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

遷延及慢性期組AHA陽(yáng)性率為98.92%（92/93），高于急性期組的90.24%（37/41），急性期組AHA陽(yáng)性率亦高于恢復(fù)期組的79.49%（31/39），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。

表2 不同病程病毒性心肌炎患者血清及外周血指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較（x±s）

2.3 相關(guān)性分析

病毒性心肌炎患者Th17/CD4+T與Treg/CD4+T呈正相關(guān)（r=0.571，P＜0.05）。

3 討論

近10年來，病毒性心肌炎發(fā)病率較以往上升了10倍以上，約有15%的患者進(jìn)展至擴(kuò)張型心肌病[8]。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，病毒感染后病毒在心肌細(xì)胞內(nèi)大量復(fù)制所致?lián)p傷，以及病毒感染引發(fā)的自身免疫反應(yīng)介導(dǎo)的損傷，是引發(fā)心肌損害的主要原因[9]。而在自身免疫反應(yīng)中，已有許多研究發(fā)現(xiàn)Th17及其相應(yīng)細(xì)胞因子IL-17與病毒性心肌炎的發(fā)生發(fā)展有所關(guān)聯(lián)[10]。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Th17與自身免疫性心肌炎的發(fā)生發(fā)展具有相關(guān)性，其機(jī)制可能與Th17釋放IL-17促炎因子與其受體結(jié)合，進(jìn)而激活相關(guān)信號(hào)分子并促使趨化因子及其他炎癥因子釋放有關(guān)，在正常狀態(tài)下，上述過程可擴(kuò)大炎癥反應(yīng)并發(fā)揮清除病毒效果，但過量IL-17的產(chǎn)生反而會(huì)產(chǎn)生免疫病理?yè)p傷[11-12]。為了解Th17對(duì)病毒性心肌炎發(fā)生發(fā)展的影響，此次研究進(jìn)行了對(duì)照分析，結(jié)果顯示，病毒性心肌炎患者Th17細(xì)胞、IL-17均顯著高于其余2組，說明Th17主要通過促進(jìn)炎癥反應(yīng)進(jìn)展引發(fā)心肌損傷，且合并病毒感染時(shí)，機(jī)體炎癥反應(yīng)更為明顯，Th17細(xì)胞水平亦更高。

Treg細(xì)胞包括天然型調(diào)節(jié)T細(xì)胞與誘導(dǎo)型調(diào)節(jié)T細(xì)胞，前者主要在胸腺分化，并通過識(shí)別主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ提供自身肽與自身抗原反應(yīng)[13-14]，而誘導(dǎo)型調(diào)節(jié)T細(xì)胞對(duì)自身與外來抗原均可產(chǎn)生應(yīng)答，故有著無反應(yīng)性和免疫抑制性兩大功能特征。為抑制Th17細(xì)胞對(duì)心肌的損傷作用，機(jī)體也存在Treg細(xì)胞的免疫應(yīng)答[15]，故本研究結(jié)果可見，病毒性心肌炎患者Treg細(xì)胞水平亦高于其他兩組，且相關(guān)性分析亦印證了Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞水平的正相關(guān)性。

通過組間對(duì)比，可以發(fā)現(xiàn)，病毒性心肌炎患者存在Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞失衡狀態(tài)，且不同病程階段，細(xì)胞失衡狀態(tài)存在一定差別。急性期病毒性心肌炎Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞及各類炎癥因子水平均最高，說明此時(shí)病毒在心肌損傷的發(fā)生發(fā)展中起到最為重要的作用[16-17]，行免疫抑制治療可能取得理想效果[18]。對(duì)于病情得到控制且進(jìn)入恢復(fù)期的患者，其Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞與健康者無異，說明Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞平衡的恢復(fù)伴隨著患者臨床癥狀的改善，再一次印證了Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞與心肌損傷的密切關(guān)聯(lián)。

總之，病毒性心肌炎患者外周血中Th17細(xì)胞水平明顯升高，Th17的促炎作用所致自身免疫反應(yīng)是引發(fā)心肌損傷、導(dǎo)致病毒性心肌炎發(fā)生與發(fā)展的重要機(jī)制。

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