呂梁市臨縣城莊畜牧獸醫(yī)站 033200

2010年以來(lái)，仔豬流行性腹瀉在全國(guó)范圍內(nèi)爆發(fā)，給生豬養(yǎng)殖戶造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。調(diào)查研究顯示，豬流行性腹瀉（PED）具有發(fā)病急、傳播快、發(fā)病率與死亡率高、波及面廣等特點(diǎn)[1]。對(duì)其的治療也處于摸索階段。因此，制定一種切實(shí)可行的預(yù)防治療措施迫在眉睫。本試驗(yàn)主要制備一種高免卵黃抗體，并研究其在預(yù)防和治療上的效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料、儀器及試驗(yàn)對(duì)象

（1）試驗(yàn)材料。發(fā)病仔豬的腸道病料，瓊脂粉，PED陽(yáng)性血清。

（2）試驗(yàn)儀器。高速勻漿機(jī)，江蘇天翎儀器有限公司；干烤箱，上海和呈儀器制造有限公司；高壓鍋，長(zhǎng)沙明杰儀器有限公司；溫箱，深圳市廣邁儀器設(shè)備有限公司；玻璃瓶、離心機(jī)、梅花打孔器、移液器等。

（3）試驗(yàn)試劑。甲醛等。

（4）試驗(yàn)對(duì)象。昆明鼠，120日齡待開產(chǎn)蛋雞，仔豬。

2 試驗(yàn)方法

（1）高免卵黃抗體的制備。抗豬流行性腹瀉病毒高免卵黃抗體按照如下方法進(jìn)行制備[2-3]。制備免疫抗原。選擇2～3日齡感染發(fā)病的產(chǎn)房仔豬，無(wú)菌采集其腸道并進(jìn)行處理。處理后留取一部分未滅活組織液，冷凍保存，供攻毒試驗(yàn)使用。制備卵黃抗體。給雞胸肌注射制備的PEDV組織滅火苗，并按規(guī)定進(jìn)行首免、二免、三免及四免，首免后每周收集雞蛋，分離卵黃。制備治療用卵黃抗體。取抗體效價(jià)＞64的高免蛋，無(wú)菌去除蛋清、分離蛋黃，并加入生理鹽水，攪拌分裝。

（2）仔豬的攻毒試驗(yàn)。每頭豬口服0.2mL免疫抗原，觀察攻毒后的腹瀉情況。

（3）高免卵黃抗體臨床預(yù)防試驗(yàn)。對(duì)吃初乳的40頭仔豬進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，將其分成4組，分別為對(duì)照組（不采取任何措施），抗生素、干擾素治療組，卵黃抗體治療組及卵黃抗體提前預(yù)防后攻毒組。每組10頭，觀察卵黃抗體實(shí)驗(yàn)室攻毒保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果。

（4）高免卵黃抗體臨床治療試驗(yàn)。對(duì)不同日齡的50頭豬進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，獎(jiǎng)其分成5組，分別為1日齡組、10日齡組、20日齡組、30日齡組及40日齡組，并對(duì)其進(jìn)行卵黃抗體攻毒治療試驗(yàn)，觀察卵黃抗體實(shí)驗(yàn)室攻毒治療試驗(yàn)結(jié)果。

3 試驗(yàn)結(jié)果

（1）卵黃抗體人工感染的預(yù)防和治療試驗(yàn)。仔豬攻毒保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 仔豬攻毒保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果

由表1可以看出，4組仔豬進(jìn)行攻毒保護(hù)試驗(yàn)后，除卵黃抗體預(yù)防組有9頭未發(fā)病外，其余所有仔豬全部發(fā)病。其中，對(duì)照組10頭仔豬全部發(fā)病并死亡，保治愈率為0%；抗生素、干擾素治療組發(fā)病10頭，死亡8頭，保治愈率為20%；卵黃抗體治療組仔豬發(fā)病10頭，死亡7頭，保治愈率為30%；卵黃抗體預(yù)防組仔豬發(fā)病1頭，死亡1頭，保治愈率為90%。

（2）不同日齡攻毒組卵黃抗體治療試驗(yàn)。不同日齡攻毒組卵黃抗體治療試驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 不同日齡攻毒組卵黃抗體治療試驗(yàn)

由表2可以看出，5組豬進(jìn)行攻毒治療試驗(yàn)后，所有豬全部發(fā)病。其中，1日齡、10日齡、20日齡、30日齡、40日齡豬死亡數(shù)分別為8頭、5頭、3頭、1頭和0頭，治愈率分別為20%、50%、70%、90%和100%。

3 討論

該病發(fā)病急，流行范圍廣，發(fā)病率和死亡率高。各個(gè)季節(jié)均有發(fā)生，但秋冬季多發(fā)。主要通過(guò)糞便和乳汁傳播。各種日齡的豬均有發(fā)生，其中哺乳仔豬發(fā)病最為嚴(yán)重。胃-流-輪三聯(lián)弱毒疫苗均未起到保護(hù)作用，抗生素等無(wú)法控制該病。因此，對(duì)該病的預(yù)防及治療措施需進(jìn)一步研究與討論。

本試驗(yàn)利用本次發(fā)病仔豬的腸道，制備抗PEDV的特異性高免卵黃抗體。結(jié)果顯示，卵黃抗體對(duì)初生仔豬的預(yù)防保護(hù)率較高，達(dá)90%。但是，卵黃抗體對(duì)不同日齡豬的治愈效果相差較大，對(duì)1日齡發(fā)病仔豬的治療效果不明顯，隨著日齡的增大，治愈效果不斷增強(qiáng)，治愈率也逐漸增高。所以，對(duì)初生仔豬進(jìn)行高免卵黃抗體注射可以有效地預(yù)防豬流行性腹瀉的發(fā)生，對(duì)大日齡（尤其是40日齡）流行性腹瀉感染豬施以高免卵黃抗體治療，能收到較好的治療效果。高免卵黃抗體可以在各大養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行實(shí)踐性應(yīng)用與臨床應(yīng)用。

[1]張坤,何啟蓋.豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬A群輪狀病毒多重RT-PCR檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2010(08).

[2]劉文娟,吳健敏,陸芹章,等.抗豬病毒性腹瀉卵黃抗體的研制及純化[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2010(19).

[3]程志燕.抗豬流行性腹瀉病毒卵黃抗體治療效果研究[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2017(22).