張慶洪 馮宇峰 張麗娟

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院麻醉科，福建 廈門 361003)

創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD)核心癥狀包括創(chuàng)傷性再體驗(yàn)、回避與警覺性增高等〔1〕。經(jīng)歷過創(chuàng)傷事件的人群有5%～15%發(fā)展為 PTSD，手術(shù)患者PTSD的發(fā)生率高達(dá)71%〔2〕。如何預(yù)防及降低手術(shù)患者PTSD一直是臨床探討的話題。右美托咪定是臨床常用的麻醉藥物，具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗焦慮作用，還可減少術(shù)后躁動(dòng)。右美托咪定可以通過減輕術(shù)中疼痛程度來降低PTSD的發(fā)生〔3〕。本研究通過建立PTSD動(dòng)物模型的方法，觀察右美托咪定對(duì)創(chuàng)傷應(yīng)激障礙大鼠疼痛行為及認(rèn)知功能的影響。

1 材料與方法

1.1動(dòng)物選擇及分組 雄性SD大鼠32只，購自廈門大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心(許可證號(hào)20160215)，8～10周齡，體重250～350 g，本研究報(bào)請(qǐng)醫(yī)院動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。隨機(jī)分為對(duì)照組、PTSD組、20 μg右美托咪定組、40 μg右美托咪定組各8只。對(duì)照組、PTSD組按1 ml/kg腹腔注射生理鹽水，20 μg右美托咪組、40 μg右美托咪定組分別按20 μg/kg和40 μg/kg腹腔給予右美托咪定。生理鹽水和右美托咪定在PTSD模型建立后立即給予，連續(xù)用藥3 d。

1.2PTSD模型建立 應(yīng)用條件性恐懼實(shí)驗(yàn)分析系統(tǒng)建立PTSD模型，通過聲音、環(huán)境、電刺激來促使大鼠產(chǎn)生恐懼記憶，使條件性刺激控制恐懼反應(yīng)，并通過僵直行為來檢測(cè)評(píng)定動(dòng)物恐懼記憶是否形成及其嚴(yán)重程度〔4〕。對(duì)照組于第0、1、3天僅給予聲音刺激，PTSD組、右美托咪定組于第0、1、3天將大鼠放入斯金納箱(30 cm×26 cm×22 cm)中，適應(yīng)5 min后給予30 s、5 kHz、75 db的聲音刺激，隨后在15 min內(nèi)給予5次2 mA、2 s的電刺激，并在第7、14、21天將大鼠再次暴露于相同的環(huán)境中。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1疼痛行為 分別于干預(yù)前、干預(yù)后1、3、7、14 d測(cè)定各組大鼠熱痛閾、機(jī)械痛閾值。熱縮足反射潛伏期(TWL)：采用PL-200測(cè)痛儀，以Hargreaves 法記錄，將裝有大鼠的有機(jī)玻璃箱至于6 mm的玻璃板下，適應(yīng)10 min后，用可移動(dòng)光束、40%點(diǎn)光強(qiáng)度刺激照射足底中部，從照射開始至大鼠出現(xiàn)抬腿、舔足的時(shí)間為TWL。每只大鼠測(cè)定3次，間隔5 min，取其平均值。機(jī)械性縮足反射閾值(MWT)：采用von Frey儀器測(cè)定機(jī)械痛，用單纖維絲探針在大鼠后爪趾面給予連續(xù)增加的壓力，大鼠出現(xiàn)抬足或舔足行為時(shí)測(cè)痛儀上顯示的數(shù)值為MWT，每只動(dòng)物測(cè)定3次，每次刺激間隔5 min，取其平均值。

1.3.2認(rèn)知功能 第27天進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)，評(píng)估大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。水迷宮實(shí)驗(yàn)在120 cm長(zhǎng)、50 cm高的圓形水池中進(jìn)行。將水池分為4個(gè)象限，在左上象限中放置直徑為10 cm、位于水面下1 cm的平臺(tái)。實(shí)驗(yàn)過程中控制水溫在(25±1)℃，將大鼠面向池壁隨機(jī)從4個(gè)不同的象限放入水中，記錄大鼠找到平臺(tái)的潛伏期。若大鼠在60 s內(nèi)未找到平臺(tái)，則將其放置在平臺(tái)上停留15 s。連續(xù)訓(xùn)練4 d，第5天撤去平臺(tái)，記錄各組大鼠在目標(biāo)象限探索時(shí)間百分比。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0軟件進(jìn)行方差分析及配對(duì)t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1各組TWL比較 干預(yù)前各組大鼠TWL比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；干預(yù)后1、3、7、14 d，PTSD組、右美托咪定組TWL均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，且40 μg右美托咪組>20 μg右美托咪定組>PTSD組，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.2各組MWT比較 干預(yù)前各組MWT比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；干預(yù)后1、3、7、14 d，PTSD組、右美托咪定組MWT均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，且40 μg右美托咪定組>20 μg右美托咪定組>PTSD組，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表1 各組TWL比較

與對(duì)照組比較:1)P<0.05；與PTSD組比較:2)P<0.05；與20 μg右美托咪定組比較:3)P<0.05

表2 各組MWT比較

2.3各組認(rèn)知功能比較 與對(duì)照組比較，其余各組尋找平臺(tái)潛伏期時(shí)間延長(zhǎng)，探索時(shí)間百分比明顯下降(P<0.05)；且40 μg右美托咪組<20 μg右美托咪定組20 μg 右美托咪定組>PTSD組，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表3。

表3 各組認(rèn)知功能比較

3 討 論

PTSD的特征為對(duì)創(chuàng)傷相關(guān)記憶增強(qiáng)產(chǎn)生的過度恐懼〔5〕。PTSD病程慢、治療效果差，藥物治療只能部分緩解PTSD癥狀〔6〕。PTSD的發(fā)生與創(chuàng)傷性事件密切相關(guān)，手術(shù)是一種創(chuàng)傷性事件，因此手術(shù)患者是PTSD的高發(fā)人群。右美托咪定通過抑制交感神經(jīng)活性發(fā)揮鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用，可使患者血流動(dòng)力學(xué)更穩(wěn)定，降低術(shù)后躁動(dòng)發(fā)生率〔7〕。

疼痛刺激是引起PTSD的原因之一。曹銘輝等〔8〕研究認(rèn)為，右美托咪定能抑制背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)p-ERK信號(hào)通路的激活，有效緩解神經(jīng)病理性疼痛大鼠的痛覺過敏。張曉燕等〔9〕研究報(bào)道，幼鼠結(jié)腸降鈣素基因相關(guān)肽表達(dá)與內(nèi)臟痛敏具有相關(guān)性；而湯翠菊等〔10〕則指出，右美托咪定能降低前炎性細(xì)胞因子表達(dá)，改善乳腺癌骨轉(zhuǎn)移大鼠疼痛行為。本研究結(jié)果表明，右美托咪定能有效緩解PTSD大鼠疼痛行為，且大劑量右美托咪定效果更明顯。

PTSD的顯著特征之一就是恐懼記憶的增強(qiáng)，當(dāng)患者暴露于急性應(yīng)激環(huán)境中時(shí)，出現(xiàn)交感-去甲腎上腺素系統(tǒng)的高反應(yīng)性，增加PTSD的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)〔11〕。右美托咪定主要通過激動(dòng)α2腎上腺素受體影響腦干藍(lán)斑核而干擾恐懼記憶的獲得〔12〕。陳丹丹等〔13〕文獻(xiàn)報(bào)道，右美托咪啶能夠有效緩解ICU患者鎮(zhèn)靜期應(yīng)激反應(yīng)，錢寶民等〔14〕認(rèn)為，右美托咪定能減緩氯胺酮麻醉致幼齡大鼠海馬神經(jīng)元凋亡。本研究與類似文獻(xiàn)報(bào)道〔15〕，結(jié)果一致提示右美托咪定能改善創(chuàng)傷應(yīng)激大鼠的認(rèn)知功能。

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