劉 寧 繆 巍 燕 速 馬曉明 楊賢達
(青海大學附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科,青海 西寧 810001)
結直腸腺癌主要見于中老年人,病變形成后的主要播散途徑是淋巴道播散〔1〕。近年人們關注腫瘤間質的淋巴結管生成,認為淋巴管新生與淋巴管生成因子有關,最重要的淋巴管生成因子是血管內皮生長因子(VEGF)-C,其可以與受體結合,促進間質的淋巴管新生,為轉移提供必要的結構〔2,3〕。DNA結合/分化抑制蛋白(ID)-1是近年發(fā)現(xiàn)的一種分化抑制因子,通過抑制環(huán)-螺旋-環(huán)轉錄因子的作用調節(jié)腫瘤細胞的增殖及轉移〔4〕。本文關注結直腸腺癌中ID-1和VEGF-C的表達特點,探討其臨床價值。
1.1臨床資料 2016年1~12月青海大學附屬醫(yī)院住院治療、經病理學確診并行手術根治的患者67例為觀察組。納入標準:①臨床資料完整;②符合WHO中的診斷標準;③患者或家屬簽署知情同意書。排除標準:①伴有其他器官惡性腫瘤;②林奇綜合征;③腸道疾病手術史;④術前有放、化療史。其中男35例,女32例,年齡46~86歲,平均57.3歲。上述患者標本中距腫物邊緣>8 cm的非腫瘤性結腸黏膜組織45例為對照組。其中男23例,女22例,年齡47~81歲,平均58.3歲。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義,具有可比性。
1.2ID-1和VEGF-C表達檢測 兩組均應用免疫組化二步法檢測ID-1和VEGF-C的表達。ID-1和VEGF-C試劑均為標準的濃縮液,先進行預實驗,按不同比例進行稀釋,選擇染色效果最好的濃度用在正式實驗,即ID-1配比濃度是1∶50,VEGF-C配比濃度是1∶100。正式實驗均由同一技師進行操作,二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色,做好質控工作。
1.3ID-1和VEGF-C結果 ID-1和VEGF-C的陽性表達部位均為腫瘤細胞的細胞質(部分病例的間質中的弱表達不計為陽性)。著色強度:無著色為0分;弱著色為1分,中等程度著色為2分,強著色為3分。選擇上皮細胞分布區(qū)且染色較為明顯的區(qū)域進行計數(shù),共選擇2個高倍視野,取平均值,以<5%為0分,≥5%且<10%為1分,≥10%且<30%為2分,≥30%且<50%為3分,以≥50%為4分。按著色強度和陽性率的評分之和進行評定。以≤3分為陰性,>3分為陽性。
1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。
2.1兩組中ID-1和VEGF-C表達的比較 觀察組ID-1和VEGF-C表達的陽性率明顯高于對照組(P<0.001)。見表1。
表1 兩組中ID-1和VEGF-C陽性表達的比較〔n(%)〕
2.2觀察組中ID-1和VEGF-C的陽性率在不同臨床特征分組中的比較 ID-1和VEGF-C表達與病變的增殖指數(shù)、脈管累犯和淋巴結轉移密切相關,ID-1表達與腫瘤分化程度和浸潤深度密切相關。見表2。
2.3觀察組中ID-1和VEGF-C表達的相關性 ID-1和VEGF-C表達呈正相關(r=0.54,P=0.041)。
表2 ID-1和VEGF-C在觀察組不同臨床特征中表達陽性率的比較〔n(%)〕
結直腸上皮細胞發(fā)生異型增生、癌變后,對肌層和周圍組織進行侵犯,形成浸潤性腺癌〔5〕。腫瘤多為高、中分化的,具有腺管樣結構,部分病例由于異型增生明顯,可以表現(xiàn)為低分化,并伴有黏液腺癌形成〔6〕。腫瘤間質可以觀察到比正常結腸黏膜間質更多的淋巴管,這些淋巴管可以為腫瘤細胞進入淋巴循環(huán)提供直捷通路〔7〕。淋巴管在腫瘤進展時是由淋巴管內皮細胞增殖后形成的,其中促進增殖的因子最常見的是VEGF-C和VEGF-D,二者也被稱為淋巴管生長因子〔8,9〕。VEGF-C是最早發(fā)現(xiàn)的,也是作用最強的,其作用途徑是通過VEGF受體(VEGFR)2實現(xiàn)的,當VEGF-C和VEGFR2結合后,使淋巴管內皮細胞的DNA復制,細胞增生繁殖,同時在淋巴液的沖擊作用下形成管腔,使淋巴液在管腔中流動,進入淋巴管的腫瘤細胞通過此途徑形成轉移性播散〔10,11〕。ID-1基因具有癌基因的特征,被認為有“永生化”的特征,其具有阻止細胞分化、促進細胞增殖的作用〔12,13〕。也有研究認為ID-1過度表達可以延遲細胞老化〔14〕。近年研究顯示ID-1高表達可以促進血管生成,同時對淋巴管生成也有一定的調節(jié)作用,ID-1調節(jié)轉移的過程主要是對脈管生成的促進作用實現(xiàn)的〔15〕。本研究結果提示ID-1和VEGF-C二者具有癌基因樣的作用,是促進腫瘤形成的重要因素。ID-1和VEGF-C表達上調后可以引起腫瘤細胞的失控性增殖、脈管侵犯和淋巴道播散的形成。ID-1可以調節(jié)腫瘤的分化和鄰近組織直接蔓延。ID-1升高時可以調節(jié)腺癌細胞的分化,而分化作為細胞在發(fā)育進程中的表達過程,其也是細胞生長過程中不同時期細胞形態(tài)的反映,ID-1表達上調,細胞處于幼稚階段,腫瘤細胞異型性明顯,與起源組織的差別小,核染色深,此類細胞具有高度增殖的特征。本文結果提示,ID-1和VEGF-C二者具有正向協(xié)同作用,ID-1對淋巴管生成因子具有促進作用〔16〕,因此ID-1的作用可能具有多向性。ID-1可能是上游基因,調節(jié)VEGF-C、表皮生長因子受體和磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B等信號通路,引起細胞增殖和遷移〔17〕。但是否ID-1/VEGF-C/VEGFR-3是一個淋巴管生成的通路有待更多實驗證實。
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