康 霞

駐馬店市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)二科，河南 駐馬店 463000

帕金森病屬于神經(jīng)系統(tǒng)病變，通常多見于中老年患者，目前我國帕金森發(fā)病率較高，尤其是老年患者發(fā)病率接近1%[1-5]。根據(jù)WHO的統(tǒng)計顯示，目前全球范圍內(nèi)擁有帕金森病患者數(shù)量約400萬，其中接近43%的患者來自于我國，每年新發(fā)患者數(shù)量接近10萬[6-9]。由于其發(fā)病癥狀為靜止性肢體震顫、肌肉強直等，給患者的日常生活帶來了極大的影響。目前，治療帕金森病尚無特效方案[10-12]。神經(jīng)干細胞移植術(shù)是近年來新興起來的一種治療方法[13-18]。為進一步探討神經(jīng)干細胞移植術(shù)在治療帕金森病中的應(yīng)用價值，我們對2014-05—2015-05駐馬店市中心醫(yī)院收治的帕金森病進行治療，取得較滿意效果。

1 資料及方法

1．1一般資料選擇2014-05—2015-05駐馬店市中心醫(yī)院收治的帕金森病患者27例，男16例，女11例；年齡46～78(64.8±5.6)歲；病程3～16(6.7±1.2)a。納入標準：(1)臨床確診為帕金森病，具有不同程度的靜止狀態(tài)下不自主四肢震顫、肌肉強直以及運動神經(jīng)遲緩癥狀[19-20]；(2)在接受神經(jīng)干細胞移植術(shù)治療前，均服用超過2 a時間的抗帕金森病藥物，并出現(xiàn)了不同程度的藥效減弱或不良反應(yīng)；(3)不存在神經(jīng)系統(tǒng)病史，如老年癡呆、急性腦梗死并發(fā)神經(jīng)損傷、精神病等；(4)患者知情同意接受本研究。排除標準：(1)存在干細胞移植禁忌證[21-22]；(2)合并肝臟等其他重要器官疾病者。

1．2方法

1．2．1 神經(jīng)干細胞分離、提純和培養(yǎng)方法：27例患者采用神經(jīng)干細胞移植手術(shù)治療，神經(jīng)干細胞選擇自體骨髓間充質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)干細胞。第一步是對患者自體骨髓間充質(zhì)神經(jīng)干細胞進行分離和提純，分離位置選擇在髂骨前緣上棘位置，抽取的骨髓組織液量為40 mL，使用密度梯度離心技術(shù)，將其中具有單個核的骨髓細胞提純出來[23-24]。然后將這類單核細胞接種在75 mL培養(yǎng)瓶當中，培養(yǎng)基選擇DMEM/F12。接種后的培養(yǎng)瓶置于二氧化碳恒溫培育箱中，箱內(nèi)飽和濕度為37 ℃，二氧化碳的體積分數(shù)設(shè)定為5%。連續(xù)培養(yǎng)4 d后將培養(yǎng)瓶取出，并加入4 mL的無菌生理鹽水進行懸浮處理，從懸濁液中提取1×107個細胞進行鑒別，如其抗原表達率、分化特征等神經(jīng)細胞特征，則認定為神經(jīng)干細胞培養(yǎng)成功，并將其移植入患者體內(nèi)[25-27]。

1．2．2 神經(jīng)干細胞移植手術(shù)方法：移植治療所使用的手術(shù)床應(yīng)更換為硬板床，患者取側(cè)臥位，為防止患者不自主震顫對手術(shù)的影響，應(yīng)借助束縛帶將患者固定為雙手“抱膝貼腹”狀態(tài)，即雙手放置在兩側(cè)膝蓋部位，呈緊抱狀以使雙腿能夠貼近腹部，使軀體呈側(cè)弓形臥位。保證髂骨部位的充分暴露，選擇髂骨后緣上棘、髂骨后緣中線的交匯點作為穿刺參考點，在骨髓穿刺前應(yīng)常規(guī)對周圍皮膚進行消毒處理，并使用濃度為2%的利多卡因進行局部麻醉[28-29]。

穿刺時應(yīng)以左手拇指和食指將穿刺點周圍的皮膚進行臨時固定，切記觸碰時需佩戴手套，以免污染消毒部位皮膚。右手將穿刺針方向調(diào)整為與患者背部垂直，緩慢入針約6 cm后停止，如此時穿刺針內(nèi)有無色透明狀腦脊液回流，則說明穿刺成功。腦脊液逆流約3 mL后，將神經(jīng)干細胞注射器插入穿刺針內(nèi)，采用緩慢推注的方式移植神經(jīng)干細胞。神經(jīng)干細胞移植量需根據(jù)患者自身體質(zhì)量而定，應(yīng)為1×107個/kg，懸濁液的濃度應(yīng)控制在9×108個/mL，推注速度控制在每分鐘0.5 mL[19]。推注完畢后，穿刺點位置皮膚再次進行消毒，并利用醫(yī)用紗布和膠貼進行封閉。手術(shù)結(jié)束后患者必須采用去枕仰臥位絕對靜養(yǎng)約6 h，觀察其是否存在不良反應(yīng)，整個治療過程中共分4次進行，每次移植手術(shù)之間間隔約10 d。術(shù)后需指導(dǎo)患者開展面部、頸部、軀干、四肢運動神經(jīng)恢復(fù)鍛煉，促進移植神經(jīng)干細胞的快速分化，并在患者出院后開展為期12個月的隨訪調(diào)查，記錄治療前后帕金森病評分和病癥改善率。

1．3療效評價標準帕金森癥狀評分采用UPDRS量表[30-32](統(tǒng)一帕金森病評分量表)進行調(diào)查，該量表共包含4大類內(nèi)容，分別是日常行為和心理評分、生活功能評分、運動功能評分及并發(fā)癥評分，分數(shù)越高，說明患者帕金森病癥越嚴重，神經(jīng)損傷程度越高。

癥狀改善情況以治療前后癥狀UPDRS評分作為標準[33-34]，癥狀評分下降率>50%為顯著改善；評分下降率25%～49%為有效改善；評分下降率<24%時為無效[21，35]。

2 結(jié)果

2．1治療前后UPDRS評分評分比較治療后12個月后，患者UPDRS量表中的行為和心理評分、日常生活質(zhì)量評分、運動功能評分、并發(fā)癥評分均明顯低于治療前(P<0.05)，且治療后12個月UPDRS量表總評分也低于治療前(P<0.05)，見表1。

表1 患者治療前后UPDRS評分比較 (n=27，±s，分)

2．2隨訪結(jié)果27例患者平均隨訪12個月，治療總有效率為81.48%(22/27例)，其中顯著改善患者10例(37.04%)，有效改善12例(44.44%)，無效5例(18.52%)。

3 討論

帕金森病是全球性神經(jīng)系統(tǒng)障礙性疾病，其一般發(fā)生于中老年人群，患者臨床以四肢靜止性震顫、肌肉強直、運動神經(jīng)遲緩等為主[36-39]。根據(jù)現(xiàn)代醫(yī)療研究現(xiàn)實，當人體內(nèi)神經(jīng)細胞轉(zhuǎn)變?yōu)楹谫|(zhì)細胞后，其所釋放的多巴胺量降低，并且多巴胺在通過黑質(zhì)神經(jīng)細胞構(gòu)成的神經(jīng)網(wǎng)傳遞時，對于新生成的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)具有抑制作用，降低了人體自我恢復(fù)的效果，同時人體內(nèi)乙酰膽堿含量異常上升[40-43]。

常規(guī)治療方法包括電擊和藥物治療，雖然可起到緩解病癥的效果，但并發(fā)癥較多[44-47]。而且電擊治療當中對于電量的使用有著嚴格的標準，電流過大易損傷神經(jīng)細胞；電流過小無法達到預(yù)期效果[48-51]。干細胞治療的核心理念在于利用未分化的干細胞對損傷的組織進行修復(fù)，從而提升神經(jīng)系統(tǒng)對多巴胺的合成量，重建神經(jīng)循環(huán)通路，而且移植后的干細胞還可與自身神經(jīng)細胞相協(xié)調(diào)，增加神經(jīng)系統(tǒng)中營養(yǎng)因子的合成，從側(cè)面修復(fù)神經(jīng)系統(tǒng)[52-54]。由于帕金森病本身是由于神經(jīng)元細胞損傷所引發(fā)的，其治療的靶向性較為明確，因此符合干細胞移植治療的基本條件[55-57]。神經(jīng)干細胞移植手術(shù)則是選擇患者自身的骨髓干細胞進行分化培育，并將其重新移植到脊髓神經(jīng)內(nèi)，從而為神經(jīng)系統(tǒng)再造提供新分化的神經(jīng)細胞源[58-60]。該方法的優(yōu)勢在于患者治療痛苦較低，且采用自體干細胞不會出現(xiàn)排斥性，治療周期短，治療后短期內(nèi)效果顯著[61-64]。

本研究顯示，治療后12個月患者UPDRS量表中的行為和心理評分、日常生活質(zhì)量評分、運動功能評分、并發(fā)癥評分均明顯低于治療前(P<0.05)，且治療后12個月UPDRS量表總評分也低于治療前(P<0.05)。27例患者平均隨訪12個月，患者治療總有效率為81.48%。由此可見，神經(jīng)干細胞移植手術(shù)治療帕金森病療效確切，可提升明顯改善患者UPDRS評分，提升患者生活質(zhì)量。

綜上所述，神經(jīng)干細胞移植手術(shù)在一定程度上可改善帕金森病患者的臨床癥狀，為帕金森病治療開辟了一種新思路[65-68]。本研究的局限之處在于臨床觀察時間比較短，沒有對患者的遠期療效進行研究；同時納入的病例數(shù)量較少，今后可進一步擴大病例樣本數(shù)量進行擴大范圍的研究，以驗證神經(jīng)干細胞移植手術(shù)治療的可行性。

[1] 劉定華，顧魯軍，韓伯軍，等．自體骨髓間充質(zhì)神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病的療效觀察[J]．中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志，2016，38(3)：194-198．

[2] 段奎甲，王向鵬，楊智勇，等．GDNF基因修飾神經(jīng)干細胞移植治療大鼠帕金森病[J]．南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2016，36(1)：32-38．

[3] 龔亮，陳秀生，彭紅波，等．神經(jīng)干細胞移植治療神經(jīng)退行性疾病的研究進展[J]．現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2016，25(35)：3 987-3 990．

[4] 曹華．經(jīng)顱磁刺激對帕金森病小鼠側(cè)腦室下區(qū)神經(jīng)干細胞增殖的影響[J]．山東醫(yī)藥，2016，56(26)：32-34．

[5] 謝明琦，陳治池，王彤彤，等．神經(jīng)增生在神經(jīng)性毒物誘導(dǎo)的帕金森病動物模型中的研究進展[J]．解剖學(xué)報，2017，48(5)：610-616．

[6] 冷歷歌，田增民．神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病21例[J]．中國臨床神經(jīng)外科雜志，2014，(7)：412-413．

[7] 徐蛟天，陳孝祥，王威，等．Nurr1對小膠質(zhì)細胞聯(lián)合神經(jīng)干細胞共培養(yǎng)促進神經(jīng)干細胞向多巴胺神經(jīng)元分化作用研究[J]．國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志，2018，45(1)：52-57．

[8] 郭瓊，朱佳，李甜，等．紋狀體內(nèi)移植胚胎干細胞來源的神經(jīng)前體細胞可升高帕金森病小鼠紋狀體內(nèi)多巴胺含量[J]．中國組織化學(xué)與細胞化學(xué)雜志，2016，25(4)：322-327．

[9] 王明國，李智高，楊智勇，等．多巴胺神經(jīng)元聯(lián)合中腦神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病[J]．中國微侵襲神經(jīng)外科雜志，2016，21(3)：127-130．

[10] 鄭江環(huán)，寧麗潔，鐘傳林，等．應(yīng)用神經(jīng)干細胞移植術(shù)治療帕金森病的臨床療效觀察[J]．當代醫(yī)藥論叢，2013，11(10)：143-144．

[11] 譚磊琦，劉亞松，沈富春，等．帕金森病大鼠模型的建立及其行為學(xué)評價的實驗研究[J]．齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2017，38(18)：2 109-2 112．

[12] 謝姜，王斌，董方，等．人臍帶間充質(zhì)干細胞源的多巴胺分泌細胞治療帕金森病模型大鼠的研究[J]．天津醫(yī)藥，2017，45(1)：21-24．

[13] 安冉，李國忠．嗅鞘細胞移植治療帕金森病的研究進展[J]．東南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2016，35(2)：284-286．

[14] 高華，毛潔萍，羅琴，等．脂肪源性神經(jīng)干細胞細胞移植對帕金森病大鼠腦內(nèi)氧化應(yīng)激損傷的影響[J]．山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2017，48(4)：333-336．

[15] 張君，李娜，劉俊騫，等．人臍帶血間充質(zhì)干細胞和神經(jīng)干細胞移植對帕金森模型大鼠神經(jīng)營養(yǎng)作用的比較[J]．解剖學(xué)雜志，2017，40(6)：692-697．

[16] 李智高，徐蛟天，陳孝祥，等．神經(jīng)干細胞和多巴胺神經(jīng)元聯(lián)合移植對帕金森病大鼠運動障礙的影響[J]．山東醫(yī)藥，2017，57(20)：24-27．

[17] 左賦興．帕金森病小鼠的內(nèi)源性神經(jīng)再生修復(fù)研究[D]．北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院，2016：1-99．

[18] 呂林潔．人胚胎干細胞分化為可自我更新的神經(jīng)干細胞[D]．第二軍醫(yī)大學(xué)，2016：1-57．

[19] 王海軍，羅燁，劉自英，等．神經(jīng)干細胞移植對帕金森大鼠的療效觀察[J]．齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2014，35(21)：3 126-3 127．

[20] 孫麗，張婷，陳旭義，等．帕金森病的手術(shù)治療研究進展[J]．中國綜合臨床，2017，33(11)：1 044-1 047．

[21] 張海龍，李智高，李玉，等．胚胎中腦神經(jīng)干細胞移植治療大鼠帕金森病模型[J]．廣東醫(yī)學(xué)，2016，37(1)：49-51．

[22] 周靖，包麗雯，梁靜．神經(jīng)干細胞移植帕金森病模型大鼠行為學(xué)及對炎癥因子的調(diào)節(jié)效應(yīng)[J]．中國組織工程研究，2017，21(33)：5 299-5 304．

[23] 張曉英．神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病的有效性與安全性[J]．中國組織工程研究，2013，(27)：5 033-5 040．

[24] 肖振勇，盧國輝，覃軍，等．人胎盤底蛻膜間充質(zhì)干細胞紋狀體移植治療帕金森病模型大鼠的實驗研究[J]．右江醫(yī)學(xué)，2016，44(5)：485-489．

[25] 王姝，莫英緒，王大成．帕金森病發(fā)病因素的研究現(xiàn)狀[J]．醫(yī)學(xué)信息，2018，31(1)：46-48．

[26] 余沛豪，馬駿，王述菊，等．自噬在針灸防治帕金森病中作用的研究進展[J]．湖南中醫(yī)雜志，2017，33(2)：143-144．

[27] 呂穎，張念平，徐麗萍，等．環(huán)孢菌素A結(jié)合神經(jīng)干細胞移植對6-OHDA大鼠PD模型的作用[J]．神經(jīng)解剖學(xué)雜志，2017，33(6)：723-730．

[28] 王明國，李智高，楊智勇，等．多巴胺神經(jīng)元聯(lián)合中腦神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病[J]．中國微侵襲神經(jīng)外科雜志，2016，21(3)：127-130．

[29] 任佩佩，樊晉宇，豐慧根，等．誘導(dǎo)性多能干細胞技術(shù)在帕金森病研究中的進展[J]．醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報，2016，29(7)：770-774．

[30] KARAKASIS C，KALINDERI K，KATSAROU Z，et al．Association of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) Val66Met polymorphism with Parkinson's disease in a Greek population[J]．J Clin Neurosci，2011，18(12)：1 744-1 745．

[31] 中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會運動障礙及帕金森病學(xué)組．帕金森病的診斷[J]．中華神經(jīng)科雜志，2006，39(6)：408-409．

[32] 中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會帕金森病及運動障礙學(xué)組，中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師分會帕金森病及運動障礙專業(yè)．中國帕金森病的診斷標準(2016版)[J]．中華神經(jīng)科雜志，2016，49(4)：268-271．

[33] 彭雅南，趙振強．人誘導(dǎo)性多能干細胞源神經(jīng)元移植治療帕金森病的現(xiàn)狀與未來[J]．中國組織工程研究，2016，20(36)：5 458-5 465．

[34] 房進平，馮濤．帕金森病焦慮的發(fā)病機制及研究進展[J]．中華老年心腦血管病雜志，2016，18(7)：774-776．

[35] 趙春松，鄒海強，閆曉明，等．人臍帶間充質(zhì)干細胞對帕金森病患者外周血淋巴細胞增生的抑制[J]．首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2014，35(3)：344-352．

[36] 呂穎，張念平，徐麗萍，等．環(huán)孢菌素A結(jié)合神經(jīng)干細胞移植對6-OHDA大鼠PD模型的作用[J]．神經(jīng)解剖學(xué)雜志，2017，33(6)：723-730．

[37] KLEIN C，WESTENBERGER A．Genetics of Parkin-son's disease[J]．Cold Spring Harb Perspect Med，2012，2(1)：a008 888．

[38] ZENG X，COUTURE L A．Pluripotent stem cells for Parkinson's disease：progress and challenges[J]．Stem Cell Res Ther，2013，4(2)：25．

[39] MAREI HE，LASHEN S，F(xiàn)ARAG A，et al．Human olfactory hulb neural stem cells mitigate movement disorders in a rat model of Parkinson's disease[J]．J Cell Physiol，2015，230(7)：1 614-1 629

[40] 安冉，李國忠．嗅鞘細胞移植治療帕金森病的研究進展[J]．東南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2016，35(2)：284-286．

[41] LESAGE S，AHEIM M，LETOURNEL F，et al．G5lD alpha-synuclein mutation causes a novelparkinsonian-pyramidal syndrome[J]．Ann Neurol，2013，73(4)：459-471．

[42] RECASENS A，DEHAY B．Alpla-synuclein spreading in parkinson's disease[J]．Front Neuroanat，2014，8：159．

[43] BARKER R A，DROUIN-OUELLET J，PARMAR M．Cell-based therapies for Parkin-son disease-past insights and future potential[J]．Nat Rev Meurol，2015，11(9)：492-503．

[44] XU H，BELKACEMI L，JOG M，et al．Neurotrophic factor expression in expandable cell populations from brain samples in living patients with Parkinson's disease．[J]．FASEB J，2013，27(10)：4157-4 168．

[45] SUNDBERG M，ISACSON O．Advances in stem-cell-generated transplantation therapy for Parkinson's disease[J]．Expert Opin Biol Ther，2014，14(4)：437-453．

[46] KITADA M，DEZAWA M．Parkinson's disease and mesenchymal stem Cells：potential for cell-based therapy[J]．Parkinson's Dis，2012，2 012：873 706．

[47] PALM T，BAHNASSAWY L，SCHWAMBORN J．MiRNAS and neural stem cells：a team to treat Parkinson's disease?[J]．Rna Biology，2012，9(6)：720-730．

[48] 劉疏影，陳彪．帕金森病流行現(xiàn)狀[J]．中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志，2016，16(2)：98-101．

[49] 胡文艦，萬贏，劉振國．帕金森病伴發(fā)腦小血管病的臨床研究進展[J]．中華神經(jīng)科雜志，2018，51(3)：212-216．

[50] 劉振國，萬贏．帕金森病臨床診治應(yīng)重視患者健康生活質(zhì)量[J]．中華神經(jīng)科雜志，2018，51(3)：161-164．

[51] 許東峰，雷益，夏軍，林帆，何品．帕金森病的診斷及其影像學(xué)表現(xiàn)[J]．海南醫(yī)學(xué)，2018，29(3)：381-384．

[52] ARIAS-CARRION O，YUAN T F．Autologous neural stem cell transplantation：A new treatment option for Parkinson's disease?[J]．Medical Hypotheses，2009，73(5)：7 577-7 579．

[53] LI R．Stem cell transplantation for treating Parkinson's disease Literature analysis based on the Web of Science[J]．Neural Regeneration Research，2012，7(16)：1 272-1 279．

[54] PC Buttery，RA Barker．Treating Parkinson's disease in the 2lst century：Can stem cell transplantation compete?[J]．J Comp Neurol，2014，522(12)：2 802-2 816．

[55] 李明，鄭佳，王慧萍，等．針灸聯(lián)合黛力新治療帕金森病神經(jīng)精神障礙的療效觀察[J]．實用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2016，16(6)：68-69．

[56] PANTCHEVA P，REYES S，HOOVER J，et al．Trea-ting non-motor symptoms of Parkinson's disease with transplantation of stem cell[J]．Expert Review of Neurotherapeutics，2015，15(10)：1 231．

[57] FU M H，LI C L，LIN H L，et al．Stem cell transplantation therapy in Parkinson's disease[J]．Springerplus，2015，4(1)：597．

[58] KITAYAMA T，ONITSUKA Y，SONG L，et al．Assessing an eatingdisorder induced by 6-OHDA and the possibility of nerveregeneration therapy by transplantation of neural progenitorcells in rats[J]．Nihon Shinkei Seishin Yakurigaku Zasshi，2007，27(3)：109-116．

[59] PANTCHEVA P，REYES S，HOOVER J，et al．Trea-ting non-motor symptoms of Parkinson's disease with transplantation of stem cell[J]．Expert Rev Neurother，2015，15(10)：1 231-1 240．

[60] FU M H，LI C L，LIN H L，et al．Stem cell transplantation therapy in Parkinson's disease[J]．Springerplus，2015，4(1)：597．

[61] 于雪峰，樊祥偉，高晶，等．頭部電針刺激協(xié)同神經(jīng)干細胞移植對腦癱大鼠腦組織形態(tài)學(xué)的影響[J]．中國中醫(yī)藥科技，2016，23(2)：131-133．

[62] 賀菊芳，余資江．神經(jīng)干細胞移植治療周圍神經(jīng)損傷的研究進展[J]．貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2016，41(10)：1 117-1 121．

[63] CHEN Y，XIONG M，DONG Y，et al．Chemical Control of Grafted Human PSC-Derived Neurons in a Mouse Model of Parkinson's Disease[J]．Cell stem Cell，2016，18(6)：817-826．

[64] HAO L，ZOU Z，TIAN H，et al．Stem Cell-Based Therapies for Ischemic Stoke[J]．Biomed Res Int，2015，2 014(4)：468 748．

[65] 王麗波，楊昆勝．帕金森病認知障礙的生物學(xué)指標研究進展[J]．中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志，2016，23(3)：214-217．

[66] 應(yīng)浩杰，王運良．非典型帕金森病的診斷和治療[J]．中國實用神經(jīng)疾病雜志，2017，20(17)：114-116．

[67] 李延峰．帕金森病的診斷和治療進展[J]．中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志，2017，24(1)：1，6．

[68] 熱依沙·塔西買買提．MUL1與帕金森病[J]．中風與神經(jīng)疾病雜志，2018，35(1)：91-93．