張國順，孟冬梅，方正亞，劉斌

（華北理工大學附屬醫(yī)院 消化內(nèi)科，河北 唐山 063000）

肝硬化是一種常見的肝臟病變。我國肝硬化形成的病因以慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染最多見。研究報道[1]，全世界曾經(jīng)感染過HBV的人大約有20億，其中慢性乙肝感染者約為2.4億人，每年大概有65萬人死于HBV感染引起的肝硬化、原發(fā)性肝癌和肝衰竭[2]。近年來，乙肝e抗原（HBeAg）陰性的慢性乙型肝炎患者越來越多，且有文獻報道HBeAg陰性慢性乙型肝炎進展為重型肝炎[3]、肝硬化[4]和肝癌的概率較高，已經(jīng)在臨床上引起重視。但對于乙型肝炎肝硬化方面的相關研究較少。乙型肝炎肝硬化是慢性乙型肝炎向肝癌進展的過渡期，在此階段及時采取干預措施對于預防疾病進展至關重要，故本研究對比分析了HBeAg陽性和陰性乙型肝炎肝硬化患者乙肝病毒載量及肝功能指標的差異，以期為臨床診斷及治療提供指導意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2015年2月-2016年2月在華北理工大學附屬醫(yī)院住院的乙型肝炎肝硬化患者共270例。其中男201例，女69例；年齡30～80歲，平均54.05歲。肝硬化診斷均符合中華醫(yī)學會肝病學分會、中華醫(yī)學會感染病學分會聯(lián)合修訂的《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》中的診斷標準[5]。所有入選病例均為單純的乙型肝炎肝硬化患者，排除合并有甲型、丙型、丁型、戊型等肝炎病毒感染以及合并有酒精性肝病、自身免疫性肝病等其他肝病的患者。HBeAg陽性乙型肝炎肝硬化患者124例，其中男92例，女32例；平均年齡（53.75±11.35）歲；HBeAg陰性肝硬化患者146例，其中男109例，女37例；平均年齡（54.49±10.76）歲。兩組患者的性別構成比及年齡均差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）（見表1），具有可比性。

1.2 檢測方法

1.2.1 儀器與試劑 HBsAg定量檢測系統(tǒng)為SYM-810時間辨熒光分析儀及試劑，由上海新波生物有限公司提供。HBV DNA檢測系統(tǒng)包含實時熒光定量聚合酶鏈反應（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）儀、乙型肝炎病毒核酸定量檢測試劑盒，由上?？迫A生物工程股份有限公司提供。

表1 一般資料比較

1.2.2 方法 采用滅菌的一次性真空帶蓋塑料管，抽取清晨空腹靜脈血，并分離血清，用TRFIA方法對患者進行HBsAg、HBeAg定量檢測。HBV DNA標本采集清晨空腹靜脈血3～5 ml，離心分離血清分裝于1.5 ml滅菌EP管，保存于-20℃冰箱備用，1周內(nèi)完成qRT-PCR檢測。

1.3 研究方法

采用回顧性分析方法，收集患者的一般資料及相關指標，以HBeAg定量1.0 COI為界限將肝硬化患者分為HBeAg陽性組和陰性組，分析兩組之間年齡、性別、乙肝表面抗原（HBsAg）、HBV DNA、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、白蛋白（ALB）的差異，然后按HBV DNA含量的多少分為低（＜103IU/ml）、中（103～105IU/ml）、高（＞105IU/ml）等3個等級滴度水平，統(tǒng)計HBeAg陽性和陰性肝硬化患者的不同HBV DNA滴度水平的構成比。HBV DNA的檢測值＜1 000 IU/ml時無法檢測，因此所有HBV DNA低于1 000 IU/ml的病例均記錄為500；HBsAg＞2 500 IU/ml無法檢測，所以所有的HBsAg定量值在2 500 IU/ml以上的病例被記錄為2 500。

1.4 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件，計量資料滿足正態(tài)分布的以均數(shù)±標準差（±s）表示，2個樣本均數(shù)比較采用t檢驗，非正態(tài)分布以中位數(shù)和四分位數(shù)間距[M（P25～P75）]表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗。所有檢驗均為雙側檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 HBV定量及肝功能指標比較

HBeAg陽性組HBsAg、HBV DNA、ALT、AST含量與HBeAg陰性組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），HBeAg陽性組高于HBeAg陰性組；兩組間TBIL、ALB的比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 HBV定量及肝功能指標比較 M（P25～P75）

2.2 不同HBV DNA載量的構成比比較

HBeAg陽性組HBV DNA＜103IU/ml的患者占31.5%（39/124），HBV DNA 為 103～105IU/ml的患者占19.4%（24/124），均低于HBeAg陰性組的53.4%（78/146）和 26.7%（39/146）；HBeAg陽 性 組 HBV DNA＞105IU/ml的比例為 49.2%（61/124），高于 HBeAg陰性組的19.9%（29/146），兩組間HBV DNA水平的構成比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同HBV DNA載量的構成比 例（%）

3 討論

肝硬化是我國目前常見的肝臟疾病，由各種不同類型的慢性肝臟病變發(fā)展而來。在我國大多為肝炎相關性肝硬化，尤其是乙肝肝硬化最常見。調(diào)查顯示，肝硬化的病變進展與HBV的持續(xù)反復感染有較大的相關性[6]。一般認為反映HBV復制的最敏感的指標是HBV DNA水平升高和HBeAg持續(xù)陽性[7-8]，即HBeAg和HBV DNA含量的多少代表著HBV復制水平的高低和傳染性的大小。故當慢性乙型肝炎患者血清中的HBeAg轉陰、HBV DNA含量降低以及肝功能有所改善后，可以判定患者病情趨于好轉。但事實上并不是所有出現(xiàn)HBeAg血清學轉換的乙肝感染者的病情均好轉，而是有些人可能發(fā)展為肝硬化和原發(fā)性肝癌。有研究顯示[9-10]，HBeAg陰性的乙型肝炎患者比HBeAg陽性患者發(fā)生肝硬化的風險要高。故本研究探討HBeAg陰性和陽性乙型肝炎肝硬化患者體內(nèi)HBV載量及肝功能指標的差異，從而預測其病情嚴重程度及預后。

近年來，HBeAg陰性的慢性乙肝感染者逐漸增多，一些患者發(fā)生血清學轉換后體內(nèi)的HBV DNA仍在持續(xù)復制，肝組織損傷仍在加重。有研究顯示[11]，HBeAg陽性肝硬化患者機體的炎癥程度較重，但肝硬化的程度輕，肝儲備功能較好，而HBeAg陰性肝硬化患者的肝臟病變程度則較重。在本研究中，HBeAg陽性組乙型肝炎肝硬化患者的HBsAg、HBV DNA、ALT、AST等檢測指標均高于HBeAg陰性組的患者。ALT主要存在于肝臟細胞的胞漿中，在肝臟發(fā)生炎癥時，肝細胞膜的通透性發(fā)生改變，ALT則會從肝細胞釋放到血液中，從而在血清中檢測到其升高，故本結果提示HBeAg陽性肝硬化患者機體的炎癥反應明顯，與趙蔚等[11]研究結果一致。HBsAg是肝細胞核內(nèi)共價閉合環(huán)狀DNA（cccDNA）轉錄翻譯的產(chǎn)物，它的測定能夠反映體內(nèi)病毒復制的水平，而且它的變化貫穿整個慢乙肝病程。在慢性乙肝病情進展的不同階段，隨著病情程度的加重，HBsAg水平會逐漸降低[12]；同時，還有研究指出[13]，HBsAg定量水平隨著慢性乙型肝炎向肝硬化、肝癌的進展而逐漸下降，并且和同一患者體內(nèi)檢出的HBV DNA的含量水平呈正相關，進一步證實了HBeAg陰性肝硬化患者病情程度較重。TBIL反映肝臟的代謝功能，ALB反映肝臟的合成功能，兩組間這2個指標差異均無統(tǒng)計學意義，提示肝臟的合成和代謝功能與HBV的復制水平無相關性。

HBeAg的轉陰往往伴隨HBV DNA含量的下降，但HBV DNA水平與病情嚴重程度并不一致，隨著肝臟病變程度的逐漸加重，血清HBV DNA的復制能力減弱，在HBV DNA持續(xù)陰性或保持低度復制的患者中，肝內(nèi)仍可有HBV復制[14]，部分患者的肝組織損傷仍在進展。本研究結果顯示，HBeAg陰性組HBV DNA呈低、中水平復制，HBeAg陽性組HBV DNA高度復制，與楊志勇等[15]的報道一致，這也證實HBV DNA復制水平與血清HBeAg呈正相關[16-18]。但HBeAg陰性組肝硬化患者HBV DNA為103～105IU/ml的比例高于HBeAg陽性組患者，且HBV DNA＞105IU/ml的比例占19.9%，說明HBeAg雖然轉陰，但是HBV并沒有停止復制，仍需積極抗病毒治療。

綜上所述，HBeAg陰性的乙肝肝硬化患者體內(nèi)HBsAg、HBV DNA、ALT、AST的含量均低于HBeAg陽性患者，機體炎癥反應較輕，但其體內(nèi)病毒復制并未停止，肝臟病變?nèi)栽谶M展，肝硬化程度也逐漸加重，仍需積極抗病毒治療，并注意監(jiān)測體內(nèi)乙肝病毒的含量。

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