張國(guó)順,孟冬梅,方正亞,劉斌
(華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院 消化內(nèi)科,河北 唐山 063000)
肝硬化是一種常見(jiàn)的肝臟病變。我國(guó)肝硬化形成的病因以慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染最多見(jiàn)。研究報(bào)道[1],全世界曾經(jīng)感染過(guò)HBV的人大約有20億,其中慢性乙肝感染者約為2.4億人,每年大概有65萬(wàn)人死于HBV感染引起的肝硬化、原發(fā)性肝癌和肝衰竭[2]。近年來(lái),乙肝e抗原(HBeAg)陰性的慢性乙型肝炎患者越來(lái)越多,且有文獻(xiàn)報(bào)道HBeAg陰性慢性乙型肝炎進(jìn)展為重型肝炎[3]、肝硬化[4]和肝癌的概率較高,已經(jīng)在臨床上引起重視。但對(duì)于乙型肝炎肝硬化方面的相關(guān)研究較少。乙型肝炎肝硬化是慢性乙型肝炎向肝癌進(jìn)展的過(guò)渡期,在此階段及時(shí)采取干預(yù)措施對(duì)于預(yù)防疾病進(jìn)展至關(guān)重要,故本研究對(duì)比分析了HBeAg陽(yáng)性和陰性乙型肝炎肝硬化患者乙肝病毒載量及肝功能指標(biāo)的差異,以期為臨床診斷及治療提供指導(dǎo)意義。
2015年2月-2016年2月在華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院住院的乙型肝炎肝硬化患者共270例。其中男201例,女69例;年齡30~80歲,平均54.05歲。肝硬化診斷均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂的《慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。所有入選病例均為單純的乙型肝炎肝硬化患者,排除合并有甲型、丙型、丁型、戊型等肝炎病毒感染以及合并有酒精性肝病、自身免疫性肝病等其他肝病的患者。HBeAg陽(yáng)性乙型肝炎肝硬化患者124例,其中男92例,女32例;平均年齡(53.75±11.35)歲;HBeAg陰性肝硬化患者146例,其中男109例,女37例;平均年齡(54.49±10.76)歲。兩組患者的性別構(gòu)成比及年齡均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見(jiàn)表1),具有可比性。
1.2.1 儀器與試劑 HBsAg定量檢測(cè)系統(tǒng)為SYM-810時(shí)間辨熒光分析儀及試劑,由上海新波生物有限公司提供。HBV DNA檢測(cè)系統(tǒng)包含實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)儀、乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒,由上海科華生物工程股份有限公司提供。
表1 一般資料比較
1.2.2 方法 采用滅菌的一次性真空帶蓋塑料管,抽取清晨空腹靜脈血,并分離血清,用TRFIA方法對(duì)患者進(jìn)行HBsAg、HBeAg定量檢測(cè)。HBV DNA標(biāo)本采集清晨空腹靜脈血3~5 ml,離心分離血清分裝于1.5 ml滅菌EP管,保存于-20℃冰箱備用,1周內(nèi)完成qRT-PCR檢測(cè)。
采用回顧性分析方法,收集患者的一般資料及相關(guān)指標(biāo),以HBeAg定量1.0 COI為界限將肝硬化患者分為HBeAg陽(yáng)性組和陰性組,分析兩組之間年齡、性別、乙肝表面抗原(HBsAg)、HBV DNA、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)、白蛋白(ALB)的差異,然后按HBV DNA含量的多少分為低(<103IU/ml)、中(103~105IU/ml)、高(>105IU/ml)等3個(gè)等級(jí)滴度水平,統(tǒng)計(jì)HBeAg陽(yáng)性和陰性肝硬化患者的不同HBV DNA滴度水平的構(gòu)成比。HBV DNA的檢測(cè)值<1 000 IU/ml時(shí)無(wú)法檢測(cè),因此所有HBV DNA低于1 000 IU/ml的病例均記錄為500;HBsAg>2 500 IU/ml無(wú)法檢測(cè),所以所有的HBsAg定量值在2 500 IU/ml以上的病例被記錄為2 500。
數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料滿(mǎn)足正態(tài)分布的以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,2個(gè)樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn),非正態(tài)分布以中位數(shù)和四分位數(shù)間距[M(P25~P75)]表示,兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料以率表示,采用χ2檢驗(yàn)。所有檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
HBeAg陽(yáng)性組HBsAg、HBV DNA、ALT、AST含量與HBeAg陰性組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),HBeAg陽(yáng)性組高于HBeAg陰性組;兩組間TBIL、ALB的比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。
表2 HBV定量及肝功能指標(biāo)比較 M(P25~P75)
HBeAg陽(yáng)性組HBV DNA<103IU/ml的患者占31.5%(39/124),HBV DNA 為 103~105IU/ml的患者占19.4%(24/124),均低于HBeAg陰性組的53.4%(78/146)和 26.7%(39/146);HBeAg陽(yáng) 性 組 HBV DNA>105IU/ml的比例為 49.2%(61/124),高于 HBeAg陰性組的19.9%(29/146),兩組間HBV DNA水平的構(gòu)成比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。
表3 不同HBV DNA載量的構(gòu)成比 例(%)
肝硬化是我國(guó)目前常見(jiàn)的肝臟疾病,由各種不同類(lèi)型的慢性肝臟病變發(fā)展而來(lái)。在我國(guó)大多為肝炎相關(guān)性肝硬化,尤其是乙肝肝硬化最常見(jiàn)。調(diào)查顯示,肝硬化的病變進(jìn)展與HBV的持續(xù)反復(fù)感染有較大的相關(guān)性[6]。一般認(rèn)為反映HBV復(fù)制的最敏感的指標(biāo)是HBV DNA水平升高和HBeAg持續(xù)陽(yáng)性[7-8],即HBeAg和HBV DNA含量的多少代表著HBV復(fù)制水平的高低和傳染性的大小。故當(dāng)慢性乙型肝炎患者血清中的HBeAg轉(zhuǎn)陰、HBV DNA含量降低以及肝功能有所改善后,可以判定患者病情趨于好轉(zhuǎn)。但事實(shí)上并不是所有出現(xiàn)HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換的乙肝感染者的病情均好轉(zhuǎn),而是有些人可能發(fā)展為肝硬化和原發(fā)性肝癌。有研究顯示[9-10],HBeAg陰性的乙型肝炎患者比HBeAg陽(yáng)性患者發(fā)生肝硬化的風(fēng)險(xiǎn)要高。故本研究探討HBeAg陰性和陽(yáng)性乙型肝炎肝硬化患者體內(nèi)HBV載量及肝功能指標(biāo)的差異,從而預(yù)測(cè)其病情嚴(yán)重程度及預(yù)后。
近年來(lái),HBeAg陰性的慢性乙肝感染者逐漸增多,一些患者發(fā)生血清學(xué)轉(zhuǎn)換后體內(nèi)的HBV DNA仍在持續(xù)復(fù)制,肝組織損傷仍在加重。有研究顯示[11],HBeAg陽(yáng)性肝硬化患者機(jī)體的炎癥程度較重,但肝硬化的程度輕,肝儲(chǔ)備功能較好,而HBeAg陰性肝硬化患者的肝臟病變程度則較重。在本研究中,HBeAg陽(yáng)性組乙型肝炎肝硬化患者的HBsAg、HBV DNA、ALT、AST等檢測(cè)指標(biāo)均高于HBeAg陰性組的患者。ALT主要存在于肝臟細(xì)胞的胞漿中,在肝臟發(fā)生炎癥時(shí),肝細(xì)胞膜的通透性發(fā)生改變,ALT則會(huì)從肝細(xì)胞釋放到血液中,從而在血清中檢測(cè)到其升高,故本結(jié)果提示HBeAg陽(yáng)性肝硬化患者機(jī)體的炎癥反應(yīng)明顯,與趙蔚等[11]研究結(jié)果一致。HBsAg是肝細(xì)胞核內(nèi)共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)轉(zhuǎn)錄翻譯的產(chǎn)物,它的測(cè)定能夠反映體內(nèi)病毒復(fù)制的水平,而且它的變化貫穿整個(gè)慢乙肝病程。在慢性乙肝病情進(jìn)展的不同階段,隨著病情程度的加重,HBsAg水平會(huì)逐漸降低[12];同時(shí),還有研究指出[13],HBsAg定量水平隨著慢性乙型肝炎向肝硬化、肝癌的進(jìn)展而逐漸下降,并且和同一患者體內(nèi)檢出的HBV DNA的含量水平呈正相關(guān),進(jìn)一步證實(shí)了HBeAg陰性肝硬化患者病情程度較重。TBIL反映肝臟的代謝功能,ALB反映肝臟的合成功能,兩組間這2個(gè)指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示肝臟的合成和代謝功能與HBV的復(fù)制水平無(wú)相關(guān)性。
HBeAg的轉(zhuǎn)陰往往伴隨HBV DNA含量的下降,但HBV DNA水平與病情嚴(yán)重程度并不一致,隨著肝臟病變程度的逐漸加重,血清HBV DNA的復(fù)制能力減弱,在HBV DNA持續(xù)陰性或保持低度復(fù)制的患者中,肝內(nèi)仍可有HBV復(fù)制[14],部分患者的肝組織損傷仍在進(jìn)展。本研究結(jié)果顯示,HBeAg陰性組HBV DNA呈低、中水平復(fù)制,HBeAg陽(yáng)性組HBV DNA高度復(fù)制,與楊志勇等[15]的報(bào)道一致,這也證實(shí)HBV DNA復(fù)制水平與血清HBeAg呈正相關(guān)[16-18]。但HBeAg陰性組肝硬化患者HBV DNA為103~105IU/ml的比例高于HBeAg陽(yáng)性組患者,且HBV DNA>105IU/ml的比例占19.9%,說(shuō)明HBeAg雖然轉(zhuǎn)陰,但是HBV并沒(méi)有停止復(fù)制,仍需積極抗病毒治療。
綜上所述,HBeAg陰性的乙肝肝硬化患者體內(nèi)HBsAg、HBV DNA、ALT、AST的含量均低于HBeAg陽(yáng)性患者,機(jī)體炎癥反應(yīng)較輕,但其體內(nèi)病毒復(fù)制并未停止,肝臟病變?nèi)栽谶M(jìn)展,肝硬化程度也逐漸加重,仍需積極抗病毒治療,并注意監(jiān)測(cè)體內(nèi)乙肝病毒的含量。
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