孫紅梅，羅 蓉，徐 東

(1安利(中國)日用品有限公司，廣州 510613；2北京聯(lián)合大學(xué)，北京 100191)

輔酶Q10具有增強(qiáng)免疫力、緩解體力疲勞和清除自由基等作用[1-3]。維生素E在動(dòng)物和人體的抗氧化過程中發(fā)揮著重要作用[4-5]。實(shí)驗(yàn)研究表明，輔酶Q10和維生素E具有顯著提高機(jī)體抗氧化和緩解體力疲勞等功能[6-7]。褪黑素和維生素E、維生素C聯(lián)用能明顯增強(qiáng)抗氧化作用[8]。胡蘿卜素和維生素E聯(lián)用比單獨(dú)用類胡蘿卜素的效果更好等[9]。本文在輔酶Q10和維生素E配伍的穩(wěn)定性和食用安全性研究基礎(chǔ)上[10]，通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究輔酶Q10和維生素E軟膠囊的抗氧化作用，為開發(fā)維生素E、輔酶Q10抗氧化產(chǎn)品提供參考。

1 材料和方法

1.1 樣品描述

受試物由安利(中國)日用品有限公司提供，主要由輔酶Q10和維生素E為原料制成，內(nèi)容物為粘稠狀紅色液體的軟膠囊，塑料瓶裝，樣品核準(zhǔn)內(nèi)容物的凈含量是0.414g/粒，60粒/瓶。人體推薦日服量為每天1粒，即0.414g/60kg·BW。冷藏或貯存于30℃以下的陰涼干燥處，保存期24個(gè)月，受試樣品用玉米油配制。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選用中國食品藥品檢定研究院[許可證號(hào)：SCXK-(京)2009-0017]繁殖的SPF級(jí)8月齡昆明種雌性小鼠共40只。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)于北京聯(lián)合大學(xué)應(yīng)用文理學(xué)院保健食品功能檢測中心SPF級(jí)動(dòng)物室。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK(京)2012-0031。選用北京華阜康生物科技股份有限公司[許可證號(hào)：SCXK(京)2009-0008]生產(chǎn)的維持飼料。

1.3 劑量

按照人體推薦量的5、10、30倍，即每日0.034、0.069、0.207g/kg·BW，設(shè)低、中、高3個(gè)劑量組。受試樣品用玉米油配制。每日1次經(jīng)口給予，連續(xù)灌胃45d后檢測各項(xiàng)指標(biāo)。小鼠灌胃體積為0.1mL/10g鼠重。同時(shí)設(shè)1個(gè)空白對(duì)照組(0g/kg·BW)，用玉米油代替受試樣品，每日灌胃體積與受試樣品各劑量組相同。

1.4 儀器與試劑

1.4.1 儀器 UV2450分光光度計(jì)(2004001)、BS223S電子天平(2008007)、ES-1000E電子天平(2003004)、H2F-B3000電子天平(2013002)、80-2型臺(tái)式離心機(jī)(2001001)、Elx808酶標(biāo)儀(2008001)、恒溫水浴鍋(2004009)、高速離心機(jī)(2012001)。

1.4.2 試劑 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒、蛋白質(zhì)羰基(CPP)試劑盒、還原性谷胱甘肽(GSH)試劑盒、考馬斯亮藍(lán)測定試劑盒和雙縮脲蛋白測定試劑盒(均由南京建成生物工程研究所生產(chǎn))，8-表氫氧-異前列腺素(8-ISO-PG)酶聯(lián)免疫試劑盒。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

取SPF 級(jí)8月齡昆明種雌性小鼠40只，按體重隨機(jī)分為4組，每組10只，空白對(duì)照組，受試樣品為低、中、高劑量組0.034、0.069、0.207g/kg·BW，每日灌胃1次，連續(xù)45d。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，取小鼠血清及肝組織，測定血清中丙二醛(MDA)和8-表氫氧-異前列腺素(8-ISO-PG)的含量，肝組織中蛋白質(zhì)羰基含量(PCC)、血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、全血中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力及還原性谷胱甘肽(GSH)含量[11]。

1.6 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 血清中丙二醛(MDA)含量測定

由表1可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試樣品45d后，與空白對(duì)照組間比較，血清MDA含量在0.069g/kg·BW劑量組有顯著差異(P<0.05)，血清MDA含量在0.207g/kg·BW劑量組有極顯著差異(P<0.01)，即該受試樣品在中、高劑量組均能降低小鼠的血清MDA含量。

表1 小鼠血清MDA含量測定結(jié)果

注：*與空白對(duì)照組比較，有顯著性差異；**與空白對(duì)照組比較有極顯著性差異

2.2 8-表氫氧-異前列腺素含量(8-ISO-PG)測定

由表2可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試樣品45d后，與空白對(duì)照組間比較，8-ISO-PG含量在0.207g/kg·BW劑量組有顯著差異(P<0.05)，即該受試樣品在高劑量組能降低8-ISO-PG含量。

2.3 肝組織蛋白質(zhì)羰基(PCC)含量測定結(jié)果和分析

由表3可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試樣品45d后，其肝組織PCC含量在實(shí)驗(yàn)各劑量組均無明顯變化，與空白對(duì)照組間比較，差異均無顯著性(P>0.05)，即該受試樣品在各劑量組均不能降低肝組織PCC含量。

表2 小鼠8-ISO-PG含量測定結(jié)果

注：*與空白對(duì)照組比較，有顯著性差異

表3 小鼠肝組織PCC含量測定結(jié)果

2.4 血清超氧化物歧化酶(SOD)活力測定

由表4可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試樣品45d后，其血清SOD活力在實(shí)驗(yàn)各劑量組均無明顯變化，與空白對(duì)照組間比較，差異均無顯著性(P>0.05)，即該受試樣品在各劑量組均不能提高血清SOD活力。

表4 小鼠血清SDD活力測定結(jié)果

2.5 全血中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力測定

由表5可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試樣品45d后，與空白對(duì)照組間比較，小鼠全血GSH-Px活力在0.069g/kg·BW劑量組和0.207g/kg·BW劑量組有極顯著性差異(P<0.01)，即該受試樣品在中、高劑量組均能提高小鼠全血GSH-Px活力。

表5 小鼠全血GSH-Px活力測定結(jié)果

注：**與空白對(duì)照組比較，有極顯著性差異

2.6 肝組織還原型谷胱甘肽(GSH)含量測定

由表6可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試樣品45d后，與空白對(duì)照組間比較，小鼠肝組織GSH含量在0.207g/kg·BW劑量組有顯著性差異(P<0.05)，即該受試樣品在高劑量組能提高小鼠肝組織GSH含量。

2.7 受試樣品對(duì)小鼠體重的影響

由表7可見，小鼠給予受試樣品前后，與空白對(duì)照比較，各劑量組小鼠體重的差異均無顯著性(P>0.05)，表明該受試樣品對(duì)小鼠的體重?zé)o不良影響。

表6 小鼠肝組織GSH含量測定結(jié)果

注：*與空白對(duì)照組比較，有顯著性差異

表7 受試樣品對(duì)小鼠體重的影響

3 討論

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，服用以輔酶Q10和維生素E為原料制成的軟膠囊45d后，與空白對(duì)照組比較，受試樣品的中、高劑量組能夠降低小鼠血清丙二醛含量(P<0.05)，提高全血谷胱甘肽過氧化物酶活力(P<0.01)；高劑量組還可以降低血清8-表氫氧-異前列腺素含量(P<0.05)，提高肝組織還原型谷胱甘肽含量(P<0.05)；并且受試樣品各劑量組均對(duì)小鼠體重增長無不良影響。從而說明輔酶Q10和維生素E軟膠囊具有明顯抗氧化作用，且對(duì)小鼠體重增長無不良影響。但是輔酶Q10和維生素E軟膠囊對(duì)人體的抗氧化作用還有待進(jìn)一步研究。◇

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[11]國家食品藥品監(jiān)督管理局.抗氧化功能檢驗(yàn)方法[S].2012：107.