董偉博 楊海軍

測量不確定度是與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)，本文通過采用HPLC法測定了面包中丙酸鈣的含量，并對其相對擴展不確定度進行了評定。

丙酸鈣作為防腐劑可以添加在焙烤類食品中，限量為2.5g/kg（以丙酸計）。高效液相色譜法（HPLC）是測定食品中丙酸鈣的國家標準方法。測量不確定度是與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)，用于表征賦予被測量之值的分散性。當測量結(jié)果處于臨界值時食品檢驗機構(gòu)必須進行測量不確定度評定。本文對HPLC法測定面包中丙酸鈣含量的不確定度因素進行了評定，計算出不確定度并報告了結(jié)果。

1 儀器、試劑、色譜分析條件

1.1 儀器

高效液相色譜儀，島津LC-20AT，附紫外檢測器和自動進樣器；高速冷凍離心機，北京雷勃爾LR10-2.4A；超聲波清洗器，昆山市超聲儀器KQ-100；高速組織搗碎機，上海精科DS-1；pH計，上海儀電科學PHS-3C；電子天平，上海上天FA2004；溶劑過濾器及0.45μm微孔濾膜。

1.2 試劑

分析純磷酸（H3PO4）、分析純磷酸氫二銨[（NH4）2HPO4]、實驗室用超純水、食品添加劑丙酸鈣純度標準物質(zhì)（GBW（E）100078）。

1.3 色譜分析條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-Aq 4.6×250mm，5μm，P.N.880975-914；流動相：1.5g/L；磷酸氫二銨溶液，用1mol/L磷酸溶液調(diào)pH為3.0（使用時配制）；經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾；流速：1.0mL/ min；柱溫：25℃；進樣量：10μL；紫外檢測器波長：214nm。

2 樣品處理與標準溶液曲線的繪制

依據(jù)國家標準GB 5009.120-2016進行試驗。

2.1 樣品制備

將面包樣品經(jīng)組織搗碎機搗碎混勻，準確稱取以上樣品5g（精確至0.0001g）至100mL燒杯中，加水20mL，加入1mol/L磷酸溶液0.5mL，混勻；經(jīng)超聲浸提10min后，用1mol/L磷酸溶液調(diào)pH為3左右，轉(zhuǎn)移試樣至50mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。將試樣全部轉(zhuǎn)移至50mL具塞塑料離心管中，以不低于4000r/min的速度離心10min，取上清液，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后，待液相色譜測定。

2.2 標準曲線的繪制

準確吸取5.0mL丙酸標準貯備液（10mg/mL）于50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，配制成濃度為1.0mg/mL標準工作液。再準確吸取標準工作液0.2mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL至10mL容量瓶中，分別加入1mol/L磷酸0.2mL，用水定容至10mL，混勻。其丙酸標準溶液的最終濃度分別為0.02mg/mL、0.05mg/mL、0.1mg/ mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，濃度由低到高進樣分析，以濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

報告結(jié)果：1.08±0.05g/kg（k=2）

不確定度表達測量結(jié)果的分散程度，是一個定量的概念，可以用定量的數(shù)字描述。本文對H P L C法測定面包中丙酸鈣含量的不確定度因素進行了評定，若檢測結(jié)果處于標準限量的臨界值或標準方法有要求時，必須結(jié)合不確定對檢測結(jié)果進行評判。