王文光 黎云輝

功能性消化不良（FD）是一種最常見的胃腸道疾病，患病率高達(dá)30%，臨床特征主要表現(xiàn)為上腹痛﹑上腹脹﹑早飽﹑噯氣﹑食欲不振﹑惡心﹑嘔吐等，進(jìn)食后胃底容受舒張發(fā)生障礙﹑胃竇十二指腸運(yùn)動協(xié)調(diào)紊亂﹑內(nèi)臟高敏等因素均與FD發(fā)病有關(guān)［1］。目前的研究認(rèn)為30%～60%的FD患者存在幽門螺桿菌（HP）感染及由此引起的慢性活動性胃炎［2］。辣椒素受體1（TRPV1）是一種傳輸和調(diào)節(jié)疼痛的感受器，不僅在神經(jīng)元上有表達(dá)，而且在胃腸道黏膜也有分布［3］。最新的研究結(jié)果顯示，TRPV1的上調(diào)與FD患者內(nèi)臟高敏感性有關(guān)［4］。本文探討TRPV1分別在HP陽性和HP陰性FD患者的變化及臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2013年8月至2017年4月浙江省紹興市中醫(yī)院消化內(nèi)科收治的168例FD患者為觀察對象，其中男79例，女89例；平均年齡（38.6±5.9）歲，平均病程（2.9±1.3）年。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）FD診斷標(biāo)準(zhǔn)符合羅馬III標(biāo)準(zhǔn)［5］。（2）經(jīng)13C-尿素呼氣試驗(yàn)兩項(xiàng)檢測為HP陽性和HP陰性。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）消化性潰瘍﹑反流性食管炎或典型的腸易激綜合征患者。（2）伴隨全身性疾病，如糖尿病或任何惡性腫瘤。（3）嚴(yán)重抑郁癥﹑精神病﹑飲食失調(diào)﹑甲狀腺功能低下。（4）入組前半個(gè)月服用過非甾體抗炎藥﹑抗凝血劑﹑質(zhì)子泵抑制劑﹑抗菌藥。（5）有胃部手術(shù)史。（6）妊娠期患者。168例FD患者中HP陽性患者90例，兩組患者的性別構(gòu)成比﹑平均年齡﹑平均病程﹑臨床癥狀等一般資料差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究方案經(jīng)本院倫理學(xué)會批準(zhǔn)同意，患者均知情同意并簽署知情同意書。同時(shí)選擇同期在本院進(jìn)行健康體檢且13C-尿素呼氣試驗(yàn)陰性者50例為對照組，入組者無呼吸﹑消化及循環(huán)系統(tǒng)疾病，無FD和胃潰瘍癥狀，無近期服藥史。對照組性別構(gòu)成比和平均年齡與FD-（HP+）組和FD-（HP-）組差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 168例FD患者和對照組均在空腹12h后行電子胃鏡檢查，在內(nèi)鏡下取胃竇部和胃體部分別取0.3cm×0.3cm大小黏膜組織一塊，生理鹽水沖洗后立刻放入液氮中備用。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測胃竇部和胃體部黏膜組織中TRPV1基因mRNA的表達(dá)，具體過程如下：采用QIAquick RNA Extraction Kit（購自QIAGEN公司，德國）抽提黏膜組織的總RNA，用于cDNA第一鏈的合成（First Strand cDNA synthesis Kit，Takara公司，日本），合成的cDNA第一鏈放于-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。根?jù)TRPV1基因序列，在Oligo7.5軟件上設(shè)計(jì)TRPV1基因熒光定量PCR引物，引物序列為：TRPV1F：5'-GAGTTTCAGGCAGACACTGGAA-3'；TRPV1R ：5'-CTATCTCGAGCACTTGCCTCTCT-3'，以GAPDH作為參考基因，引物序列為 ：5'-CGACGTAGTCTCATCTGACTT-3'，5'-GTTGCAGTCGACATAATCGTTGA-3'。 采 用TransStart Green qPCR SuperMix 試劑盒（購于北京全式金有限公司）進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR。在ABI7500分析軟件上分析TRPV1基因及GAPDH基因的Ct值，采用2- Ct法計(jì)算TRPV1基因的mRNA水平，采用公式Ct= Ct（TRPV1基因）- Ct（GAPDH基因）。分別采集168例FD患者和對照組空腹靜脈血，采用人胃動素檢測試劑盒（Uscn Life Science Inc）檢測胃動素水平；采用胃泌素檢測試劑盒（購于上海信裕生物科技有限公司）檢測胃泌素水平，采用生長抑素檢測試劑盒檢測生長抑素水平（Uscn Life Science Inc）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（）表示，組間比較采用單因素方差分析，兩組間的比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性采用pearson分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TRPV1基因mRNA水平﹑胃動素﹑胃泌素和生長抑素比較 見表1。

表1 TRPV1基因mRNA水平、胃動素、胃泌素和生長抑素比較

2.2 TRPV1基因mRNA水平與胃動素﹑胃泌素和生長抑素相關(guān)性分析 TRPV1基因mRNA水平與胃動素及胃泌素均呈明顯負(fù)相關(guān)，與生長抑素水平呈明顯正相關(guān)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 TRPV1基因mRNA水平與胃動素、胃泌素和生長抑素相關(guān)性分析

3 討論

在目前已被鑒定的20多個(gè)瞬時(shí)受體電位中TRPV1被認(rèn)為是調(diào)節(jié)疼痛的一個(gè)重要的集中點(diǎn)，TRPV1是一種化學(xué)感受器，可由各種香料衍生的植物化學(xué)物質(zhì)激活，也可由低PH（＜6）﹑熱和血清素﹑緩激肽和三磷腺苷等炎癥介質(zhì)激活［6］。消化不良的患者常顯示低痛閾，胃腸道的任何引起疼痛或傳輸疼痛的部分都可能增強(qiáng)FD。研究顯示TRPV1的活化可導(dǎo)致人體消化道疼痛和痛覺過敏［6］。藥理研究結(jié)果顯示TRPV1在食管黏膜﹑胃竇G細(xì)胞和胃壁細(xì)胞中均有表達(dá)［7］，近期的研究結(jié)果表明FD患者TRPV1在食管下段﹑胃竇部﹑十二指腸部黏膜的表達(dá)均明顯高于正常人［4］。本資料結(jié)果提示TRPV1在FD患者中呈高水平表達(dá)。內(nèi)臟高敏性是FD發(fā)病的一個(gè)因素，有文獻(xiàn)指出TRPV1受體的活化可引起擴(kuò)血管物質(zhì)降鈣素基因相關(guān)肽和P物質(zhì)等神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，從而參與內(nèi)臟高敏性的形成，所以FD患者TRPV1受體的表達(dá)水平增加可能與其內(nèi)臟高敏感有關(guān)［4］。

HP是消化道疾病的主要致病菌，HP感染后可導(dǎo)致胃酸分泌增多，誘發(fā)胃部炎癥反應(yīng)，造成胃黏膜的破壞。HP感染被認(rèn)為是FD的致病因素之一。本資料中對HP陽性和HP陰性FD患者中TRPV1的mRNA水平進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示TRPV1在HP陽性FD患者的表達(dá)水平高于HP陰性FD患者，提示HP感染可誘發(fā)其TRPV1基因表達(dá)的增加，通過上調(diào)TRPV1的表達(dá)促進(jìn)FD的發(fā)生和發(fā)展。

FD的發(fā)病與胃動力障礙也存在密切的關(guān)系，胃動素﹑胃泌素和生長抑素水平的檢測常作為FD治療后臨床療效評價(jià)的客觀指標(biāo)之一，三者與FD的癥狀密切相關(guān)。本資料進(jìn)一步分析TRPV1基因mRNA水平與這三者的相關(guān)性，結(jié)果顯示TRPV1基因mRNA水平與胃動素及胃泌素均呈明顯負(fù)相關(guān)，與生長抑素水平呈明顯正相關(guān)，進(jìn)一步提示TRPV1基因高表達(dá)與FD有關(guān)。

綜上所述，TRPV1在FD患者中呈高水平表達(dá)，且HP感染可誘發(fā)FD患者TRPV1基因表達(dá)的增加，提示抗HP治療對HP陽性的FD患者有益。

［1］ 張聲生,李曉玲．功能性消化不良的中西醫(yī)研究進(jìn)展．首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2015,36(4):649-653．

［2］ Suzuki H,Moayyedi P．Helicobacter pylori infection in functional dyspepsia．Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology, 2013,10(3): 168．

［3］ Liao M,Cao E,Julius D,et al．Structure of the TRPV1 ion channel determined by electron cryo-microscopy．Nature, 2013, 504(7478):107-12．

［4］ 史孝敏,彭燕．辣椒素受體1在功能性消化不良上消化道中的表達(dá)及其意義．胃腸病學(xué),2016,21(7):414-418．

［5］ Tack J,Talley NJ．Functional dyspepsia--symptoms,definitions and validity of the Rome III criteria．Nature Reviews Gastroenterology& Hepatology,2013,10(3):134．

［6］ Fernandes ES,Fernandes MA,Keeble JE．The functions of TRPA1 and TRPV1: moving away from sensory nerves．British Journal of Pharmacology,2012,166(2):510．

［7］ 胡容,彭燕．辣椒素及TRPV1與功能性消化不良．中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志,2015,23(4):295-298．