黃裔程

(上海市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科 200071)

原發(fā)性肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一，每年約38.3萬例患者病死于肝癌，約占全世界病例的51%，其病死率也居我國惡性腫瘤致死原因的第2位[1]。原發(fā)性肝癌的發(fā)病率高、病死率高、復發(fā)率高，但早期無明顯臨床癥狀和體征，確診時多為中、晚期，因此早期診斷、早期治療對改善患者的生存和預后具有重要的臨床意義。血清甲胎蛋白(AFP)作為肝癌診斷的首選標志物已廣泛使用于臨床，但單項實驗室檢查指標由于敏感性、假陰性、假陽性等因素，具有一定的局限性。本研究采用回顧性研究方法，分析原發(fā)性肝癌、代償性肝硬化和健康體檢者AFP、α-L-巖藻糖苷酶(AFU)、谷氨酰轉肽酶(GGT)、D-二聚體(D-D)水平，探討聯(lián)合檢測方案在肝癌診斷中的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016 年 1 月1日至12月31日該院住院診治的原發(fā)性肝癌患者、代償性肝硬化患者、門診體檢的健康體檢者。原發(fā)性肝癌患者68例(肝癌組)，均符合中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會原發(fā)性肝癌的診斷標準，經(jīng)病理組織學確診，男57例，女11例，年齡35～82歲，平均年齡(55.0±9.5)歲。代償性肝硬化(Child-Pugh分級為A級)患者79例(肝硬化組)，男64例，女15例，年齡33～78歲，平均年齡(51.0±9.1)歲。根據(jù)體檢號隨機抽取健康體檢者70例(健康對照組)，男38例，女32例，年齡25～55歲，平均年齡(36.0±5.7)歲。

1.2儀器與試劑 AFP檢測采用雅培i2000全自動免疫分析儀，化學發(fā)光微粒子免疫檢測法，試劑為雅培公司AFP測定試劑盒。AFU檢測和GGT檢測均采用Beckman Coulter AU5821全自動生化分析儀，使用速率法，試劑分別為北京普瑞亞科技有限公司提供德國產(chǎn)AFU測定試劑盒和Beckman Coulter GGT測定試劑盒。D-D檢測應用Sysmex CA-7000全自動凝血分析儀，采用免疫比濁法，試劑為Siemens公司生產(chǎn)的D-D試劑盒。

1.3方法 (1)標本采集：3組研究對象清晨空腹采集上臂靜脈血3 mL。血清標本置于生化管離心15 min(3 000 r/min，離心半徑15 cm)。血漿標本置于3.2%檸檬酸鈉抗凝管，混勻，采集后2 h內(nèi)離心15 min(3 000 r/min，離心半徑15 cm)。標本均無溶血和脂血現(xiàn)象。(2)檢測方法：AFP、AFU、GGT、D-D檢測方法均嚴格參照試劑盒說明書。(3)指標參考值范圍：AFP為0～8.78 ng/L，AFU為0～40 U/L，GGT為0～50 U/L，D-D為0～0.55 mg/L。AFP、AFU、GGT、D-D檢測值高于參考值上限為陽性，任意1項條件滿足為聯(lián)合檢測陽性。

2 結 果

2.13組研究對象各指標檢測結果比較 肝癌組和肝硬化組4項指標均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肝癌組4項指標也均高于肝硬化組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.23組研究對象各指標單獨和聯(lián)合檢測的陽性率結果比較 肝癌組和肝硬化組各指標單獨和聯(lián)合檢測均高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肝癌組各指標單獨和聯(lián)合檢測也均高于肝硬化組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。各組內(nèi)聯(lián)合檢測的陽性率高于單項指標檢測的陽性率，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表1 3組研究對象各指標檢測結果比較

注：與健康對照組比較，*P<0.05；與肝硬化組比較，#P<0.05

注：與健康對照組比較，*P<0.05；與肝硬化組比較，#P<0.05；與單項檢測比較，$P<0.05

2.3各指標單獨和聯(lián)合檢測原發(fā)性肝癌的診斷效率結果比較 原發(fā)性肝癌患者各指標聯(lián)合檢測的敏感性和陰性預測值高于單項檢測，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；但特異性、準確性、陽性預測值與單項檢測比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 各指標單獨檢測和聯(lián)合檢測的診斷效率結果比較(%)

注：與單項檢測比較，$P<0.05

3 討 論

我國肝癌仍是發(fā)病率和病死率居高的惡性腫瘤，隨著分子生物學和基因組學的進展，越來越多的腫瘤標志物被發(fā)現(xiàn)和應用于臨床，為腫瘤早期診斷創(chuàng)造了條件。1種腫瘤標志物可以存在多個惡性腫瘤中，1種惡性腫瘤也可表達多個腫瘤標志物，因此僅憑1種腫瘤標志物難以滿足診斷的高敏感性和高特異性。由于單個腫瘤標志物的診斷價值有限，故近年來越來越多的學者開始關注2種甚至更多種腫瘤標志物的聯(lián)合監(jiān)測，以提高篩查和診斷價值。進行聯(lián)合檢測的結果如能得到更多臨床數(shù)據(jù)的支持，則可充分發(fā)揮現(xiàn)有腫瘤標志物的價值，也將成為未來血清學診斷的發(fā)展方向之一[2]。

AFP是一種糖蛋白，來源于胎兒的卵黃囊，出生后不久即消失。肝癌時癌細胞內(nèi)AFP合成基因可被激活，產(chǎn)生和分泌AFP，因此AFP是目前公認的診斷肝癌的特異性指標。據(jù)有關研究報道，原發(fā)性肝癌中AFP單項檢測的陽性率較低，其敏感性不能滿足臨床需求，同時在胃癌、肝硬化、慢性肝炎、妊娠女性都有過表達，易出現(xiàn)假陽性，所以單一AFP檢測原發(fā)性肝癌易發(fā)生漏診或誤診[3-4]。AFU是一種溶酶體酸性水解酶，存在于機體多個組織器官，肝臟的活性最高。AFU參與含巖藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子的分解代謝，與其他標志物聯(lián)合檢測原發(fā)性肝癌效果較好，尤其對小細胞肝癌患者具有診斷意義[5-6]。GGT主要來自肝膽系統(tǒng)，癌細胞侵襲周圍肝組織，肝細胞內(nèi)可溶性GGT進入血液，產(chǎn)生較高表達，但在肝內(nèi)外膽道阻塞、胰腺疾病，以及多種肝病中均有表達，因此特異性較差。D-D是交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物，主要反映纖維蛋白溶解功能[7]。癌細胞合成和分泌纖溶酶原激活物，使交聯(lián)蛋白斷裂形成D-D，因此惡性腫瘤的D-D都升高，是惡性腫瘤生長過程的特異現(xiàn)象。AFP、AFU、GGT、D-D 4項指標對原發(fā)性肝癌敏感性較高，并對疾病的治療和預后判斷具有一定的參考作用，多個不同的原發(fā)性肝癌聯(lián)合檢測方案選用了其中1項或多項指標，眾多研究報道顯示聯(lián)合檢測的敏感性和特異性優(yōu)于單項檢測，但較少報道選用這4項指標進行聯(lián)合檢測[3,8-12]。本研究結果表明，3組研究對象分別進行AFP、AFU、GGT、D-D 4項指標的單項和聯(lián)合檢測，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肝癌組患者各單項指標的表達水平和陽性率最高，均高于肝硬化組和健康對照組(P<0.05)。肝癌組患者聯(lián)合檢測的陽性率也高于其他2組，且高于單項檢測，聯(lián)合檢測的敏感性和陰性預測值也優(yōu)于單項檢測，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。因此AFP、AFU、GGT、D-D 4項指標的聯(lián)合檢測優(yōu)于單項檢測，提高診斷的敏感性，減少漏診和誤診。雖然肝硬化組患者4項單項指標有30%～60%的陽性表達，但聯(lián)合檢測的敏感性、特異性、準確性、陽性預測值、陰性預測值分別為64.6%、88.6%、75.8%、86.4%、68.9%，提示4項指標聯(lián)合檢測肝硬化組的敏感性、準確性、陰性預測值均較低，易造成漏診和誤診，因此不適用于代償性肝硬化。在表達陽性的肝硬化組患者中，4項指標的表達水平明顯低于肝癌組(P<0.05)。敏感性、特異性、準確性、陽性預測值、陰性預測值都是基于定性，結合4項指標的定量水平，再結合病史、體檢、影像學檢查等，也有利于對早期原發(fā)性肝癌和代償性肝硬化進行鑒別診斷。

綜上所述，AFP、AFU、GGT和D-D在原發(fā)性肝癌中均高表達，聯(lián)合檢測更有利于提高檢測的敏感性、特異性、準確性，互補作用較強，降低誤診和漏診，且檢測操作簡便，因此4項指標的聯(lián)合檢測有利于原發(fā)性肝癌的早期診斷，為臨床選擇敏感性高、特異性強、優(yōu)化合理的指標選擇提供了實驗室依據(jù)。

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