邱紅輝

（海南省東方市畜牧獸醫(yī)局，572600）

玉屏風屬補氣方劑，是益氣固表治法的代表。該方最早見于宋·張松《究原方》，而在元代《丹溪心法》等書籍中均有記載。方由黃芪、防風和白術組成，具有益氣、固表、健脾扶正之功效。禽類的病毒性傳染病種類數(shù)量繁多，是獸醫(yī)臨床控制的重點和難點，現(xiàn)以雞傳染性法氏囊病病毒（IBDV）為例，以雞胚為載體，試驗玉屏風口服液對該病病毒的抗病效果。

表1 雞胚死亡和活力情況

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗藥品 玉屏風口服液由重慶普特生物藥業(yè)有限公司提供，按照生產(chǎn)廠家說明書中使用方法：混飲濃度每升水加藥液2mL，配制成0.2%濃度的溶液備用。

1.1.2 雞胚 購自濟南斯派福瑞禽業(yè)科技有限公司

1.1.3 病毒 雞傳染性法氏囊病病毒（IBDV）活抗原（B87株）半成品由山東綠都生物科技有限公司提供，病毒滴度>103ELD50/mL。

1.1.4 主要儀器37℃恒溫培養(yǎng)箱。

1.2 方法

1.2.1 分組 選取取9-12日齡SPF雞胚40枚，隨機分成4組，每組10枚，分別標記為病毒對照組、預防組、治療組、混合組。

1.2.2 接種方法 雞胚經(jīng)照視后劃出氣室位置并消毒。在胚胎附近略近氣室處，選擇血管較少的部門以磨卵器磨一與縱軸平行的裂痕或?qū)⒌皻やS開成三角形，小心挑起卵殼，造成卵窗，見到白色而韌性的殼膜，以針尖小心挑破殼膜，注意切勿損傷其下的絨毛尿囊膜。另外，在氣室的頂端鉆一小孔，在卵窗殼膜刺破處滴一滴無菌生理鹽水，用橡皮乳頭貼緊氣室小孔，向外吸氣，使卵窗部位的絨毛尿囊膜下陷形成一小凹，除去卵窗部的卵殼，用注射器或吸管滴入2-3滴病毒液或試驗藥液于絨毛尿囊膜上。用透明膠紙封住卵窗，或用玻璃紙蓋于卵窗上，周圍用石蠟封固，同時封氣室端小孔，將雞胚放在37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，接種部位朝上橫臥，不能翻動，每日自卵窗處檢查，經(jīng)過48小時，觀察雞胚發(fā)育情況。

1.2.3 分組接種方法

病毒對照組只接種IBDV病毒液;預防組接種試驗藥液放37℃恒溫培養(yǎng)4小時后再接種病毒液；治療組接種病毒液37℃恒溫2小時后再接種試驗藥液；混合組將試驗藥液和病毒液等量混合均勻后再接種雞胚37℃恒溫培養(yǎng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 每8小時照檢一次雞胚，記錄雞胚的生長發(fā)育情況。結(jié)果表1。

2.2 試驗結(jié)果分析

由表1可得出：預防組雞胚發(fā)育和活力正常的有8枚，占該組雞胚總數(shù)的80%，高于其他3組；其次是治療組有5枚，占該組總數(shù)的50%；除病毒對照組外，混合組發(fā)育和活力正常的雞胚數(shù)量最少，僅為4枚。

3 討論

3.1 玉屏風散對IBDV感染雞胚的影響

從表1中的試驗結(jié)果可以看出：病毒對照組死亡數(shù)9枚，死亡率90%，體現(xiàn)出IBDV病毒的高致病性，毒力極強；另外3個組雞胚死亡數(shù)大大降低，發(fā)育、活力正常和基本正常的合計超過50%，體現(xiàn)了玉屏風散對IBDV有很好的抑制和殺滅作用。

中醫(yī)理論中的“扶正祛邪”類似于現(xiàn)代免疫學免疫防御功能，即提高動物機體的免疫功能。玉屏風散能提高動物機體的免疫功能，對巨噬細胞的吞噬功能、抗體生成及ADCC等各項指標均有較強的促進作用[1,2]。該醫(yī)方還能抗應激所介導的免疫抑制作用。動物受到各種應激時，免疫功能急劇下降，抵抗病原微生物的能力就降低了，這時病原微生物趁虛而入，玉屏風散可拮抗動物應激時體內(nèi)的巨噬細胞的吞噬功能抑制和外周血IL-2含量下降，從而增強動物機體在受到外界不良因素的侵襲時的抵抗能力[3]。另外，玉屏風散還可以抑制胸腺細胞凋亡[4,5]，增強中樞免疫器官的活性，具有很強的“扶正祛邪，益氣固表”的中醫(yī)藥效優(yōu)勢。

3.2 不同接種方式對抵抗IBDV的作用效果影響

先接種藥液后接種病毒的方式相當于預防作用，反映了藥液對病毒的阻斷作用，而先接種病毒后接種藥液的方式相當于治療作用，反映了藥液對病毒的抑制作用。從雞胚發(fā)育和活力正常的數(shù)量看，預防組比治療組多出3枚，高出30%，說明玉屏風散的預防病毒的效果優(yōu)于治療效果。胡元亮[6]在研究中藥多糖體外抗病毒活性時也發(fā)現(xiàn)先加多糖煎煮液后加病毒方式的抗病毒活性優(yōu)于先加病毒后加煎煮液方式。其原因可能是先加中藥時中藥的某種活性成分增強了細胞膜的穩(wěn)定性，通過阻斷病毒顆粒吸附靶細胞或抑制病毒在細胞內(nèi)的復制，使感染細胞或雞胚受到保護，從而提高了抗病毒能力[7]。混合組說明體外玉屏風散的抗病毒作用，體現(xiàn)出對病毒毒力的削弱效果，可以用玉屏風散作為消毒藥劑對可能存在IBDV病毒污染的養(yǎng)殖環(huán)境進行消毒。

參考文獻：

[1]張紅軍，張曉莉，宋寶輝，等.玉屏風散對免疫抑制小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用[J].細胞與分子免疫學雜志，2001，17（4）：398

[2]張紅軍，張曉莉，宋寶輝等.玉屏風散對小鼠免疫功能的影響[J].牡丹江醫(yī)學院學報，2000，21(3)∶9～11

[3]姚實林，張杰，汪濤等。銀翹玉屏風湯拮抗急性風寒應激小鼠免疫功能抑制作用實驗研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2001，12（2）：97～9

[4]楊燕萍段登志胡冬根等加味玉屏風湯對小鼠胸腺細胞凋亡的抑制作用[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2002，22（9）：698～700

[5]楊燕萍胡冬根陳新黃芪多糖和加味玉屏風湯對小鼠胸腺細胞凋亡抑制作用的比較[J].湖北中醫(yī)學院學報，2001，3（4）：34～6

[6]胡元亮孔祥峰李祥瑞等10種中藥成分對CEF的增殖和抵抗NDV感染的影響[J].畜牧獸醫(yī)學報，2004，35（3）：301-305

[7]徐麗華王芳板藍根中的抗病毒活性成分[J].中國天然煎煮液，2005，3（6）：359-360