齊江姣，羅 成，李村院，王元元，周光普，譚 君，高劍峰

(石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞分子生物學(xué)實驗室，新疆石河子 832003)

白介素2(IL-2)是一種調(diào)控免疫應(yīng)答的重要因子[1]，它具有多向性作用(主要是對淋巴細(xì)胞生長、增殖、分化的促進)，對機體的免疫應(yīng)答和抗病菌、病毒等有重要作用，能活化T 細(xì)胞，促進細(xì)胞因子產(chǎn)生，刺激自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)增殖，提高NK細(xì)胞殺傷活性及產(chǎn)生細(xì)胞因子[2]，淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK細(xì)胞)的誘導(dǎo)產(chǎn)生；促進B細(xì)胞增殖和分泌抗體；具有廣泛的生物活性(激活巨噬細(xì)胞，參與抗體反應(yīng)、造血和腫瘤監(jiān)視)。單核-巨噬細(xì)胞受到IL-2 的持續(xù)作用后，其抗原遞呈能力、殺菌力、細(xì)胞毒性均明顯增強，分泌某些細(xì)胞因子的能力也得到加強[3]。

研究發(fā)現(xiàn)，IL-2對于一些疾病的治療或癌癥細(xì)胞的作用已取得了一系列的成果[4-6]。Roviello G等[7]研究結(jié)果表明，IL-2對黑色素瘤或腎以外的實體腫瘤有重要作用。Abhishek K等[8]詳細(xì)闡述了IL-2與登革熱嚴(yán)重程度的關(guān)系，結(jié)果表明IL-2對登革熱治療有重要的作用。熊一全等[9]就IL-2增強淋巴細(xì)胞對乳腺癌細(xì)胞的殺傷作用研究，表明IL-2能促進淋巴細(xì)胞對MCF-7的殺傷作用。但對于IL-2在布魯菌病(簡稱布病)炎癥反應(yīng)中的作用尚不清楚，由于布病是一種世界范圍內(nèi)流行的高度接觸性人畜共患病，會導(dǎo)致不孕不育及流產(chǎn)等癥狀，給人類的健康和畜牧業(yè)的發(fā)展造成巨大的威脅[10]，故研究IL-2對被M5株侵染的巨噬細(xì)胞(MΦ)所釋放的細(xì)胞因子(TNF-α、IFN-γ和NO)及吞噬能力的調(diào)節(jié)作用具有重要的意義[11]。本文就巨噬細(xì)胞本身TNF-α、NO和IFN-γ的含量[12]以及在IL-2對M5侵染的腹腔巨噬細(xì)胞對上述細(xì)胞因子釋放量進行比較，以此探討IL-2對布病反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用，為布病的治療提供新的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物與菌種 昆明小鼠，18 g～22 g,由石河子大學(xué)實驗動物中心所提供；布魯菌的菌種(M5)，由石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞分子生物學(xué)實驗室保存。

1.1.2 主要試劑 IL-2 ，Cyagen 生物公司產(chǎn)品；TNF-α、NO、IFN-γ酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) 試劑盒，美國Biosource公司產(chǎn)品；DMEM 培養(yǎng)基，美國Gibco 公司產(chǎn)品；胎牛血清，Hyclone 公司產(chǎn)品；臺盼藍染色液，北京中生瑞泰科技有限公司產(chǎn)品。

1.1.3 儀器設(shè)備 高壓蒸汽自動滅菌鍋，Hirayama公司產(chǎn)品；CO2培養(yǎng)箱、-80℃超低溫冰箱，Thermo公司產(chǎn)品；恒溫水浴槽，北京長安科學(xué)儀器廠生產(chǎn)；高速低溫離心機，Beckman公司產(chǎn)品；611UF純水儀，Bioteck公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 腹腔巨噬細(xì)胞的收集和純化 小鼠腹腔注射20 g/L無菌淀粉溶液，每只1.5 mL，24 h后頸椎脫位法處死小鼠，將小鼠浸泡在750 mL/L酒精中5 min進行消毒后，取出小鼠，用無菌的濾紙吸干酒精，用5 mL注射器往腹腔注射5 mL無菌PBS(37℃提前溫浴)，輕揉腹壁，無菌操作取腹腔液，1 500 r/min離心5 min，洗滌2次后，用不含抗生素的完全DMEM Basic(1×) 培養(yǎng)液(含100 mL/L BSA)懸浮細(xì)胞，并置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第2天，用PBS徹底沖洗去除未貼壁細(xì)胞，臺盼藍染色檢測細(xì)胞存活率，用不含抗生素的完全DMEM Basic(1×) 培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為2×105cells/mL，備用。

1.2.2 布魯菌刺激后細(xì)胞因子釋放的時效關(guān)系 試驗組分為陰性對照組(正常細(xì)胞)和侵染組(M5侵染)，用麥?zhǔn)媳葷峁芊ㄕ{(diào)整菌液濃度，按100∶1的比例用M5侵染MΦ，將其置于37℃、體積分?jǐn)?shù)為5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別在培養(yǎng)0、2、6、12、24 h時，收集各時間點的細(xì)胞培養(yǎng)上清液10 μL，然后用ELISA試劑盒測定TNF-α、NO 和IFN-γ的濃度大小。

1.2.3 IL-2作用下巨噬細(xì)胞吞噬M5的能力 試驗組分為陰性對照組(正常細(xì)胞)、空白對照組(M5 侵染)、不同濃度IL-2調(diào)節(jié)組(IL-2+M5侵染)，用麥?zhǔn)媳葷峁芊ㄕ{(diào)整菌液濃度，按100∶1的比例在6孔板中用M5 侵染MΦ，分別加入0、1×106、3×106、5×106UI的IL-2，將其置于37℃、體積分?jǐn)?shù)為5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別培養(yǎng)0、2、6、12、24 h。取各試驗組的MΦ，計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×106cells/mL，加入1 mL的裂解液，吸取10 μL,稀釋103倍，利用CFU涂布計數(shù)法，取1 mL(2 000個細(xì)胞)均勻涂布于TSA固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，72 h后觀察集落形成情況，計算吞噬指數(shù)；

吞噬指數(shù)=(2 000個MΦ吞菌總數(shù)/2 000個MΦ)×100%

1.2.4 IL-2作用M5侵染的巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子釋放的時效關(guān)系 試驗組分為陰性對照組(正常細(xì)胞)、空白對照組(M5 侵染)、不同濃度IL-2調(diào)節(jié)組(IL-2+M5侵染)，用麥?zhǔn)媳葷峁芊ㄕ{(diào)整菌液濃度，按100∶1的比例在6孔板中用M5侵染MΦ，分別加入0、1×106、3×106、5×106UI的IL-2，將其置于37℃、體積分?jǐn)?shù)為5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別在培養(yǎng)0、2、6、12、24 h時，收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液10 μL，然后用ELISA試劑盒測定TNF-α、NO 和IFN-γ的濃度大小。

2 結(jié)果

2.1 布魯菌M5侵染巨噬細(xì)胞后釋放各細(xì)胞因子的時效關(guān)系

為了排除培養(yǎng)液(主要是血清中)中的干擾，故設(shè)陰性對照組，表1中皆是減去陰性對照所得數(shù)據(jù)。布魯菌M5侵染巨噬細(xì)胞后，釋放了TNF-α、IFN-γ、NO等因子，M5刺激后2 h，TNF-α升高，6 h達到峰值12.360 ng/L±1.202 ng/L，與M5刺激0 h比較，呈極顯著差異(P<0.01)；M5侵染24 h時，IFN-γ達到峰值24.524 ng/L±0.621 ng/L(P<0.01)；在M5侵染2 h時，NO含量持續(xù)升高，且在12 h時達到峰值6.424 ng/L±0.545 ng/L(P<0.01)。

表1 腹腔巨噬細(xì)胞(MΦ)被布魯菌M5侵染后釋放細(xì)胞因子的時效關(guān)系

注：同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰大寫字母表示差異顯著(P<0.05),肩標(biāo)相間大寫字母表示差異極顯著(P<0.01),肩標(biāo)相同大寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05)。

Note:In the same column, values with adjacent capital letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate capital letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05).

2.2 IL-2作用下巨噬細(xì)胞胞內(nèi)活菌數(shù)

由表2可知，布魯菌M5侵染細(xì)胞0 h時，在各不同含量組IL-2作用下，與對照組0IU相比，吞噬指數(shù)均無顯著差異(P>0.05)；但在2、6、12、24 h時，不同含量IL-2作用下，吞噬指數(shù)均呈顯著差異(P<0.05)。

相同IL-2含量條件下，各培養(yǎng)不同時間的MΦ，與對照組0 h相比，吞噬指數(shù)均呈極顯著差異(P<0.01)；在2 h，IL-2含量為5×106IU時，吞噬指數(shù)達到最大值，高于相鄰兩組，極顯著高于對照組(P<0.01)。表明IL-2的免疫調(diào)節(jié)功能具有雙向性；對巨噬細(xì)胞的吞菌能力有明顯的促進作用，并存在濃度和時間上的依賴性。

2.3 IL-2對布魯菌侵染腹腔巨噬細(xì)胞后釋放TNF-α的時效關(guān)系

由表3可知，在0、6、24 h時，在不同含量組IL-2作用下，與對照組0IU相比，均無顯著差異(P>0.05)；在2 h和12 h時，MΦ 分泌的TNF-α 因子隨著IL-2含量的增加為增長，且當(dāng)IL-2含量為5×106IU 時，均顯著高于對照組0 h的含量(P<0.05)，尤以2 h，IL-2 含量為5×106IU條件下，細(xì)胞釋放TNF-α的效果達到最佳(P<0.01)。表明IL-2可以促進MΦ增殖或者活化，使其分泌TNF-α作用增強，并存在含量依賴性。

當(dāng)IL-2含量為1×106IU和3×106IU 時，培養(yǎng)24 h時，血清中TNF-α 的含量顯著高于對照組0 h的含量(P<0.01)，且以含量為1×106IU時，血清中TNF-α含量最大；當(dāng)IL-2含量為5×106IU 時，培養(yǎng)2 h和12 h的MΦ釋放TNF-α因子的含量均極顯著高于對照組(P<0.01)，且培養(yǎng)2 h的釋放量最大，效果最佳，極顯著高于相鄰兩組(P<0.01)。表明了IL-2能使MΦ 活化，促進MΦ 分泌TNF-α，啟動機體免疫應(yīng)答，并存在著雙向調(diào)節(jié)性和時間依賴性。

表2 IL-2對被M5侵染的巨噬細(xì)胞的吞噬能力的調(diào)節(jié)作用

注：①同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰小寫字母表示差異顯著(P<0.05),肩標(biāo)相間小寫字母表示差異極顯著(P<0.01),肩標(biāo)相同小寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05);② 同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰大寫字母表示差異顯著(P<0.05),肩標(biāo)相間大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，肩標(biāo)相同大寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05)。

Note：① In the same row, values with adjacent small letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate small letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05);② In the same column, values with adjacent capital letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate capital letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05).

表3 IL-2調(diào)節(jié)作用下被M5侵染的腹腔巨噬細(xì)胞釋放TNF-α的時效關(guān)系

注：①同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)相間小寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，肩標(biāo)相同小寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05)；②同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰大寫字母表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)相間大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，肩標(biāo)相同大寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05)。

Note：① In the same row, values with adjacent small letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate small letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05);② In the same column, values with adjacent capital letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate capital letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05).

2.4 IL-2對布魯菌侵染腹腔巨噬細(xì)胞后釋放IFN-γ 的時效關(guān)系

由表4可知，在2 h和24 h時，在各不同含量組IL-2作用下，與對照組0 IU相比，均無顯著差異(P>0.05)；IL-2含量為3×106IU和5×106IU時，MΦ分別培養(yǎng)2 h、6 h所釋放的IFN-γ均顯著高于對照組(P<0.05)，尤以6 h，IL-2 含量為3×106IU條件下，細(xì)胞釋放IFN-γ 的效果達到最佳(P<0.01)。結(jié)果顯示IL-2對于IFN-γ 的釋放有明顯的促進作用，一定程度上可以增強機體的免疫應(yīng)答能力。

同一含量IL-2條件下，培養(yǎng)2 h后，血清中MΦ 釋放IFN-γ的含量均顯著高于對照組0 h的含量(P<0.05)；培養(yǎng)24 h，血清中IFN-γ的含量與對照組相比，均呈極顯著差異(P<0.01)；相同含量組條件下，IFN-γ的含量隨著時間點的變化而變化，尤以24 h，IL-2含量為1×106IU時，IFN-γ的含量極顯著高于對照組0 h的含量，達到最大值，MΦ 釋放IFN-γ的能力在IL-2的作用下有所提高，并存在著時間依賴性。

表4 IL-2調(diào)節(jié)作用下被M5侵染的腹腔巨噬細(xì)胞釋放IFN-γ的時效關(guān)系

注：①同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)相間小寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，肩標(biāo)相同小寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05)；②同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰大寫字母表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)相間大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，肩標(biāo)相同大寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05)。

Note：① In the same row, values with adjacent small letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate small letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05);② In the same column, values with adjacent capital letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate capital letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05).

2.5 IL-2對布魯菌侵染腹腔巨噬細(xì)胞后釋放NO的時效關(guān)系

由表5可知，MΦ被M5侵染0 h時，各不同含量組IL-2作用下，血清中NO含量與對照組0 IU相比，均無顯著差異(P>0.05)；含量組為1×106IU和5×106IU時，分別培養(yǎng)6、12、24 h后，血清中NO含量顯著高于對照組0 IU含量(P<0.05)；且在IL-2含量為5×106IU，培養(yǎng)12 h血清中NO含量達到最大，MΦ的免疫應(yīng)答能力達到最佳。

IL-2含量組為1×106IU和5×106IU時，血清中NO含量隨著培養(yǎng)時間的增長而增加，且在培養(yǎng)12 h時MΦ 分泌NO的含量顯著高于對照組0 h的含量(P<0.05)，達到峰值，高于相鄰的2個時間點。結(jié)果說明在IL-2作用下，MΦ 分泌NO的的能力具有雙向調(diào)節(jié)性，并存在時間依賴性。

表5 IL-2調(diào)節(jié)作用下被M5侵染的腹腔巨噬細(xì)胞釋放NO的時效關(guān)系

注：①同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰小寫字母表示差異顯著(P<0.05),肩標(biāo)相間小寫字母表示差異極顯著(P<0.01),肩標(biāo)相同小寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05);②同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)相鄰大寫字母表示差異顯著(P<0.05),肩標(biāo)相間大寫字母表示差異極顯著(P<0.01),肩標(biāo)相同大寫字母或無字母標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05)。

Note：① In the same row, values with adjacent small letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate small letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05);② In the same column, values with adjacent capital letters mean significant difference (P< 0.05),with alternate capital letters mean extremely significant difference (P< 0.01),and with the same or no letters mean no significant difference (P> 0.05).

3 討論

巨噬細(xì)胞是炎癥反應(yīng)過程中的關(guān)鍵免疫細(xì)胞，不同炎癥反應(yīng)階段，巨噬細(xì)胞發(fā)揮不同甚至相反的功能。本研究中采用不同含量IL-2在不同時間點作用巨噬細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)隨著IL-2含量的增加，巨噬細(xì)胞的吞噬能力在不斷增加[13]，且IL-2含量越大，吞噬M5的能力越強，表明IL-2在一定程度上對巨噬細(xì)胞的吞噬能力有促進作用。在時間點上雖然也存在一定的依賴性，但胞內(nèi)活菌數(shù)呈現(xiàn)一定的“波浪式”規(guī)律，大膽猜想認(rèn)為IL-2對巨噬細(xì)胞的增殖或凋亡能力也有一定的影響，有待于進一步研究。

TNF-α是一個具有多重功能的細(xì)胞因子，具有免疫調(diào)節(jié)作用[14]，在炎癥反應(yīng)、機體防御中起著關(guān)鍵的作用。TNF在腫瘤作用方面有利有弊：①TNF是一個內(nèi)源性的腫瘤促進因素，它可以刺激腫瘤細(xì)胞生長[15]，增殖，侵襲，轉(zhuǎn)移，血管生成；②TNF又有殺腫瘤細(xì)胞的作用?；罨蟮腗Φ能分泌大量的趨化因子和炎癥因子，參與機體固有和獲得性免疫調(diào)節(jié)。近年來的一些研究表明，近百種的活性物質(zhì)被活化的MΦ產(chǎn)生，如TNF-α、NO等，其中許多與免疫應(yīng)答及炎癥有關(guān)[16]。TNF-α的出現(xiàn)能誘發(fā)機體代謝和血流動力學(xué)明顯變化，促進炎癥介質(zhì)生成。IFN是一種廣譜抗病毒劑，但它并不直接作用病毒，使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白，主要是通過細(xì)胞表面受體作用，以此增強巨噬細(xì)胞的活力，起到免疫調(diào)節(jié)作用[17-18]。IFN是一組有多種功能的活性蛋白質(zhì)(主要是糖蛋白)，它們在同種細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長，以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性[19]。有研究發(fā)現(xiàn)IFN-γ可顯著增強MΦ FcγR表達，以此提高MΦ的吞噬能力。另有資料表明單獨用IFN-γ刺激MΦ時，在一定劑量范圍內(nèi)可使MΦ由靜止態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)閼?yīng)答態(tài)，成為致敏性的MΦ，然后在脂多糖或某些細(xì)胞因子作用下轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨腗Φ。NO能夠降低疼痛和一些炎癥反應(yīng)，具有很強的抗炎作用。NO主要由NO合酶(NOS)催化產(chǎn)生，誘生型NO合酶存在MΦ內(nèi)，在受到抗原或LPS等激活時，MΦ產(chǎn)生IL-1、TNF-α等因子[20]，以自分泌或旁分泌方式協(xié)同LPS誘導(dǎo)MΦ中iNOS的表達；Erdogan等研究發(fā)現(xiàn)大鼠布魯菌感染模型中，肝臟和脾臟中NO濃度顯著升高，而血漿中并不發(fā)生顯著變化。

通過本試驗數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，在IL-2濃度組為5×106IU作用下，MΦ被M5侵染2 h時，血清中TNF-α的含量達到最大值，大大提高了巨噬細(xì)胞的免疫應(yīng)答作用，表明了IL-2能夠促進MΦ活化，加強其分泌因子的能力，且存在著時間和濃度上的依賴性，還能夠啟動炎癥反應(yīng)的發(fā)生。在IL-2的調(diào)節(jié)作用下，血清中IFN-γ的含量無論從時間上還是IL-2濃度上，都可以看出，與對照組相比有顯著性的增加，從另一方面也證明了IL-2可以增強MΦ的免疫作用；但是這個顯著性的增加并沒呈現(xiàn)嚴(yán)格規(guī)律性，可能與一些其他因子的影響有關(guān)，如IL-6，有待于進一步的探討研究；在IL-2作用下，血清中NO含量存在差異性，但這種差異性并不是很大，即在一定程度上IL-2可以促進MΦ的活化，對NO的產(chǎn)生的作用是有限的，對機體免疫力的提高并沒有所期望的效果。

本研究結(jié)果表明，IL-2可以促進MΦ活化,刺激MΦ使其分泌TNF-α、NO、IFN-γ的能力增強，參與抗布魯菌的免疫應(yīng)答，從而為臨床運用IL-2研究及治療布病提供新的思路和理論依據(jù)。IL-2能在一定程度上增強巨噬細(xì)胞的吞噬能力，存在著含量依賴性，且在含量和時間點亦具有雙向調(diào)節(jié)性，含量過高時反而有一定程度的抑制作用，可能是由于IL-2對巨噬細(xì)胞的增殖或凋亡能力也有一定的影響，有待于進一步研究。

參考文獻：

[1] 翟志敏.IL-2對免疫激活和免疫耐受的雙向調(diào)節(jié)作用[J].中國藥理學(xué)通報，2013，29(3)：319-322.

[2] 王媛媛，李兆明，李旭東，等.IL-2、IL-6及TNF-α在結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤鼻型患者血清中的表達及臨床意義[J].中國癌癥雜志，2015，25(5)：377-381.

[3] 亓文靜，李 巖，王 玉，等.IL-2通過Jak3-Stat5通路促進巨噬細(xì)胞M1極化[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2015，35(8)：1055-1060.

[4] 王若天，孟明耀，李 鵬，等.IL-2和IL-15誘導(dǎo)的CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療直腸和結(jié)腸癌的臨床療效[J].昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2014，35(11)：97-101.

[5] 賈春麗，楊 穎，李志鵬，等.IL-2聯(lián)合順鉑治療惡性胸腔積液的有效性及安全性Meta分析[J].海南醫(yī)學(xué)，2017，28(5)：839-843.

[6] 楊榮敏，段相國，陳 建，等.血清IL-2、TNF-α及IL-13在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷與治療中的臨床意義[J].現(xiàn)代免疫學(xué)，2017，37(1)：44-49.

[7] Roviello G,Zanotti L,Correale P,et al.Is still there a role for IL-2 for solid tumors other than melanoma or renal cancer?[J].Immunotherapy,2017,9(1):25-32.

[8] Abhishek K S,Chakravarti A,Baveja C P,et al.Association of interleukin-2,-4 and -10 with dengue severity.[J].Indian J Pathol Microbiol,2017,60(1):66-69.

[9] 熊一全，黃 韜，趙向旺，等.白細(xì)胞介素-2增強淋巴細(xì)胞對乳腺癌細(xì)胞的殺傷作用[J].中華實驗外科雜志，2015，32(5)：990-992.

[10] Atluri V L,Xavier M N,Jong M F D,et al.Interactions of the human pathogenicBrucellaspecies with their hosts[J].Annu Rev Microbiol,2011,65(1):523-541.

[11] 李 高，蔡仁中，蔡用清，等.肺癌患者血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α、NKG2D的表達及臨床意義[J].海南醫(yī)學(xué)，2015，26(12)：1728-1731.

[12] 戴 春，周永春，黃云超，等.非小細(xì)胞肺癌患者血清中細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10)的含量與臨床分期的關(guān)系[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2015，23(6)：779-781.

[13] 李桉琪，祁元明，周哲駿，等.不同濃度IL-2對體外誘導(dǎo)肽特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系的影響[J].中國癌癥雜志，2016，26(6)：756-762.

[14] Lin X H,Kashima Y,Khan M,et al.Short comminication:An immunohistochemical study of TNF-α in optic nerves from AIDS patients[J].Curr Eye Res,1997,16(10):1064-1068.

[15] Starke R M,Chalouhi N,Ali M S,et al.190 critical role of TNF-α in cerebral aneurysm formation and rupture[J].Neurosurgery,2013,60:183.

[16] 陳 英，張文玲，黃 濤，等.炎癥因子TNF-α、IL-6、IL-17與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎并發(fā)動脈粥樣硬化的關(guān)系[J].免疫學(xué)雜志，2017，33(3)：268-272.

[17] 涂 浩，趙星燦，楊占娜，等.豬重組IL-2、IL-4和IFN-γ對口蹄疫合成肽疫苗的免疫增強作用研究[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2015，46(8)：1390-1399.

[18] Tanaka S,Furuya K,Yamamoto K,et al.Procyanidin B2 gallates inhibit IFN-γ and IL-17 production in T cells by suppressing T-bet and RORγt expression[J].Int Immunopharmacol,2017,44:87-96.

[19] Liu W,Liu X,Luo M,et al.dNK derived IFN-γ mediates VSMC migration and apoptosis via the induction of LncRNA MEG3:A role in uterovascular transformation[J].Placenta,2017,50:32-39.

[20] 鄺高艷，嚴(yán) 可，柴 爽，等.加味獨活寄生合劑治療膝骨關(guān)節(jié)炎臨床療效及對關(guān)節(jié)液中IL-1，IL-6，TNF-α及NO的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2017，23(1)：174-178.