馬廣瑩，史小華，鄒清成，田丹青，朱開元，詹 菁，周江華

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學院 花卉研究開發(fā)中心，浙江 杭州 311202； 2.杭州市蕭山技師學院，浙江 杭州 311202)

玉簪屬(Hosta)植物屬于天門冬科植物，是我國傳統(tǒng)名花。我國有2個原生種，分別為玉簪(Hostaplantaginea)和紫萼(Hostaventricosa)[1]。韓國和日本也有分布，其中韓國產(chǎn)大約11個種和變種[2]，日本產(chǎn)大約18個種和7個變種[3]。有研究認為，中國兩個玉簪屬植物200多年前傳播到歐洲，開始了玉簪在花園中的大量應用[4]。據(jù)美國玉簪協(xié)會的初步統(tǒng)計，目前玉簪屬園藝品種至少有3 000多個,成為世界范圍內(nèi)重要的宿根花卉。

近年來，圍繞玉簪的栽培、育種、起源、生理生化等內(nèi)容，國內(nèi)外學者開展了大量研究。Kim等[5]研究了在不同溫度下一種韓國玉簪(Hostayingeri)的種子萌發(fā)情況，認為該種種子萌發(fā)對溫度不敏感，而其4周幼苗在長日照條件下需要至少26周才能達到50%的開花量。Kanazawa等[6]通過研究認為，圓葉玉簪(Hostasieboldiana)的種子降低含水量會延長其壽命，而含水量低至5%～10%的種子，在-20 ℃條件下貯藏比5 ℃更容易失去活力。Liu等[7]對46個玉簪種和品種進行了花器官花香成分測定，認為芳樟醇類物質(zhì)是影響玉簪花香的主要成分，而各類花器官中芳香物質(zhì)的種類是一樣的，只是在含量上略有差異。在栽培應用方面；Liu等[8-9]對已搜集到的玉簪品種的葉片多樣性及光照水平對玉簪生長和觀賞性狀的影響做了比較研究，對雜交育種和栽培應用奠定了基礎。此外，玉簪原產(chǎn)地的種質(zhì)調(diào)查和品種起源有了新的進展，Shimasaki等[10]闡明了日本四國島上原種玉簪的具體分布位置，Lee等[11]在葉綠體DNA水平對31個玉簪品種進行了分析，探討了它們的親本起源。

國內(nèi)科研機構(gòu)則對與玉簪屬植物的抗逆生理和栽培生理問題進行了大量研究，夏宜平等[12]較早對花葉玉簪嵌合體的生理機制進行了研究，從細胞學水平解析了花葉的形成機理。張金政等[13]對氮素水平和光強互作在玉簪生長發(fā)育上的影響進行了研究，得出了同一光照強度下，玉簪生長發(fā)育最大量的氮素需求量。張金政等[14]對東北玉簪和紫萼的抗旱能力進行了評價，各種生理指標綜合分析認為東北玉簪抗旱能力強于紫萼。李金鵬等[15]對彩葉玉簪的光強需求進行了研究，認為要保持彩葉玉簪的最佳生長和觀賞狀態(tài)，30%～50%的透光率最有效。羅良旭等[16]在酸雨和鎘污染條件下對紫萼的生理生態(tài)響應進行了研究，該工作對復合污染地區(qū)的生態(tài)修復提供了參考價值。

綜上所述，國內(nèi)外對玉簪屬植物的研究廣泛，從植物學到園藝學領(lǐng)域都有涉及，但是對于玉簪作為食品開發(fā)的研究較少，而玉簪屬植物在日本、韓國有著悠久的食用歷史[17-19]，在我國卻幾乎是空白。為了拓寬玉簪的經(jīng)濟價值，本研究從營養(yǎng)學領(lǐng)域經(jīng)常涉及的指標著手，開展了8個玉簪品種的營養(yǎng)測定和評價，以期通過數(shù)據(jù)的分析，為我國開發(fā)景觀、食用功效俱佳的多用途玉簪品種提供借鑒和參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

本研究所用植物材料為雜交園藝品種，全部購自浙江虹越花卉有限公司，4年生組培苗，起壟地栽，壟高15 cm，株行距50 cm×50 cm。萌芽至取樣階段全光照。選取生長健壯，無病蟲害，生長發(fā)育階段屬于圖1所示第3階段，即葉片剛剛外展時從基部割取，生化指標均采用3次重復，干冰保存?zhèn)溆谩Ｓ耵⑸L第3階段株高測量采用5次重復。

A為標尺=0.75 cm; B為標尺=0.55 cm; C為標尺=0.43 cm; D為標尺=0.19 cm圖1 玉簪葉片的不同發(fā)育階段

1.2 方法

對總共21個生化指標進行了測試，均采用蘇州科銘生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的試劑或試劑盒，其中總糖含量采用3,5-二硝基水楊酸法(試劑或試劑盒編號ZT-1-Y，下同)，可溶性糖含量采用蒽酮比色法(KT-1-Y)，淀粉含量采用蒽酮比色法(DF-1-Y)，單寧含量采用磷鉬酸比色法(DN-1-Y)，總酸含量采用滴定法(ZS-1-Y)，類胡蘿卜素含量采用可見分光光度法(CAR-1-G)，水分含量采用烘箱干燥法(SF-1-Y)，總酚含量采用鎢鉬酸比色法(TP-1-G)，類黃酮含量采用鋁離子比色法(LHT-1-G)，氨基酸含量采用茚三酮比色法(AA-1-W)，全氮含量采用凱氏定氮法(PQD-1-Z)，全鉀含量采用火焰分光光度法(PQJ-1-Z)，全鈣含量采用火焰分光光度法(PQG-1-Z)，粗纖維含量采用重量法(CXW-1-T)，抗氧化能力測試(T-AOC)采用血漿鐵還原能力法(ferric reducing ability of plasma，F(xiàn)RAP)(TAOC-1-G)。葡萄糖、果糖、蔗糖均含量采用高效液相色譜法(PT-4-Y,GT-4-Y,ZT-4-Y),包括樣品前處理：稱取約0.2 g組織，加入1 mL超純水，勻漿，倒入2 mL EP管中，超聲浸提30 min，8 000g4 ℃離心10 min，取上清液，調(diào)pH值至5～9，水系針頭式過濾器過濾后待測；HPLC液相條件:Rigol L3000高效液相色譜儀，糖柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)，示差檢測器，流動相：水，進樣量10 μL，流速0.6 mL·min-1，柱溫80 ℃，走樣時間為40 min，最后用流動相過柱子，待基線穩(wěn)定后開始加樣。綠原酸含量采用高效液相色譜法(CZA-4-Z)，方法概括為：稱取0.1 g樣本，放入研缽中磨碎，加入1 mL預冷的1%的磷酸水溶液(需快速研磨，防止溶劑揮發(fā))，將液體移入EP管內(nèi)，超聲提取60 min。10 000g離心10 min，提取上清液定容到1 mL，取適量溶液用針頭式過濾器過濾于帶有內(nèi)襯管的樣品瓶內(nèi)待測。HPLC液相條件:Rigol L3000高效液相色譜儀，Kromasil C18反相色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流動相的配制：A：在1 000 mL超純水中加入10 mL乙酸配置成1%的乙酸水溶液一瓶。B：1 000 mL甲醇一瓶。開啟電腦、檢測器和泵，安裝上色譜柱，打開軟件，在方法組中設置進樣量10 μL，流速1 mL·min-1，柱溫30 ℃，波長327 nm，走樣時間為60 min，用流動相過柱子，待基線穩(wěn)定后開始加樣。維生素C、維生素E含量采用高效液相色譜法(ASA-4-C)、(VE-4-C)，維生素C測試條件：稱取0.1 g樣本，放入研缽中磨碎，加入1 mL預冷的1%磷酸溶液(需快速研磨，防止溶劑揮發(fā))，將液體移入EP管內(nèi)，10 000g離心10 min，提取上清液定容到1 mL，取適量溶液用針頭式過濾器過濾于帶有內(nèi)襯管的樣品瓶內(nèi)待測，HPLC液相條件：Rigol L3000高效液相色譜儀，Kromasil C18反相色譜柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)，流動相的配制：A：在1 000 mL超純水中加入1 mL乙酸配置成0.1%的乙酸水溶液一瓶；B：1 000 ml甲醇一瓶。開啟電腦、檢測器和泵，安裝上色譜柱，打開軟件，在方法組中設置進樣量10 μL，流速1 mL·min-1，柱溫25 ℃，波長245 nm，走樣時間為15 min，用流動相過柱子，待基線穩(wěn)定后開始加樣。維生素E的測試方法為：稱取1 g樣本(分兩管EP管)，各加入1 mL乙醇(需快速研磨，防止溶劑揮發(fā))，整個過程注意低溫、避光、迅速。將液體轉(zhuǎn)移入EP管內(nèi)，用乙醇補足提取液至1.5 mL。在50 ℃金屬浴中，振蕩提取30 min，取下冷卻至室溫，8 000g離心10 min，合并兩次上清液至10 mL的EP管中。向10 mL的EP管中加入1 mL 10% NaCl水溶液，正己烷5 mL，快速混勻，漩渦振蕩1 min，靜置分層，取正己烷層并轉(zhuǎn)移到新EP管中，剩下的液體再重復上述步驟，合并2次正己烷層，氮吹吹干，用0.5 mL流動相復溶，用針頭式過濾器過濾于帶有內(nèi)襯管的樣品瓶內(nèi)待測，HPLC液相條件：Rigol L3000高效液相色譜儀，YMC Carotenoid色譜柱(250 mm×4.6 mml.D. S-5 μm)，流動相的配制：在950 mL超甲醇中加入50 mL乙酸乙酯配置成體積比95∶5的溶液一瓶。開啟電腦、檢測器和泵，安裝上色譜柱，打開軟件，在方法組中設置進樣量10 μL，流速1 mL·min-1，柱溫25 ℃，波長275 nm，走樣時間為20 min，用流動相過柱子，待基線穩(wěn)定后開始加樣。具體操作樣按照試劑或試劑盒使用說明。

1.3 實驗儀器

本測試所用到的主要儀器有全波長酶標儀Multiskan GO 1510(Thermo，芬蘭)，鼓風干燥機DHG-9035A(慧泰儀器，中國)，消解儀S402(海能儀器，中國)，離心機MIRCOCL 17R(Thermo，德國)，火焰光度計FP6431(儀電分析儀器，中國)，天平AX205DR(METTLER TOLEDO，瑞士)，紫外可見分光光度計UV-3000(MAPADA，中國)，高效液相色譜儀Rigol L3000(普源精電儀器，中國)等。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2003和SPSS 10.0軟件進行試驗數(shù)據(jù)處理分析，用Duncan新復極差法進行顯著性分析。采用模糊數(shù)學的隸屬函數(shù)法綜合分析不同品種玉簪營養(yǎng)品質(zhì)差異[20]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同玉簪品種葉束高度

為了更好地區(qū)分不同玉簪品種的生長發(fā)育階段，將玉簪的葉片發(fā)育階段分為4個階段。取樣時期為第3階段，即葉束剛剛展開之際。將該發(fā)育階段的玉簪任選5束進行高度測量，白邊波葉、優(yōu)雅、德爾塔黎明、巨無霸、鑲邊的街道、春色、皇標、金葉的葉束高度分別為(15.84±0.72)cm、(19.62±1.54)cm、(18.78±1.05)cm、(24.86±1.47)cm、(23.80±0.76)cm、(15.46±1.01)cm、(26.38±0.79)cm和(14.92±0.55)cm。8個玉簪品種在發(fā)育第3階段的高度從大到小依次為：皇標>巨無霸>鑲邊的街道>優(yōu)雅>德爾塔黎明>白邊波葉>春色>金葉。同一發(fā)育階段的葉束高度，間接反映了該品種的長勢和生物量大小。

2.2 基礎指標含量

對8個玉簪品種的水分含量、粗蛋白含量、粗纖維含量進行了測定，結(jié)果如表1。結(jié)果顯示，8個玉簪品種的水分含量均在0.86 g·g-1以上，品種巨無霸的水分含量甚至達到(0.90±0.02)g·g-1，為8個品種中最高值。各品種的粗蛋白含量差異較大，數(shù)值最高者來自品種德爾塔黎明，含量為(3.94±0.07)mg·g-1；含量最低者來自品種巨無霸，含量為(1.08±0.11)mg·g-1，相差近4倍。粗纖維含量最高者為品種白邊波葉，數(shù)值為(12.7±0.1)g·kg-1；含量最低者為品種皇標，數(shù)值為(6.8±0.7)g·kg-1，說明如果作為蔬菜食用，皇標的口感較其他品種細膩、不粗糙。

表1 不同玉簪品種水分含量、粗蛋白、粗纖維的比較

注：同列不同行數(shù)據(jù)后沒有相同小寫字母表示差異顯著(P≤0.05)。表2～3同。

2.3 各種糖類成分含量

對8個玉簪品種的糖類成分進行了測定，結(jié)果見表2。所測玉簪品種中，白邊波葉的淀粉含量最低，為(0.35±0.03)mg·g-1；春色的淀粉含量最高，為(0.42±0.02)mg·g-1，其余品種間淀粉含量差異不顯著?？偺呛孔罡哒邽榛蕵耍_到(24.60±0.43)mg·g-1；含量最低者為巨無霸，僅為(18.77±0.72)mg·g-1。從可溶性糖含量來看，皇標含量最高，其次為春色、德爾塔黎明；從蔗糖和果糖含量來看，皇標、德爾塔黎明分別為含量最高者，如果可食用，二者口感應較佳。

表2 不同玉簪品種淀粉、總糖、可溶性糖、蔗糖、葡萄糖、果糖含量測定

2.4 部分風味或營養(yǎng)成分指標

表3結(jié)果顯示，8個玉簪品種中，德爾塔黎明的總酚含量遠高于其他品種，其次為金葉和優(yōu)雅，但均與德爾塔黎明存在顯著差異；該指標含量最低者為巨無霸。鑲邊的街道的類黃酮含量最高，其次為白邊波葉和金葉，但三品種間數(shù)值差異不顯著；含量最低者為優(yōu)雅，其數(shù)值與上述三個品種存在顯著差異。品種皇標的類胡蘿卜素含量遠高于其他品種，甚至比排序第二的鑲邊的街道和第三的春色數(shù)值之和還要高，且三者數(shù)值存在顯著性差異；該指標含量最低者為優(yōu)雅。德爾塔黎明的單寧含量在8個品種中最高，其次為皇標，但二者數(shù)值存在顯著差異；該指標含量最低者為金葉，數(shù)值與其他品種也存在顯著差異。金葉的氨基酸含量遠高于其他品種，含量次之的春色與金葉相比也存在顯著差異；氨基酸含量最低的品種為優(yōu)雅，與最高品種的數(shù)值相差近5倍?？偹嶂笜酥?，德爾塔黎明含量最高，與含量次之的皇標比較，數(shù)值差異不顯著，但與并列第三名的白邊波葉和優(yōu)雅比較，差異顯著；8個品種中總酸含量最低者為巨無霸。

表3 不同玉簪品種總酚、類黃酮、類胡蘿卜素、單寧、總氨基酸、總酸含量的比較

本研究測定了兩種礦物質(zhì)元素的含量，其中總鉀含量最高的品種為鑲邊的街道，其次為德爾塔黎明，二者數(shù)值差異不顯著；該指標含量最低的品種為巨無霸，與上述品種差異顯著。而總鈣含量最高的品種為金葉，其次為皇標，二者數(shù)值差異也不顯著；含量最低者為白邊波葉，與上述兩品種差異顯著。綠原酸含量最高的品種為鑲邊的街道，其次為皇標，二者存在顯著性差異；該指標含量最低者為金葉和春色，二者差異不顯著，但與其他品種比較，均存在顯著性差異。品種金葉的維生素E含量最高，其次為皇標，二者數(shù)值存在顯著性差異；含量最低的品種為優(yōu)雅。維生素C含量最高的品種為德爾塔黎明和優(yōu)雅，二者數(shù)值差異不顯著；而含量最低的品種為金葉，最高和最低含量數(shù)值之間存在近6倍的差異。

2.5 抗氧化能力

為了分析不同玉簪品種間抗氧化能力的高低，本研究采用血漿鐵還原能力法(FRAP)對8個品種玉簪的總抗氧化能力進行了初步分析，白邊波葉、春色、德爾塔黎明、皇標、金葉、巨無霸、鑲邊的街道、優(yōu)雅的總抗氧化能力為(31.12±1.82)U·g-1、(32.76±0.27)U·g-1、(51.72±0.43)U·g-1、(32.45±0.71)U·g-1、(34.95±0.65)U·g-1、(40.79±0.57)U·g-1、(35.81±0.61)U·g-1和(54.18±0.93)U·g-1。數(shù)據(jù)顯示，在測定的品種中，優(yōu)雅的抗氧化能力最強，其次為德爾塔黎明，二者數(shù)值存在顯著性差異；該指標數(shù)值最低者為白邊波葉，數(shù)值排名為優(yōu)雅>德爾塔黎明>巨無霸>鑲邊的街道>金葉>春色>皇標>白邊波葉。

2.6 不同玉簪品種主要營養(yǎng)成分的綜合評價

采用隸屬函數(shù)法對8個玉簪品種涉及營養(yǎng)、風味、口感等的主要指標進行了綜合評價，各指標賦予相同的權(quán)重值，并且均采用隸屬函數(shù)公示計算其函數(shù)值，以綜合評價供試品種的開發(fā)利用價值，結(jié)果見表4。數(shù)據(jù)顯示，8個玉簪品種的隸屬函數(shù)值平均值排名，德爾塔黎明位居首位，其在總酚、單寧、粗蛋白、維生素C含量方面表現(xiàn)最為突出，其次為鑲邊的街道，該品種在類黃酮、全鉀、綠原酸含量方面表現(xiàn)突出；而排名最后者為巨無霸，該品種只在含水量方面表現(xiàn)突出。綜合評價結(jié)果由高到低依次為德爾塔黎明>鑲邊的街道>皇標>金葉≥春色>優(yōu)雅>白邊波葉>巨無霸。

表4 隸屬函數(shù)法對不同玉簪品種進行綜合評價分析

3 討論

玉簪是我國傳統(tǒng)名花，也是一味歷史悠久的中藥材，雖然栽培年代久遠，但是原產(chǎn)種類只有2種，園藝品種多為進口。Chung等[2-3]的研究認為，韓國和日本擁有較多的玉簪原種，并且具有較長的食用歷史。但是現(xiàn)有文獻并未有系統(tǒng)研究玉簪營養(yǎng)成分和品質(zhì)的相關(guān)報道。本研究選取8個玉簪品種，對其營養(yǎng)、品質(zhì)相關(guān)的21個生理生化指標和1個形態(tài)學指標進行了測定分析，其中葉束發(fā)育階段的劃分為本研究取樣時機確定了標準，也為今后同類研究提供了重要參考。粗纖維被認為是食品中重要的營養(yǎng)物質(zhì)，并且是直接影響食品口感的成分[21]。本研究中8個玉簪品種粗纖維含量差異較大，綜合評價分析前三位中，只有鑲邊的街道粗纖維含量較高，德爾塔黎明和皇標含量都較低，口感較細膩。

一般認為，糖既是果蔬品質(zhì)和風味物質(zhì)的主要成分[22]，也是植物抗逆生理中重要的調(diào)節(jié)物質(zhì)[23]。本研究針對總糖、淀粉、總可溶性糖以及3種重要甜味糖進行了含量測定。8個玉簪品種，總糖含量最高值為(24.60±0.43)mg·g-1，而有報道指在自然地力條件下，萵筍葉片的總糖含量最高為(22.3±0.13)mg·g-1[24]；蔗糖、葡萄糖、果糖最高含量分別為(6.55±0.03)mg·g-1、(2.85±0.04)mg·g-1、(3.74±0.34)mg·g-1，而萵筍葉片上述指標含量均略高于玉簪品種[24]，可見部分玉簪品種具備一定的食用開發(fā)前景。類黃酮是重要的生物次生代謝物質(zhì)，在產(chǎn)品色澤、風味、提高人體生理機能等方面具有重要作用[25]。本研究中品種鑲邊的街道的類黃酮含量高達(3.8±0.13)mg·g-1，而參試品種中含量最低者也有(2.28±0.23)mg·g-1，而具有高營養(yǎng)和保健價值的紅肉蘋果的類黃酮含量為3.0 mg·g-1左右[26]，可見玉簪葉片中類黃酮含量較高。單寧是植物體內(nèi)一種多酚類物質(zhì)，果蔬中含量過多會導致口感苦澀，但是該物質(zhì)對抗氧化等生理功能具有重要作用[27]，含量適中則對品質(zhì)提升具有積極意義。本研究中測定的8個玉簪品種中，單寧含量在102～157 μg·g-1，遠低于前人測定的不同柿品種和麻筍等果蔬中的含量[28-29]，因而不會顯著影響口感。

本研究中，8個玉簪品種全鉀的含量在1.71～2.84 mg·g-1，而前人研究結(jié)果顯示，常見蔬菜萵筍、菠菜、大白菜等全鉀的含量在1.50～2.20 mg·g-1[30]；本研究中全鈣的含量在2.42～3.33 mg·g-1，前人研究指萵筍、西芹、菠菜、甘藍等新鮮蔬菜全鈣含量都不超過2.0 mg·g-1[30]。通過比較，可見玉簪幼嫩葉束在全鉀、全鈣含量兩項指標上同樣具備新型蔬菜開發(fā)潛力。但8個玉簪品種的維生素C含量均低于100 μg·g-1，明顯低于常見蔬菜生菜等的含量[31]；而維生素E的含量也低于多數(shù)水果，只略高于菠蘿中的含量[32]，說明玉簪幼嫩葉束中維生素含量偏低。

隸屬函數(shù)分析法是一種簡單但實用的綜合評價測試指標的方法[20]。本研究采用此方法對不同玉簪主要營養(yǎng)指標和抗氧化性能指標等進行了綜合測評，按照數(shù)值高低得出，德爾塔黎明、鑲邊的街道、皇標三個品種在綜合得分中位列前三位，具備一定的營養(yǎng)優(yōu)勢。但單寧含量和粗纖維含量對玉簪嫩葉的口感和營養(yǎng)功效等的影響尚未明確，故而本方法未對這2個指標進行反隸屬函數(shù)分析。近年來，在牡丹[33]、芍藥[34]等觀賞植物上進行深加工，提高產(chǎn)品附加值的研究取得了重要進展，今后將對8個玉簪品種的有毒有害成分進行測定分析，以期為其作為果蔬的食用性開發(fā)提供理論參考。

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