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        諾如病毒簡介

        2018-05-15 02:11:54王春艷翟心慧
        生物學(xué)通報(bào) 2018年7期
        關(guān)鍵詞:檢測方法

        王春艷 翟心慧

        (河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 河南新鄉(xiāng) 453007)

        1 諾如病毒的由來

        諾如病毒又稱諾瓦克病毒,諾瓦克是美國俄亥俄州的一個小鎮(zhèn),1968年冬天,該小鎮(zhèn)暴發(fā)了一起急性腸胃炎事件,導(dǎo)致學(xué)校半數(shù)以上學(xué)生出現(xiàn)急性嘔吐、腹瀉等癥狀。直到1972年,美國學(xué)者Kapikipn 采用免疫電鏡的方法證實(shí)4年前暴發(fā)的急性腸胃炎是由病毒感染引起的,并將該病毒命名為諾瓦克病毒[1]。后來,各國科學(xué)家相繼發(fā)現(xiàn)類似的病毒樣顆粒,統(tǒng)稱為諾瓦克樣病毒。2002年8月,國際病毒分類委員會將該類病毒統(tǒng)一更名為諾如病毒。

        2 諾如病毒的生物學(xué)性狀

        諾如病毒隸屬杯狀病毒科,顆粒呈20 面體對稱的球形,直徑為27~35 nm,無囊膜。其基因組是單股正鏈RNA,全長約7.5 kb,編碼區(qū)分為3 個開放閱讀框(open reading frames,ORF),從5′端到3′端依次是ORF1、ORF2、ORF3[2],見圖1。ORF1 編碼一個大的非結(jié)構(gòu)蛋白, 經(jīng)翻譯后修飾成6 個小的 功 能 蛋 白:P48、NTPase、P22、VPg、3C 樣 蛋 白、RNA 依賴性RNA 聚合酶(RdRP),在病毒基因組復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程中發(fā)揮作用。ORF2、ORF3 分別編碼主要衣殼蛋白VP1 和次要衣殼蛋白VP2[3]。 其中VP1 包括組成內(nèi)殼的S 結(jié)構(gòu)域和突出在外圍的P 結(jié)構(gòu)域,其中P 結(jié)構(gòu)域易發(fā)生變異,決定了諾如病毒的抗原性。 根據(jù)VP1 編碼序列的不同,可將諾如病毒分為6 個基因組(GI~GⅥ)和超過40 個基因型,其中GⅠ、GⅡ和GⅣ主要感染人,GⅢ和GⅤ分別感染豬、牛和鼠。 感染人的諾如病毒中GⅡ型比GⅠ型更加流行,世界范圍內(nèi)人諾如病毒的爆發(fā)幾乎都與GⅡ.4 型及其變異株有關(guān)[4-5]。

        3 諾如病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測

        目前,在實(shí)驗(yàn)室中對諾如病毒的檢測主要有電鏡法、免疫學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。

        3.1 電鏡法 電鏡法根據(jù)病毒顆粒的形態(tài)進(jìn)行檢測的方法,由于諾如病毒在電鏡下的形態(tài)學(xué)特征不明顯,且病毒量常不足,因此電鏡檢測法的靈敏度較低,不適合臨床檢測使用。

        3.2 免疫學(xué)檢測方法 免疫學(xué)方法主要是利用抗原-抗體的反應(yīng)實(shí)現(xiàn)對病原體的檢測,該方法的靈敏度和特異性受抗原與抗體的親和力差異性的影響。 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)和免疫層析技術(shù)是檢測諾如病毒時(shí)常用的兩大技術(shù),前者特異性強(qiáng)、靈敏度高,但成本也較高,對單克隆抗體的準(zhǔn)確識別有嚴(yán)格要求[6];后者操作簡便、用時(shí)短、便于肉眼觀察,但是其靈敏度和特異性不高[7]。

        3.3 分子生物學(xué)方法 目前,基于檢測病毒核酸的分子生物學(xué)方法成為實(shí)驗(yàn)室中檢測諾如病毒的常用方法,主要包括逆轉(zhuǎn)錄PCR 技術(shù)(Reverse transcription RT-PCR)和核酸探針雜交技術(shù)。 其中RT-PCR 技術(shù)被認(rèn)為是檢測諾如病毒的金標(biāo)準(zhǔn),主要有:常規(guī)RT-PCR 技術(shù)、多重RT-PCR 技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR 技術(shù)。常規(guī)RT-PCR 技術(shù)易于操作,靈敏度高,經(jīng)濟(jì)實(shí)用,應(yīng)用廣泛; 多重RT-PCR 技術(shù)可同時(shí)檢測不同類型的病毒,減少反應(yīng)次數(shù),節(jié)約時(shí)間,但靈敏度較低[8];實(shí)時(shí)熒光定量PCR 技術(shù)與常規(guī)RT-PCR 技術(shù)相比,靈敏度更高,且對不同濃度的病毒都適用[9]。

        4 諾如病毒感染的流行病學(xué)特征

        諾如病毒的傳播途徑主要有水源性傳播、食源性傳播和人與人直接接觸傳播。水源性傳播往往會引起食物污染,常見的果蔬(草莓、生菜等)和貝類(牡蠣、青口螺等)已被列為諾如病毒污染的高風(fēng)險(xiǎn)食品[10]。由于患者從發(fā)病到到康復(fù)后2 周內(nèi)的糞便和嘔吐物中均有病毒排出,故人與人間的傳播主要借助手-糞-口和嘔吐物的氣溶膠傳播[11]。

        諾如病毒的傳染性極強(qiáng),常引起急性胃腸炎,且多在冬季發(fā)生,故被稱為“胃腸道流感”或“冬季嘔吐癥”。 諾如病毒感染的潛伏期一般為24~48 h ,臨床表現(xiàn)為:嘔吐、腹瀉、腹痛、偶爾伴有發(fā)燒,兒童患者以嘔吐為主,成人患者以腹瀉為主,嚴(yán)重者可出現(xiàn)脫水癥狀。目前,尚無特效的抗病毒藥物治療,以對癥或支持治療為主,一般不需使用抗生素[11]。 患者病程2~3 d,具有自限性,愈后良好,但對于幼兒、老人和免疫抑制劑服用者易發(fā)生嚴(yán)重并發(fā)癥,應(yīng)注意及時(shí)輸液或口服補(bǔ)液,以糾正脫水、酸中毒及電解質(zhì)紊亂。

        5 諾如病毒的防控方法

        由于所有年齡人群對諾如病毒均敏感,所以其暴發(fā)環(huán)境主要是人口集中、半封閉的場所,如學(xué)校、醫(yī)院、餐館等,常引起公眾恐慌,因此在諾如病毒極易暴發(fā)的季節(jié),采取一定的防控措施是十分必要的。目前,主要采用以下幾種方法降低諾如病毒的感染率:①注意個人衛(wèi)生和食品衛(wèi)生:勤洗雙手,不喝生水,不吃生食(尤其是貝類),瓜果去皮食用,生熟食物分開避免交叉污染;②若有人員出現(xiàn)嘔吐、 腹瀉癥狀,應(yīng)主動遠(yuǎn)離人口集中的場所,減少疾病的傳播;③如需處理諾如病毒污染的物品、用具、地面、水源等,可將家用84 消毒液濃縮5~10 倍與污染物混合,等待10~20 min 后清理,可以佩戴口罩和手套進(jìn)行個人防護(hù)[12]。

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