楊長春
摘要:奶牛胚胎移植技術(shù)包括超數(shù)排卵、輸精和同期發(fā)情處理等一系列相互配合的過程,要求有很強(qiáng)的計(jì)劃性。首先作為供體和受體的母牛要嚴(yán)格選擇,并進(jìn)行處理。超排可采用各種方法來改進(jìn),要注意兩個(gè)主要問題:其一是促性腺激素的效力(純度、FSH與LH的比例)和由于超排程序與卵泡波出現(xiàn)之間的關(guān)系所引起的超排處理計(jì)劃與管理的復(fù)雜性。其二是在超排處理后不同動(dòng)物產(chǎn)生的卵母細(xì)胞及由此產(chǎn)生的胚胎數(shù)量和質(zhì)量存在固有的差異。超排后,要注意供體牛的管理。
關(guān)鍵詞:奶牛;超數(shù)排卵;同期發(fā)情;輸精
中圖分類號(hào):S823.3
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B
文章編號(hào):2095-9737(2018)03-0043-01
牛的超數(shù)排卵具有高度的不可預(yù)測性和可變性,因此超排處理的結(jié)果可能會(huì)引起供體飼養(yǎng)者和獸醫(yī)人員對(duì)該技術(shù)的失望。因此在實(shí)施胚胎移植計(jì)劃之前,從一開始就應(yīng)告知畜主關(guān)于超排的缺點(diǎn),在整個(gè)超排過程應(yīng)得到獸醫(yī)的指導(dǎo)。盡管如此,為了增加成功的可能性,還有大量的常規(guī)臨床和管理方法需要逐一進(jìn)行。
1 供體的選擇
選擇供體時(shí)的一個(gè)常規(guī)做法,就是對(duì)供體進(jìn)行仔細(xì)評(píng)估。供體應(yīng)當(dāng)處于能量正平衡狀態(tài),在分娩后失重的母牛尤其不適合用于超排。一般來說,用于超排的奶牛在開始超排前至少應(yīng)有兩個(gè)連續(xù)的正常發(fā)情周期,且無其他產(chǎn)科疾病。供體的年齡、胎次及季節(jié)(除熱應(yīng)激)對(duì)超排效果影響不大,但品種則有明顯影響。超排前,可采用超聲掃描法探測,以確保供體具有一定程度的卵泡發(fā)育活動(dòng),但是在開始采用激素處理時(shí),通過超聲波掃描觀察到的小卵泡和中等大小卵泡的數(shù)量與超排處理后的排卵數(shù)之間的相關(guān)性并不高。
2 標(biāo)準(zhǔn)超排程序
在開始用促性腺激素處理時(shí),獸醫(yī)人員必須肯定卵巢上有一個(gè)活躍的黃體。標(biāo)準(zhǔn)超排程序如下:在發(fā)情或排卵后9 -11天,當(dāng)?shù)诙€(gè)卵泡波出現(xiàn)時(shí),給供體注射eCG或FSH,每天2次,劑量遞減,連用3~4天。開始用超排激素處理后48—72 h,注射1—2次前列腺素誘導(dǎo)發(fā)情,發(fā)情一般發(fā)生在此后48 h內(nèi)。由于發(fā)情可能提前,因此建議在前列腺素處理后36 h開始仔細(xì)觀察供體的發(fā)情征狀。LH峰與發(fā)情同時(shí)出現(xiàn)在注射前列腺素處理后42—45 h,供體也將在此后24—30 h排卵。因此應(yīng)該在供體表現(xiàn)站立發(fā)情后12 h和24 h進(jìn)行2次輸精。研究表明,多次的輸精并無益處。
3 受體的選擇與管理
供體與受體發(fā)情的高度同步化對(duì)于獲得較高的受胎率是很重要的。受體應(yīng)間隔11天用前列腺素進(jìn)行2次處理,最后一次處理應(yīng)在供體處理前24 h進(jìn)行,主要是因?yàn)榕c供體相比,受體對(duì)發(fā)情的反應(yīng)時(shí)間較長。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因是供體雌激素(E2)升高的時(shí)間較早,其反過來會(huì)引發(fā)LH峰的提前出現(xiàn)。
4 改進(jìn)超排反應(yīng)的措施
人們通過改進(jìn)常規(guī)的發(fā)情周期中期超排處理方案及借助超聲波掃描技術(shù)獲得關(guān)于發(fā)情周期卵泡波出現(xiàn)模式的知識(shí),采用各種方法來改進(jìn)超排反應(yīng),這對(duì)設(shè)計(jì)新的更為有效的操作和控制卵泡波出現(xiàn)的程序來說是很有幫助的。
考慮到卵泡波的出現(xiàn),可以設(shè)計(jì)一種超排程序,將開始用FSH處理的時(shí)間和卵泡波出現(xiàn)的時(shí)間及人工授精的時(shí)間相匹配,由此減少人員的工作時(shí)間,并優(yōu)化獲得的受精卵的數(shù)量。但是,在一些國家,限制在食用動(dòng)物使用某些激素,而且更為重要的是,上述處理方案就超排效果而言,幾乎沒有或者沒有明顯統(tǒng)計(jì)意義上的改進(jìn)。
5 超數(shù)排卵處理的缺點(diǎn)和差異
超排??梢鹇雅菀虹摅w激素及外圍循環(huán)中考素(FSH、LH、E2和P4)變化出現(xiàn)異常。超排動(dòng)物在排卯時(shí)及排卵后,雌二醇和孕酮水平明顯升高,而且大多數(shù)供體由于E2的提早升高可很快啟動(dòng)LH峰值;而在某些供體,LH峰較低或缺失。所有或這些異常中的一些可能會(huì)影響卵母細(xì)胞成熟、降低卵母細(xì)胞質(zhì)量,導(dǎo)致不能受精及胚胎質(zhì)量低下。唯一具有實(shí)際用途的激素分析是測定發(fā)情期血漿P4水平,P4水平升高則意味著超排反應(yīng)效果不佳。
6 超排和沖胚后供體的管理
超排后,小母牛在20天內(nèi),成年母牛在40—60天內(nèi)可恢復(fù)正常的發(fā)情周期,生育力也基本正常。但是,由于超排處理使內(nèi)分泌系統(tǒng)發(fā)生了巨大的改變,因此會(huì)明顯影響供體隨后的生育力,所以應(yīng)該使畜主了解這些情況。沖胚后可能仍有胚胎存留于子宮內(nèi),因此為了避免50—60天后發(fā)生多個(gè)胎兒的自發(fā)性流產(chǎn),使供體盡快恢復(fù)正常的發(fā)情周期,應(yīng)在回收胚胎結(jié)束時(shí)對(duì)供體用前列腺素處理,幾天后可重復(fù)處理。有些供體牛不能恢復(fù)正常的發(fā)情周期,它們可能會(huì)經(jīng)歷一段無卵泡發(fā)育期,甚至?xí)l(fā)生卵泡囊腫。對(duì)這些牛應(yīng)當(dāng)進(jìn)行產(chǎn)科檢查,一般長時(shí)間用孕酮處理可以解決這些問題。