胡茂林?┗葡?冬 羅來(lái)鑫 李健強(qiáng)

摘要

為篩選防治稻曲病的殺菌劑，本文測(cè)定了苯醚甲環(huán)唑、烯肟菌胺單劑以及不同比例的混配制劑對(duì)稻曲病菌的毒力和聯(lián)合毒力，并選擇具有增效作用的混配藥劑進(jìn)行了田間防效試驗(yàn)。結(jié)果表明：苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺按9∶1混配對(duì)稻曲病菌的抑制作用最強(qiáng)，EC50為0.11 μg/mL，共毒系數(shù)最大，達(dá)182.91，顯示二者按該比例混配具有增效作用。選擇該配比加工的復(fù)配制劑5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺微乳劑進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)，結(jié)果表明，噴霧量為有效劑量（下同）180 g/hm2時(shí)，其病穗防效達(dá)79.89%，病粒率防效達(dá)81.94%，高于5%烯肟菌胺水劑75 g/hm2和對(duì)照藥劑2.5%井岡霉素·100億枯草芽孢桿菌水劑112.5 g·4.5×1013/hm2處理，與25%苯醚甲環(huán)唑乳油和對(duì)照藥劑300 g/L苯醚甲環(huán)唑·丙環(huán)唑乳油均無(wú)顯著差異。分析認(rèn)為，5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME可望作為稻曲病防治藥劑進(jìn)行示范和驗(yàn)證試驗(yàn)。

關(guān)鍵詞

稻曲?。?苯醚甲環(huán)唑； 烯肟菌胺； 復(fù)配

中圖分類(lèi)號(hào)：

S 432.4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2017322

Control effect of difenoconazole， SYP1620 and their mixture on

rice false smut disease

HU Maolin1，3， HUANG Xiaodong2， LUO Laixin3， LI Jianqiang3

（1. College of Agriculture， South China Agricultural University， Guangzhou 510642， China；

2. Institute of Vegetables and Flowers， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100081， China；3. College of Plant Protection， China Agricultural University， Beijing 100193， China）

Abstract

In order to select effective fungicides for the control of Ustilaginoidea virens， toxicities of difenoconazole， SYP1620 and their mixtures were tested in vitro.The mixture with synergistic effect was used in the field experiment.The results showed that the mixture of difenoconazole and SYP1620 at the proportion of 9∶1 had the best inhibition against U.virens with the EC50 value of 0.11 μg/mL and cotoxicity coefficient of 182.91.The control efficacy of difenoconazole·SYP1620 5% ME（9∶1） 180 g/hm2 was 79.89% calculated from diseased panicle rate and 81.94% calculated from diseased kernels， which was better than that of SYP1620 5% AS 75 g/hm2 and jingangmycin·100 billion Bacillus subtilis 2.5% AS 112.5 g·4.5×1013 spore/hm2，but no significant difference with difenoconazole 25% EC and difenoconazole·propiconazole 300 g/L EC.Therefore， the mixed formulation of difenoconazole and SYP1620 5% ME could be applied to control rice false smut disease.

Key words

Ustilaginoidea virens； difenoconazole； SYP1620； complex formulation

稻曲病是水稻生產(chǎn)過(guò)程中的一種重要病害，在世界各水稻產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生[13]。自20世紀(jì)80年代以來(lái)，隨著我國(guó)水稻品種不斷更替、雜交稻種植面積擴(kuò)大以及栽培方式的變化，稻曲病的發(fā)生呈現(xiàn)逐年加重趨勢(shì)，現(xiàn)已發(fā)展成為我國(guó)水稻上最重要的病害之一[45]。目前，國(guó)內(nèi)外主要依賴(lài)化學(xué)殺菌劑對(duì)稻曲病進(jìn)行防治。同一稻作區(qū)連續(xù)多年使用單一化學(xué)藥劑防治，容易導(dǎo)致稻曲病菌抗藥性的產(chǎn)生，使防治效果降低。如何開(kāi)發(fā)新型藥劑，是當(dāng)前預(yù)防控制稻曲病急需解決的難題。農(nóng)藥復(fù)配劑是研制、開(kāi)發(fā)農(nóng)藥新品種的重要組成部分[67]。苯醚甲環(huán)唑是一種安全高效的三唑類(lèi)內(nèi)吸性廣譜殺菌劑，具有保護(hù)、治療和內(nèi)吸活性，是甾醇脫甲基化抑制劑，通過(guò)抑制細(xì)胞壁甾醇的生物合成，阻止真菌的生長(zhǎng)；其毒性低，同時(shí)具有高效、廣譜、低殘留、持效期長(zhǎng)等特點(diǎn)，因此可在田間應(yīng)用，充分發(fā)揮其保護(hù)作用而達(dá)到預(yù)防病害發(fā)生的目的[89]。目前在水稻上該藥劑主要同丙環(huán)唑、井岡霉素和咪鮮胺復(fù)配防治稻曲病[1011]。烯肟菌胺是以天然抗生素strobilurin為先導(dǎo)化合物開(kāi)發(fā)的殺菌劑新品種，屬于甲氧基丙烯酸酯類(lèi)。它通過(guò)阻止細(xì)胞色素b和c之間的電子傳遞抑制線粒體的呼吸作用而最終達(dá)到殺菌目的；其殺菌譜廣、殺菌活性高、具有保護(hù)及治療作用[12]。目前在水稻上該藥劑主要以20%烯肟·戊唑醇SC的混配形式登記用于防治稻曲病，但還未見(jiàn)有苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺復(fù)配研究的相關(guān)報(bào)道。

本研究擬通過(guò)對(duì)苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺兩種不同作用機(jī)制的藥劑進(jìn)行科學(xué)復(fù)配，開(kāi)展室內(nèi)聯(lián)合毒力測(cè)定并進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)，篩選出對(duì)稻曲病具有明顯防效的新型配方制劑，以期提高病害防治的安全性和有效性，以及延緩稻曲病菌抗藥性的產(chǎn)生。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試藥劑

95%苯醚甲環(huán)唑原藥（TC），由江蘇七洲綠色化工股份有限公司提供；98%烯肟菌胺原藥（TC），由沈陽(yáng)化工研究院提供；300 g/L苯醚甲環(huán)唑·丙環(huán)唑乳油（EC），商品名愛(ài)苗，購(gòu)于湖北信風(fēng)作物保護(hù)有限公司；2.5%井岡霉素·100億枯草芽孢桿菌水劑（AS），商品名紋曲寧，購(gòu)于江蘇蘇科農(nóng)化有限責(zé)任公司；25%苯醚甲環(huán)唑乳油（EC），購(gòu)于江蘇興邦大化集團(tuán)化工有限公司；99%水楊肟酸購(gòu)于Sigma公司；二甲基亞砜，分析純，購(gòu)于北京廣達(dá)恒益科技有限公司。5%烯肟菌胺水劑（AS）和5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺微乳劑（ME）為本研究室配制。

1.1.2 供試菌株及培養(yǎng)基

稻曲病菌菌株UV2由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所陳志誼研究員贈(zèng)予；PSA培養(yǎng)基（馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂16 g，去離子水1 000 mL）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺混配藥劑對(duì)稻曲病菌的室內(nèi)聯(lián)合毒力測(cè)定

混配藥劑的配制：將苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺原藥分別溶于二甲基亞砜（分析純）中，配成1.0×104μg/mL母液備用。將苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺母液按照10∶0、9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7、2∶8、1∶9和0∶10共11個(gè)比例混合，配成混合母液；用二甲基亞砜將各混合母液稀釋成不同濃度的混配藥劑。在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，將各混配藥劑濃度設(shè)置為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4和0.8 μg/mL。

混配藥劑對(duì)稻曲病菌的室內(nèi)聯(lián)合毒力測(cè)定：取菌齡為15 d，直徑為5 mm的菌餅，分別接種于含有系列濃度混配藥劑的PSA培養(yǎng)基平板上。同時(shí)，在所有處理當(dāng)中均添加10 μg/mL的水楊肟酸，以含等量濃度為1 μL/mL二甲基亞砜和10 μg/mL的水楊肟酸處理為對(duì)照，各處理重復(fù)3次。28℃黑暗條件培養(yǎng)15 d后，十字交叉法測(cè)量菌落直徑，求出各處理對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制百分率、毒力回歸方程Y=aX+b、有效抑制中濃度EC50（μg/mL）及相關(guān)系數(shù)r。采用孫云沛方法計(jì)算混配藥劑的共毒系數(shù)（CTC），評(píng)價(jià)混配藥劑的聯(lián)合作用類(lèi)型。

抑制率=（對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑）/（對(duì)照菌落直徑-菌餅直徑）×100%；

單劑毒力指數(shù)=標(biāo)準(zhǔn)藥劑EC50/供試單劑EC50×100；

混劑實(shí)測(cè)毒力指數(shù)ATI=標(biāo)準(zhǔn)藥劑EC50/供試混劑EC50×100；

混劑理論毒力指數(shù)TTI = A的毒力指數(shù)×A在混劑中的百分含量（%）+ B的毒力指數(shù)×B在混劑中的百分含量（%）；

共毒系數(shù)CTC = ATI/TTI×100。

CTC≤80，為拮抗作用，80

1.2.2 苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺復(fù)配劑的田間藥效試驗(yàn)

按照1.2.1試驗(yàn)獲得的苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺最佳配比配制5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME。

試驗(yàn)共設(shè)12個(gè)處理：5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME 有效劑量（下同）75、120、180 g/hm2；25%苯醚甲環(huán)唑EC 90、105、120 g/hm2；5%烯肟菌胺AS 37.5、56.25、75 g/hm2；300 g/L苯醚甲環(huán)唑·丙環(huán)唑EC 67.5 g/hm2；2.5%井岡霉素·100億枯草芽孢桿菌AS 112.5 g·4.5×1013/hm2和不施藥的空白對(duì)照。每個(gè)處理4次重復(fù)，共計(jì)48個(gè)小區(qū)，隨機(jī)區(qū)組排列，每個(gè)小區(qū)20 m2，總計(jì)960 m2。試驗(yàn)點(diǎn)選在湖南省常德市漢壽縣，水稻栽培品種為‘豐源優(yōu)299。

施藥方法：采取均勻噴霧處理。稱(chēng)取每處理4次重復(fù)所需的藥劑，按照每公頃兌水750 L用藥量配制藥液，利用噴霧器在水稻破口前5～9 d和抽穗始盛期，分別施藥1次，施藥時(shí)間均選擇在下午16：00左右，若施藥后12 h內(nèi)遇雨天，第二天選擇補(bǔ)施。

供試稻田田間管理：供試稻田田間管理在蟲(chóng)害管理方面按照正常的管理進(jìn)行。試驗(yàn)期間不再使用其他化學(xué)藥劑防治真菌病害。田間栽培管理按照當(dāng)?shù)馗弋a(chǎn)栽培方式進(jìn)行。

調(diào)查方法：于第二次施藥后14 d調(diào)查1次。每小區(qū)隨機(jī)5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)隨機(jī)調(diào)查5穴，共查100穴/處理，記錄各處理病穗率、病粒率，并計(jì)算防效。

病穗（粒）率=[病穗（粒）數(shù)/調(diào)查總穗（粒）數(shù)]×100%；

防治效果=（空白對(duì)照區(qū)病穗（粒）率-藥劑處理區(qū)病穗（粒）率）/空白對(duì)照區(qū)病穗（粒）率×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺混配藥劑對(duì)稻曲病菌的聯(lián)合毒力

苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺11個(gè)不同配比的混配藥劑對(duì)稻曲病菌的毒力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。結(jié)果表明，苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺按9∶1比例配比對(duì)稻曲病菌的抑制作用最大（圖1），EC50為0.11 μg/mL，共毒系數(shù)為182.91，表現(xiàn)為增效作用；其次為8∶2比例配比，EC50為0.16 μg/mL，共毒系數(shù)為126.59，亦表現(xiàn)為增效作用；按7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7和2∶8比例配比時(shí)，混配藥劑對(duì)稻曲病菌的EC50在0.17～0.40 μg/mL之間，均表現(xiàn)為加和作用；按1∶9比例配比時(shí)，對(duì)稻曲病菌的抑制作用最小，EC50為0.48 μg/mL，共毒系數(shù)為48.10，表現(xiàn)為拮抗作用。

2.2 苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺復(fù)配的田間防治效果

綜合評(píng)價(jià)室內(nèi)聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果，選擇9∶1作為苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺的最佳復(fù)配比例，制備5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME用于田間藥效試驗(yàn)。結(jié)果（表2）顯示，25%苯醚甲環(huán)唑EC 120 g/hm2的病穗防效最好；其次為300 g/L苯醚甲環(huán)唑·丙環(huán)唑EC 67.5 g/hm2；5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME 3個(gè)施用劑量當(dāng)中，180 g/hm2用藥量處理的病穗防效最好，達(dá)到79.89%，病粒率防效超過(guò)81%，與對(duì)照藥劑300 g/L苯醚甲環(huán)唑·丙環(huán)唑EC 67.5 g/hm2相當(dāng)，且其防效高于單劑5%烯肟菌胺AS所有的劑量處理和對(duì)照藥劑2.5%井岡霉素·100億枯草芽孢桿菌AS，與單劑25%苯醚甲環(huán)唑EC的3個(gè)劑量處理和對(duì)照藥劑300 g/L苯醚甲環(huán)唑·丙環(huán)唑EC 67.5 g/hm2處理均無(wú)顯著差異；混配制劑成本比單獨(dú)使用苯醚甲環(huán)或烯肟菌胺大大降低，說(shuō)明苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺按照9∶1混配的5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME對(duì)稻曲病具有明顯的防治效果。

3 結(jié)論與討論

苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺具有不同的作用機(jī)制[1317]，兩者復(fù)配有利于擴(kuò)大病害防治譜，延緩抗藥性的發(fā)生發(fā)展。本試驗(yàn)對(duì)兩種供試藥劑室內(nèi)聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果表明，苯醚甲環(huán)唑和烯肟菌胺按9∶1和8∶2兩種比例配比時(shí)表現(xiàn)為增效作用。綜合考慮田間實(shí)際用藥量的需要及室內(nèi)聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果，選擇9∶1作為苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺復(fù)配制劑的最佳復(fù)配比例，并按此比例進(jìn)行復(fù)配制劑的制備。

對(duì)復(fù)配制劑5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME的田間防病效果進(jìn)行了檢驗(yàn)。綜合考慮田間防效、有效成分用量成本及抗藥性產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)等情況，推薦5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME的最佳施用濃度為180 g/hm2，每公頃兌水750 L配制藥液，利用噴霧器在水稻破口前5～9 d和抽穗始盛期分別噴霧1次，施藥時(shí)間選擇在下午16∶00左右進(jìn)行，若施藥后12 h內(nèi)遇雨天，第二天補(bǔ)施一次。

目前，苯醚甲環(huán)唑主要與丙環(huán)唑、井岡霉素和咪鮮胺進(jìn)行復(fù)配登記防治稻曲病，烯肟菌胺主要與戊唑醇進(jìn)行復(fù)配防治稻曲病[1820]，而未見(jiàn)有苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺進(jìn)行復(fù)配的報(bào)道。通過(guò)不同作用機(jī)制藥劑的混配及新型藥劑的應(yīng)用，有利于擴(kuò)大防治譜、延緩抗藥性的產(chǎn)生。因此，5%苯醚甲環(huán)唑·烯肟菌胺ME作為稻曲病防治及延緩和治理稻曲病菌抗藥性發(fā)生發(fā)展的混配制劑具有較好的推廣應(yīng)用潛力。然而，為進(jìn)一步明確苯醚甲環(huán)唑與烯肟菌胺復(fù)配對(duì)稻曲病的防治效果，仍需開(kāi)展連年多點(diǎn)田間試驗(yàn)。

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（責(zé)任編輯：楊明麗）