張琴 張守科 汪建波 張威 舒金平 吳鴻 王浩杰

摘要

竹筍夜蛾是我國重要的一類竹子筍期害蟲，種類多，形態(tài)相似，難以區(qū)分，為更為準確地識別主要竹筍夜蛾的種類，本研究通過野外取樣和室內(nèi)飼養(yǎng)，對竹筍基夜蛾Kumasia kumaso、竹筍禾夜蛾Oligia vulgaris、筍連秀夜蛾Apamea repetita conjuncta及竹筍秀夜蛾Apamea apameoides 4種竹筍夜蛾卵、幼蟲趾鉤、臀棘及成蟲翅脈和生殖器形態(tài)進行了觀察和比較。結果表明，竹筍基夜蛾在卵形態(tài)、幼蟲體色和雌雄生殖器形態(tài)上與其他3種竹筍夜蛾形態(tài)差異明顯，其余3種夜蛾幼蟲體表背線和亞背線形態(tài)有差異，趾鉤、臀棘、翅脈和雌、雄外生殖器形態(tài)差異不顯著。本研究明確了我國南方竹區(qū)4種竹筍夜蛾的形態(tài)差異，為竹筍夜蛾的精準防控提供了參考。

關鍵詞

竹筍夜蛾； 形態(tài)特征； 外生殖器； 差異

中圖分類號：

S 436.44

文獻標識碼： A

DOI： 10.16688/j.zwbh.2017372

Morphological comparison among four species of bamboo shoot borers

（Lepidoptera： Noctuidae） in South China

ZHANG Qin1，2， ZHANG Shouke1， WANG Jianbo3， ZHANG Wei1，

SHU Jinping1， WU Hong1， WANG Haojie1

（1. Research Institute of Subtropical Forestry， Chinese Academy of Forestry， Fuyang 311400， China；

2. Hangzhou Academy of Forestry， Zhejiang 311400， China； 3. Yuyao Agricultural and

Forestry Bureau， Zhejiang 315400， China）

Abstract

The bamboo shoot noctuids are the dominant and most destructive insect pests of bamboo in South China， and it was very difficult to identify the species due to their similar morphological characters. To exactly distinguish the bamboo shoot borers， the morphology of eggs， crochets of larvae， cremasters of pupae， pterigostia and genitalia of adults of four bamboo noctuids， Kumasia kumaso， Oligia vulgaris， Apamea repetita conjuncta and A.apameoides were observed. The results showed that the morphological characters of eggs， larvae and genitalia of adults were significantly different from those of other three species， and the morphology of eggs， crochets of larvae， cremasters of pupae， veins and genitalia of adults among Oligia vulgaris， Apamea repetita conjuncta and A.apameoides were similar. This study explicated the difference in the morphological characters among the four bamboo noctuids， and provided the basis for the accurate control of bamboo shoot borers.

Key words

bamboo shoot borer； morphology； genitalia； difference

竹筍夜蛾是取食竹筍的鱗翅目Lepidoptera夜蛾科Noctuidae害蟲的統(tǒng)稱，是我國南方筍用竹種最為主要的筍期害蟲之一，以幼蟲蛀食早竹Phyllostachys praecox等20多個筍用竹種的竹筍，造成竹筍斷頭或死亡（圖1），在浙江富陽、德清等筍用竹區(qū)為害率高達90%以上，降低了竹筍及竹材的產(chǎn)量和質(zhì)量，嚴重制約了竹林自然更新，經(jīng)濟損失巨大[13]。我國竹區(qū)發(fā)生危害的竹筍夜蛾主要有竹筍基夜蛾Kumasia kumaso、竹筍禾夜蛾Oligia vulgaris、筍連秀夜蛾Apamea repetita conjuncta及竹筍秀夜蛾Apamea apameoides，這4種竹筍夜蛾的成蟲形態(tài)差異小，幼蟲為害特性相似，實際生產(chǎn)中難以區(qū)分，常被混為一談（統(tǒng)稱竹筍夜蛾）[45]。然而在林間這4種竹筍夜蛾生物學特性及發(fā)生規(guī)律明顯不同[6]，蟲種識別上的混淆導致防治靶標不清，時機不對，防治效果不佳。另外，因成蟲形態(tài)近似，這4種竹筍夜蛾的分類地位也一直存在爭議，其學名一再變更，最終分屬于基夜蛾屬Kumasia、禾夜蛾屬Oligia和秀夜蛾屬Apamea 3個屬[79]，但文獻中仍有混用的情況。因此，有必要對幾種竹筍夜蛾的形態(tài)特征進行系統(tǒng)的比較區(qū)分，為竹筍夜蛾的林間識別及防治提供依據(jù)。

國內(nèi)外學者對竹筍夜蛾開展了大量研究，但主要集中在生物學及防治技術方面[5，1012]，對竹筍夜蛾各蟲態(tài)特征（幼蟲趾鉤、成蟲翅脈及外生殖器等）進行系統(tǒng)比較的報道并不多見。本文通過比較4種竹筍夜蛾卵的形態(tài)，幼蟲體色、斑紋、趾鉤形態(tài)、臀棘形態(tài)及成蟲翅脈形態(tài)和生殖器形態(tài)，明確4種竹筍夜蛾更為精確的區(qū)分及識別方法，同時為竹筍夜蛾的物種歸屬及系統(tǒng)發(fā)育等問題提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試昆蟲

2014年4-5月分別在浙江省安吉市、臨安市、寧波市及廣東省懷集縣竹子產(chǎn)區(qū)采集4種竹筍夜蛾幼蟲，參照舒金平等的飼養(yǎng)方法[2]，在養(yǎng)蟲室內(nèi)，溫度為（25±1）℃， RH 60%±10%，自然光照下用新鮮竹筍喂養(yǎng)至其老熟，幼蟲化蛹后將蛹單頭放置于養(yǎng)蟲杯（頂口直徑12 cm、底部直徑8 cm，高度15 cm，底部鋪有1.5 cm厚的濕潤細沙）內(nèi)，蓋好杯蓋（留有透氣孔）直至羽化為成蟲，將羽化當天的同種夜蛾的雌、雄成蟲放入養(yǎng)蟲籠內(nèi)（50 cm×50 cm×100 cm，籠中間放置有2年生盆栽毛竹）飼養(yǎng)，待其交配后收集蟲卵。試驗期間，供以10%的蜂蜜水，并每天上午8：00更換新鮮蜂蜜水。

1.2 蟲卵形態(tài)觀察

收集養(yǎng)蟲籠內(nèi)毛竹葉片上分布的卵粒，每種夜蛾挑取30粒卵置于裝有電鏡保存液的潔凈小瓶中，并利用超聲波清洗機（KQ100DB，昆山市超聲儀器有限公司）清洗干凈，隨后取出用水清洗后干燥并使用顯微鏡（Nikon AZ100多功能變焦顯微鏡，上海衡浩儀器有限公司）拍攝4種竹筍夜蛾蟲卵的外部形態(tài)特征。

1.3 幼蟲形態(tài)觀察

分別選取健康的4種竹筍夜蛾老熟幼蟲各10頭置于-20℃冰箱冰凍致死，觀察體表斑紋特征；然后，用解剖刀切下腹部第3對腹足同一方位的趾鉤，在顯微鏡下觀察特征。

1.4 臀棘形態(tài)觀察

挑選健康的4種竹筍夜蛾蛹各10頭，利用超聲波清洗機清除蛹上的雜質(zhì)，在顯微鏡下觀察臀棘形態(tài)的異同。

1.5 前翅脈序觀察

分別選取翅膀完好的4種竹筍夜蛾成蟲各10頭，用鑷子取下其前翅，用軟毛刷蘸汽油刷去鱗片后染色，比較其脈序的差異。

1.6 成蟲外生殖器形態(tài)觀察

使用10%的NaOH溶液水解雌、雄成蟲腹部，再經(jīng)染色，脫水，二甲苯浸泡后，滴入中性樹膠做成永久切片，觀察其雌雄外生殖器形態(tài)并拍照。外生殖器玻片制備參考李后魂的制作方法[13]。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

本研究所使用Nikon AZ100多功能變焦顯微鏡（上海衡浩儀器有限公司），形態(tài)數(shù)據(jù)借助NISElements D 4.00.00軟件進行測量，用統(tǒng)計分析軟件SPSS 18.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。卵大小、幼蟲趾鉤長短等參數(shù)均采用單因素方差分析（Oneway ANOVA， LSD）。

2 結果與分析

2.1 4種竹筍夜蛾卵形態(tài)比較

4種竹筍夜蛾的卵形態(tài)較為接近，其中竹筍基夜蛾卵呈扁橢球形，其他3種竹筍夜蛾均為近圓球形。竹筍秀夜蛾卵殼表面被縱條紋，其他3種竹筍夜蛾卵殼表面均光滑無條紋（圖2）。4種夜蛾卵的大小存在顯著差異，以竹筍基夜蛾卵最大，筍連秀夜蛾卵最?。ū?）。

2.2 4種竹筍夜蛾幼蟲及其趾鉤形態(tài)比較

4種竹筍夜蛾幼蟲中，竹筍基夜蛾幼蟲體白色，無斑紋。竹筍禾夜蛾幼蟲體黑色，背線白色，亞背線第5節(jié)缺失。筍連秀夜蛾體黑色，背線黃色或紅色，亞背線白色，中間不連續(xù)。竹筍秀夜蛾體黑色，背線白色，亞背線前5節(jié)斷斷續(xù)續(xù)。每種竹筍夜蛾腹足趾鉤排列方式均為單序中帶（圖3）。4種竹筍夜蛾趾鉤數(shù)量無明顯差異，竹筍基夜蛾趾鉤數(shù)量最少。趾鉤長度中，竹筍基夜蛾趾鉤較短，竹筍禾夜蛾其次，其他2種竹筍夜蛾趾鉤長度差異不明顯（表2）。

2.3 4種竹筍夜蛾臀棘的觀察

4種竹筍夜蛾臀棘差異不明顯，臀棘數(shù)量均為6根，中間2根粗長，前后各2對，細短（圖4）。竹筍基夜蛾和竹筍秀夜蛾中間2根臀棘長度差異不明顯，與余下2種夜蛾有差異。2對細小臀棘中，竹筍禾夜蛾和竹筍秀長度差異不明顯，與余下2種夜蛾有差異（表3）。

2.4 4種竹筍夜蛾成蟲翅脈的觀察和比較

4種竹筍夜蛾前翅脈序基本相同，R脈5條，R3脈與R4脈基部共柄，有副室（圖5）。

2.5 4種竹筍夜蛾成蟲雌雄外生殖器的觀察和比較

4種竹筍夜蛾雄性生殖器差異不明顯（圖6，表4）。僅竹筍基夜蛾抱器瓣端部形態(tài)與其他3種竹筍夜蛾有差異，并具抱器端刺，且陽莖粗大，其他3種竹筍夜蛾陽莖均較小，無明顯差異。竹筍禾夜蛾抱器瓣上的抱器腹突較細長，竹筍基夜蛾和筍連秀夜蛾抱器腹突較短粗，竹筍秀夜蛾具抱器內(nèi)突（圖6）。4種竹筍夜蛾的雌性生殖器中，竹筍基夜蛾的肛瓣細長，條形，與其他3種竹筍夜蛾差異明顯，且交配囊?guī)着c囊導管等長。其他3種竹筍夜蛾雌性生殖器基本無明顯差異（圖6）。

3 結論和討論

4種竹筍夜蛾由于形態(tài)較接近，其分類問題一直有爭議，在早期的報道中也較為混亂。本研究選取4種竹筍夜蛾各蟲態(tài)的典型分類特征，對其進行了形態(tài)比較分析。竹筍基夜蛾、竹筍禾夜蛾和竹筍秀夜蛾卵的形態(tài)、幼蟲體色和斑紋、趾鉤排列方式等描述與已有報道吻合[8，10]，但臀棘數(shù)量與先前報道的不同，席克等[10]觀察竹筍夜蛾臀棘數(shù)為4根，而本研究發(fā)現(xiàn)3種夜蛾雌、雄成蟲蛹上的臀棘皆為6根，中間2根粗長，前后兩對短小，末端卷曲。另外，有關筍連秀夜蛾在浙江、江蘇等食用竹產(chǎn)區(qū)發(fā)生量的研究報道并不多見，亦可能和其他的種類混淆，本研究首次對筍連秀夜蛾各蟲態(tài)的形態(tài)特征進行了詳盡描述，可為各竹筍夜蛾的區(qū)分提供依據(jù)。

竹筍基夜蛾各個蟲態(tài)的特征與其他3種夜蛾均差異明顯，其卵扁橢圓形，而其他3種竹筍夜蛾近圓球形（表1）；其幼蟲體色為白色，無斑紋和明顯條紋（圖3）；雄性生殖器抱器瓣短小，雌性生殖器的肛瓣與交配囊細長（圖6），在形態(tài)上竹筍基夜蛾表現(xiàn)出顯著分化的趨勢，而其他3種夜蛾除幼蟲體表斑紋形態(tài)差異明顯外形態(tài)基本相似。

線粒體DNA 是一種進化速度較快的分子標記，其中線粒體細胞色素氧化酶亞基Ⅰ（mtDNA COⅠ） 基因由于其分布的普遍性以及序列和結構的相對保守性而被廣泛應用于昆蟲不同分類階元的分子系統(tǒng)學及進化生物學研究，DNA 條形碼技術可以用于物種及親緣關系的鑒定[1416]。當前基于昆蟲形態(tài)將4種夜蛾分為3個屬，但仍爭議不斷[79]。因此，筆者認為在形態(tài)分類的基礎上，應從分子水平上進一步研究，以準確分類這4種夜蛾，為確定其親緣關系及系統(tǒng)發(fā)育提供重要理論依據(jù)。

參考文獻

[1] YOSHIMATSU S， KUSIGEMATI K， GYOUTOKU N， et al. Some lepidopterous pests of bamboo and bamboo grass shoots in Japan [J]. Japanese Journal of Entomology， 2005， 8（3）： 9197.

[2] 舒金平，滕瑩，張愛良，等.竹筍基夜蛾的求偶及交配行為[J].應用生態(tài)學報，2012，23（12）：34213428.

[3] 葉碧歡，張亞波，滕瑩，等.筍秀夜蛾的求偶及交配行為[J].生態(tài)學雜志，2014，33（8）：21362141.

[4] 徐天森.中國竹子主要害蟲[M].北京：中國林業(yè)出版社，2004：4552.

[5] 陳貽金.筍秀夜蛾的研究[J].林業(yè)科學，1982（2）：4149.

[6] 張琴，莫有迪，張亞波，等.基于線粒體COⅠ基因的竹筍夜蛾親緣關系[J].林業(yè)科學，2017，53（4）：96104.

[7] 朱弘復，陳一心.中國經(jīng)濟昆蟲志.第6冊.鱗翅目夜蛾科（二）[M].北京：科學出版社，1964：1206.

[8] 陳一心.中國經(jīng)濟昆蟲志.第32冊.鱗翅目夜蛾科（四）[M].北京：科學出版社，1985：1167.

[9] 陳一心.鱗翅目：夜蛾科[M]∥湖南林業(yè)廳.湖南森林昆蟲圖鑒.長沙：湖南科學技術出版社，1992：9471040.

[10]席客，鄭建偉，許建中.江蘇常見的3種蛀筍夜蛾比較及防治[J].江蘇林業(yè)科技，2001，28（1）：3745.

[11]梁光紅，林毓銀.黃甜竹基夜蛾生物學特性及其防治[J].福建農(nóng)林大學學報（自然科學版），2003（1）：3640.

[12]邵識煩，陳拓，黃煥華，等.茶稈竹竹筍夜蛾形態(tài)特征及生物學習性研究[J].廣東林業(yè)科技，2002（3）：3336.

[13]李后魂.小蛾類復雜雄性外生殖器的制片方法[J].應用昆蟲學報，1996（2）：115116.

[14]TAUTZ D， ARCTANDER P， MINELLI A， et al. A plea for DNA taxonomy [J]. Trends in Ecology and Evolution， 2003， 18： 7074.

[15]HEBERT P D N， PENTON E H， BURNS J M， et al. Ten species in one： DNA barcoding reveals cryptic species in the neotropical skipper butterfly Astraptes fulgerator[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America， 2004， 101（41）： 14812 14817.

[16]LI Qingqing， LI Diyan， YE Hui， et al. Using COⅠ gene sequence to barcode two morphologically alike species： the cotton bollworm and the oriental tobacco budworm （Lepidoptera： Noctuidae）[J]. Molecular Biology Reports， 2011， 38（8）： 51075113.

（責任編輯：田 喆）