許 良，塞擊拉呼，王曦?zé)?，于佳琦，?寧，劉景林

（天然產(chǎn)物化學(xué)及功能分子合成內(nèi)蒙古自治區(qū)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古民族大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院 通遼 028000）

蒙藥塔日奴為大戟科植物月腺大戟（Enphorbia ebracteolata Hayata）的干燥根[1]，是蒙醫(yī)臨床上常用的藥材之一。塔日奴分布中國(guó)大陸，主產(chǎn)于河南、山東、江蘇、安徽、湖北等省。具有下瀉、消腫、消“奇哈”、殺蟲(chóng)、燥“協(xié)日烏素”等功效。蒙醫(yī)臨床上用于結(jié)喉，發(fā)癥、“粘”病，黃水瘡，水腫，痛風(fēng)，游痛癥，“協(xié)日烏素”病等[2]。近年來(lái)有關(guān)蒙藥塔日奴的研究報(bào)道逐漸增多，其主要原因是蒙藥塔日奴含有大量生物活性成分。其中萜類和苯乙酮類的特有成分如狼毒甲素、狼毒乙素和三帖酸具有抑制結(jié)核桿菌生長(zhǎng)的作用[3]。臨床證實(shí)，蒙藥塔日奴乙醇提取物對(duì)浸潤(rùn)型肺結(jié)核有很好的療效。中藥優(yōu)福寧（Euphomia）[4]系塔日奴（狼毒）濃縮而成的堿性糖漿膏。塔日奴中化合物Prostratin具有抗HIV病毒活性[5]。楊洪武等[6]實(shí)驗(yàn)證明，塔日奴能夠抑制多種癌細(xì)胞。以塔日奴開(kāi)發(fā)的E.F.膠囊具有明顯的抗腫瘤作用[7]。塔日奴對(duì)外周血白細(xì)胞和腹水腫瘤細(xì)胞的惡性增殖有較強(qiáng)的抑制作用，能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[8]。塔日奴中某些化合物表現(xiàn)出非常高的細(xì)胞毒，在較高劑量下有致突變作用[5]。此外，塔日奴的免疫調(diào)節(jié)作用已被實(shí)驗(yàn)證實(shí)[8]。

蒙藥炮制方法是歷代蒙醫(yī)學(xué)家經(jīng)過(guò)臨床用藥實(shí)踐中形成的一項(xiàng)制藥技術(shù)，通過(guò)炮制蒙藥，達(dá)到增效減毒之目的。蒙藥塔日奴中含有的活性成分一般都有毒性。因此，處于用藥安全考慮，在臨床上用蒙藥塔日奴之前必須進(jìn)行炮制，即蒙醫(yī)臨床上用的是塔日奴的炮制品。諸多相關(guān)研究結(jié)果顯示，抗氧化是能夠達(dá)到預(yù)防衰老目的的有效途徑之一，原因在于氧化劑自由基能夠使得組織和細(xì)胞分解，通過(guò)對(duì)代謝功能的影響，進(jìn)一步影響人體健康。假如某種藥物能夠消除體內(nèi)產(chǎn)生的過(guò)多的氧化自由基，那么它對(duì)體內(nèi)自由基引發(fā)的關(guān)節(jié)炎、白內(nèi)障、動(dòng)脈硬化、心血管病、糖尿病、老年癡呆、癌癥等人體衰老相關(guān)疾病有預(yù)防作用。因此，近年來(lái)藥物抗氧化活性方面的研究報(bào)道日益增多[9-14]。蒙藥塔日奴的傳統(tǒng)功效之一的治“協(xié)日烏素”病和其一種藥效物質(zhì)—多糖成分的治療和預(yù)防關(guān)節(jié)炎作用相一致。為進(jìn)一步闡明各種炮制方法的科學(xué)原理，同時(shí)對(duì)蒙藥塔日奴的臨床應(yīng)用提供理論指導(dǎo)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)蒙藥塔日奴不同炮制品的化學(xué)成分以及抗氧化作用進(jìn)行比較研究。

1 儀器與材料

高速離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠，TDL-5）、透析袋（北京鼎國(guó)昌盛生物科技有限責(zé)任公司，進(jìn)口分裝，36 DM）、層析柱（600 mm×16 mm）、UV-240型分光光度計(jì)（日本島津公司）、722s型可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

DEAE-Cellulose、Sephdex G-100、硫代巴比妥酸（生化試劑，sigma公司）、氯化硝基四氮唑蘭NBT（生化試劑，sigma公司）、三羥甲基氨基甲烷（生化試劑，sigma公司）、番紅花紅T（生化試劑）、對(duì)照品苯甲酸、甘露醇和VC（抗壞血酸）分別購(gòu)自上海汕頭光華化學(xué)試劑有限公司，均為分析純。其他試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水為重蒸水。塔日奴藥材購(gòu)自內(nèi)蒙古通遼市北方藥材市場(chǎng)，由內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院布和巴特爾教授鑒定。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 蒙藥塔日奴藥材及其不同炮制方法

把塔日奴藥材用蒸餾水沖洗2-3次之后用超純水沖洗3-4次，晾干，置于溫度為80℃的烘干箱內(nèi)烘干，分別用以下炮制法炮制。

塔日奴白酒炮制：用60度白酒（由內(nèi)蒙古赤峰套馬桿酒業(yè)有限公司生產(chǎn)）浸泡6 h后置于水浴上煎煮，至白酒完全被吸收。固液比為：1:3。

塔日奴牛奶炮制：用牛奶（由內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)股份有限公司生產(chǎn)）把藥材浸泡6 h，60℃的水浴上煮至牛奶全部被吸收。固液比為：1:4。

塔日奴訶子湯炮制：60℃的水浴上煮訶子湯完全被吸收。固液比：1:3。

塔日奴米醋炮制：用米醋（由鎮(zhèn)江恒豐醬醋有限公司生產(chǎn)）把藥材浸泡12 h，（米醋）燜潤(rùn)至醋被吸收，溫火炒干。固液比：1:4。

塔日奴酸奶炮制：60℃的水浴上煮至酸奶全部被吸收。固液比：1:4。

2.2 塔日奴及其炮制品的提取及供試品溶液的制備

本實(shí)驗(yàn)選用河北省安國(guó)產(chǎn)地塔日奴藥材。分別取塔日奴生品及其不同炮制品粉末5.0 g，置圓底燒瓶中，隨后加入40 mL無(wú)水乙醇和10 mL去離子水，在95℃溫度下水浴加熱回流3 h。每次3 h，合并濾液，減壓濃縮至15-20 mL，放置室溫，加濃縮液體積的2倍無(wú)水乙醇，醇沉靜置24 h、抽濾、用乙醇、丙酮、乙醚各洗2次、干燥。用蒸餾水溶解，轉(zhuǎn)入50 mL容量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻，得到濃度均為100 mg·mL-1的塔日奴生品以及塔日奴不同炮制品粗提物溶液。分別稀釋以上6種溶液，得到抗氧化試驗(yàn)所需的濃度分別為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mg·mL-1的塔日奴生品以及塔日奴不同炮制品粗提物溶液。

2.3 對(duì)照品溶液的制備

分別精確稱取狼毒乙素、巖大戟內(nèi)酯B對(duì)照品2.0 mg，定容至2.00 mL容量瓶中，得1.0 mg·mL-1對(duì)照品溶液。將2種對(duì)照品溶液按不同比例混合，得到2種對(duì)照品的混合溶液，備用。

2.4 液相色譜與大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜的分析條件

2695HPLC-UV型高效液相色譜儀（waters，USA）,檢測(cè)條件：Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱（250×4.6 mm，5 μm），柱溫30℃，二元線性梯度洗脫：流動(dòng)相：（A）乙腈、（B）水.流動(dòng)相梯度組成：0-30 min，10%-55%流動(dòng)相A；30-60 min，55%-95%流動(dòng)相A.流速0.8 mL·min-1;樣品進(jìn)樣量10 μL。

質(zhì)譜分析條件：LCQTM大氣壓化學(xué)電離離子阱質(zhì)譜儀（Thermo,USA）：采用正離子模式，掃描范圍：m/z 100-400，離子阱條件：源加熱溫度300℃，鞘氣20 arb，輔助氣5 arb，金屬加熱毛細(xì)管溫度275℃，毛細(xì)管電壓15 V。

2.5 塔日奴不同炮制品提取液的清除羥自由基活性分析

2.5.1 試劑溶液的配制

2.5.1.1 0.2 mol·L-1的PBS溶液（pH=7.4）配制0.2 mol·L-1Na2HPO4溶液：稱取 35.8010 g Na2HPO4·12H2O，溶于500 mL水中；

0.2 mol·L-1KH2PO4溶液：稱取 3.1120 g KH2PO4·2H2O，溶于100 mL水中；

取405 mL 0.2 mol·L-1Na2HPO4溶液與95 mL 0.2 mol·L-1KH2PO4溶液混合，即為0.2 mol·L-1的PBS溶液（pH=7.4）。

2.5.1.2 2.0 mmol·L-1的EDTANa2-Fe(II)溶液配制

EDTA溶液（4.0 mmol·L-1）：稱取乙二胺四乙酸二鈉0.3720 g溶于250 mL水中；

硫酸亞鐵胺溶液（4.0 mmol·L-1）：稱取硫酸亞鐵胺0.3920 g溶于250 mL水中；

將以上兩種溶液按1：1的體積比進(jìn)行混合，即為配成2.0 mmol·L-1的EDTANa2-Fe（II）溶液。

2.5.1.3 濃度為0.52 mg·mL-1的番紅花紅T溶液配制

稱取番紅花紅T 0.0520 g置于100 mL的容量瓶中，用超純水溶解，定容，備用。

2.5.1.4 濃度為6%的H2O2溶液

量取30%的H2O210 mL定容至50 mL的容量瓶中備用。

2.5.2 清除羥自由基活性測(cè)試方法

測(cè)試方法原理如同文獻(xiàn)[16]。精密量取1.5 mL濃度為0.2 mol·L-1的PBS（pH=7.4）緩沖溶液，分別加入濃度為 2.0 mmol·L-1的 EDTANa2-Fe（II）0.7 mL，濃度為0.52 mg·mL-1的番紅花紅T溶液0.2 mL，分別加入不同濃度的供試品溶液1.0 mL，分別加6%的H2O2溶液0.4 mL，用超純水定容至5.0 mL，混勻。將以上反應(yīng)體系的溶液置于37℃的恒溫水浴中反應(yīng)30 min，在520 nm處分別測(cè)定樣品吸光度值A(chǔ)。空白樣品用1.0 mL的超純水代替供試品溶液。記錄各樣品的吸光度值，并按下式計(jì)算清除羥自由基的清除率E(%)：

2.6 蒙藥塔日奴不同炮制品提取液的清除亞硝酸根作用的分析方法

2.6.1 試劑溶液的配制

2.6.1.1 50 mol.L-1NaNO2溶液

準(zhǔn)確稱取345.0 g NaNO2，加蒸餾水定容至100 mL；

2.6.1.2 pH=3.0的檸檬酸鈉-檸檬酸緩沖溶液

（1）0.1 mol·L-1的檸檬酸溶液：準(zhǔn)確稱取檸檬酸2.101 g，加蒸餾水定容至100 mL；

（2）0.10 mol·L-1檸檬酸鈉溶液:準(zhǔn)確稱取檸檬酸鈉2.941 g，加蒸餾水定容至100 mL；

分別取（1）號(hào)溶液18.6 mL，（2）號(hào)溶液1.4 mL，混合，即可。

2.6.1.3 0.4%對(duì)氨基苯磺酸

稱取0.40 g對(duì)氨基苯磺酸，溶于100 mL 20%的鹽酸中，避光保存。

2.6.1.4 0.2%N-1-奈基乙二胺鹽酸

稱取0.2gN-1-奈基乙二胺鹽酸，溶于100 mL水中，避光保存。

2.6.2 清除亞硝酸根作用的分析方法

方法原理見(jiàn)文獻(xiàn)[16]。精密取50 mol.L-1的NaNO2溶液2.00 mL置于10 mL容量瓶中，加入2.00 mL供試品溶液，依次加蒸餾水2.00 mL、pH=3.00的檸檬酸緩沖液5.00 mL，定容到10.00 mL，37℃水浴中放置1 h。冷卻到室溫后移取1.0 mL置于10 mL容量瓶中，加0.40%對(duì)氨基苯磺酸2.00 mL，放置5 min，隨后加0.20%N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽1.00 mL，定容至10 mL，混合均勻后放置15 min，在538 nm處測(cè)定反應(yīng)體系的吸光度值。按下列公式計(jì)算清除能力：

2.7 蒙藥塔日奴及其不同炮制品提取液清除超氧陰離子自由基作用的分析

方法原理見(jiàn)文獻(xiàn)[10]。取0.1 mol.L-1PH為8.2的Tris-HCl緩沖溶液2.50 mL置于試管中，在25℃水浴上預(yù)熱10 min，隨后分別加入不同濃度的供試樣品溶液0.20 mL，0.98 mmol·L-1的NBT 0.6 mL，10 mmol·L-1的鄰苯三酚0.30 mL，混勻，在25℃水浴中反應(yīng)4 min，加入8 mol.L-1的HCl 0.2 mL終止反應(yīng)，并在530 nm處測(cè)定吸光度A值。用蒸餾水代替供試品溶液作空白。反應(yīng)總體積3.8 mL。清除率按以下式進(jìn)行計(jì)算：

A空白— —重蒸餾水代替樣品時(shí)超氧陰離子自由基體系的吸光度值；

A樣品— —加入拱式樣品時(shí)超氧陰離子自由基體系的吸光度值。

圖1 塔日奴中兩種成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：（A）狼毒乙素（2,4-dihydroxy-6-methoxy-3-methylacetophenone）；（B）巖大戟內(nèi)酯B（Jolkinolide B）

圖2 對(duì)照品狼毒乙素和巖大戟內(nèi)酯B溶液的HPLC譜圖

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 塔日奴生品及炮制品中指標(biāo)成分含量的HPLC分析

塔日奴中兩種主要成分狼毒乙素（2,4-dihydroxy-6-methoxy-3-methylacetophenone）、巖大戟內(nèi)酯 B（Jolkinolide B）的結(jié)構(gòu)式列于圖1。

狼毒乙素和巖大戟內(nèi)酯B對(duì)照品溶液的HPLC譜圖見(jiàn)圖2，塔日奴生品及炮制品的HPLC譜圖見(jiàn)圖3。

主要活性成分的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。精密吸取不同梯度濃度的巖大戟內(nèi)酯B、狼毒乙素對(duì)照品溶液，依次進(jìn)樣20 μL，以相應(yīng)的色譜峰面積Y為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量X（μg）為橫坐標(biāo)進(jìn)行回歸，得到的回歸方程及線性范圍分別為：狼毒乙素：Y=5.786 7×104X-1.763 35×105，r=0.99 96，線性范圍為20-100 μg；巖大戟內(nèi)酯B：Y=1.338 6×104X-3.311 7×104，r=0.999 8，線性范圍為10-100 μg。狼毒乙素和巖大戟內(nèi)酯B加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

本實(shí)驗(yàn)得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線在線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。塔日奴的醋蒸、酒蒸、蜜蒸、清蒸炮制品中2種有效成分狼毒乙素和巖大戟內(nèi)酯B的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。從表2得知，相對(duì)于生品不同炮制品中狼毒乙素和巖大戟內(nèi)酯B的含量均明顯減少，只有酸奶炮制品中2種指標(biāo)成分的含量相對(duì)于生品明顯增加。

3.2 塔日奴生品及炮制品的大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜分析

塔日奴生品及炮制品的大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜圖（APCI-MS）見(jiàn)圖4，在正離子模式下的一級(jí)質(zhì)譜中，各類有效成分以質(zhì)子化的準(zhǔn)分子離子形式存在。從譜圖可知，塔日奴未炮制品（A）、酸奶蒸品（B）、白酒蒸品（C）、清蒸品（D）、醋蒸品（E）、蜜蒸品（F）提取液APCIMS一級(jí)譜中主要分子離子峰分別為m/z 197、m/z 235、m/z 317和m/z 331，提示塔日奴炮制過(guò)程中其化學(xué)組成基本不變。

對(duì)塔日奴及其不同炮制品乙醇提取物中保留時(shí)間26.3 min的m/z 197峰以及保留時(shí)間為42.5 min的m/z 331峰進(jìn)行串聯(lián)質(zhì)譜分析，其多級(jí)質(zhì)譜圖分別見(jiàn)圖5和圖6。根據(jù)色譜保留時(shí)間、結(jié)構(gòu)信息、對(duì)照品及參考文獻(xiàn)比對(duì)，鑒定質(zhì)荷比為197的化合物為狼毒乙素，質(zhì)合比為331的化合物為巖大戟內(nèi)酯B，該兩種化合物在塔日奴及其不同炮制品乙醇提取物中均存在，即塔日奴炮制過(guò)程中兩種指標(biāo)成分的分子結(jié)構(gòu)不發(fā)生變化。

圖3 塔日奴及其不同炮制品的HPLC譜圖

表1 狼毒乙素和巖大戟內(nèi)酯B加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

根據(jù)以上分析結(jié)果，對(duì)兩種化合物可能的裂解機(jī)理見(jiàn)圖7和圖8。

3.3 抗氧化作用分析結(jié)果

3.3.1 清除羥自由基活性分析

分析結(jié)果見(jiàn)圖9。圖9顯示，以甘露醇為陽(yáng)性對(duì)照，所測(cè)定的塔日奴及其不同炮制品提取液對(duì)·OH的清除能力有所不同，其清除羥自由基能力由弱到強(qiáng)的順序?yàn)椋好状着谥破罚‥C50=1.600 mg·mL-1）＜訶子湯炮制品（EC50=0.638 mg·mL-1）＜白酒炮制品（EC50=0.600 mg·mL-1）＜酸奶炮制品（EC50=0.539 mg·mL-1）＜塔日奴生品（EC50=0.378 mg·mL-1）＜牛奶炮制品（EC50=0.330 mg·mL-1）＜甘露醇（EC50=0.277 mg·mL-1）。

3.3.2 清除亞硝酸根作用的分析

以抗血酸為陽(yáng)性對(duì)照，分別測(cè)定塔日奴及其五種炮制品的清除亞硝酸根自由基能力，分析結(jié)果見(jiàn)圖10。圖10表明，其對(duì)亞硝酸根自由基抗氧化作用由弱到強(qiáng)順序?yàn)椋核崮膛谥破罚‥C50=0.037 mg·mL-1）＜白酒炮制品（EC50=0.0.036 mg·mL-1）＜米醋炮制品（EC50=0.034 mg·mL-1）＜抗血酸（EC50=0.031 mg·mL-1）＜塔日奴生品（EC50=0.031 mg·mL-1）＜訶子湯炮制品（EC50=0.028 mg·mL-1）＜牛奶炮制品（EC50=0.021 mg·mL-1）。其中有3種炮制品（牛奶炮制法＞訶子湯炮制法＞米醋炮制法）的清除亞硝酸根自由基能力較強(qiáng)，它們的EC50值比對(duì)照品抗血酸的EC50值小。

3.3.3 清除超氧陰離子自由基作用的分析結(jié)果

以甘露醇為陽(yáng)性對(duì)照，測(cè)試塔日奴生品及其五種炮制品的清除超氧自由基能力，結(jié)果見(jiàn)圖11。圖11表明，對(duì)超氧自由基的抗氧化作用由弱到強(qiáng)順序?yàn)椋喊拙婆谥破罚‥C50=13.399 mg·mL-1）＜米醋炮制品（EC50=9.763 mg·mL-1）＜塔日奴生品（EC50=7.715 mg·mL-1）＜牛奶炮制品（EC50=5.565 mg·mL-1）＜訶子湯炮制品（EC50=4.901 mg·mL-1）＜甘露醇（EC50=3.896 mg·mL-1）＜酸奶炮制品（EC50=3.808 mg·mL-1）。結(jié)果表明，酸奶炮制品的清除超氧自由基能力比對(duì)照品甘露醇的清除能力強(qiáng)。

4 討論

4.1 塔日奴藥理作用現(xiàn)代研究

塔日奴藥理作用現(xiàn)代研究表明，巖大戟內(nèi)酯B的抗腫瘤作用較強(qiáng)，而狼毒乙素的抗結(jié)核作用明顯。說(shuō)明狼毒乙素、巖大戟內(nèi)酯B為蒙藥塔日奴主要的活性成分之一。因此，以兩種成分為指標(biāo)，考察不同炮制方法對(duì)它們含量的影響，對(duì)闡明蒙藥塔日奴的炮制原理的進(jìn)一步闡明具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。APCI-MS-MS分析結(jié)果表明，蒙藥塔日奴經(jīng)不同方法炮制后其指標(biāo)成分狼毒乙素、巖大戟內(nèi)酯B的分子結(jié)構(gòu)未發(fā)生變化；用HPLC技術(shù)對(duì)蒙藥不同炮制品的分析結(jié)果表明，炮制后蒙藥塔日奴中以兩種化合物為代表的的各有效成分含量有了一定變化。塔日奴的醋蒸、酒蒸、清蒸、蜜蒸炮制品中上述兩種有效成分的含量均較低，而本實(shí)驗(yàn)首次采用的炮制法—酸奶炮制法得到的炮制品中兩種指標(biāo)成分含量較高。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，在臨床用藥時(shí)蒙藥塔日奴的炮制方法應(yīng)首選酸奶炮制法，以便達(dá)到塔日奴有效成分的充分利用之目的。

表2 塔日奴不同炮制品中2個(gè)有效成分的含量（mg.g-1，n=5）

圖4 塔日奴及其不同炮制品的大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜圖

圖5 質(zhì)荷比197離子的二級(jí)（a）、三級(jí)質(zhì)譜圖（b）

圖6 質(zhì)荷比331離子的二級(jí)（a）、三級(jí)（b、c、d）質(zhì)譜圖

圖7 狼毒乙素（2,4-dihydroxy-6-methoxy-3-methylacetophenone）可能的裂解機(jī)理

圖8 巖大戟內(nèi)酯B（Jolkinolide B）可能的裂解機(jī)理

圖9 塔日奴及其5種炮制品提取液清除羥自由基比較

圖10 塔日奴及其5種炮制品提取液清除亞硝酸根自由基的比較

4.2 塔日奴生品及其五種炮制品的抗氧化作用研究

對(duì)塔日奴生品及其五種炮制品的抗氧化作用考察實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：羥自由基抗氧化作用強(qiáng)弱順序?yàn)椋核张舅崮膛谥破罚景拙婆谥破罚驹X子湯炮制品＞牛奶炮制品＞米醋炮制品；亞硝酸根抗氧化作用強(qiáng)弱順序?yàn)椋号Ｄ膛谥破罚驹X子湯炮制品＞米醋炮制品＞塔日奴＞白酒炮制品＞酸奶炮制品；超氧自由基抗氧化作用強(qiáng)弱順序?yàn)椋核崮膛谥破罚驹X子湯炮制品＞牛奶炮制品＞塔日奴＞米醋炮制品＞白酒炮制品，即蒙藥塔日奴不同炮制品抗氧化作用有所區(qū)別。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，蒙藥塔日奴酸奶炮制炮制品的羥自由基和超氧自由基抗氧化作用均為突出。在蒙醫(yī)臨床上治療一些體內(nèi)自由基導(dǎo)致的關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈硬化、老年癡呆、糖尿病、癌癥等人體衰老相關(guān)疾病時(shí)建議用塔日奴酸奶炮制品。

圖11 塔日奴及其5種炮制品提取液對(duì)O2-的清除作用比較

蒙藥塔日奴為毒性藥物，炮制塔日奴的目的為達(dá)到減毒增效之目的。課題組用斑馬魚(yú)初期胚胎作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，考察塔日奴及其不同炮制品毒性的?shí)驗(yàn)正在進(jìn)行中。

1 國(guó)家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會(huì).中華本草.上海:上?？萍汲霭嫔?1999:4780

2 內(nèi)蒙古自治區(qū)衛(wèi)生廳編.內(nèi)蒙古蒙藥材標(biāo)準(zhǔn).赤峰:內(nèi)蒙古科學(xué)技術(shù)出版社,1984:467

3 浮光苗,余伯陽(yáng),朱丹妮.月腺大戟化學(xué)成分的研究.中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2003,34(4):377-379

4 胡樹(shù)德,談光新,張涵慶,等.中藥優(yōu)福寧的毒性及體內(nèi)外抗結(jié)核菌活性的實(shí)驗(yàn)研究.中國(guó)中醫(yī)藥科技,1998,5(1):12-13

5 吳起成,尤奮強(qiáng),丁安偉,等.白狼毒化學(xué)成分和生物活性研究進(jìn)展.藥學(xué)與臨床研究,2009,17(2):125-131

6 楊洪武,王崢,鄭學(xué)敏.狼毒大戟活性成分體外抑瘤研究.遼寧中醫(yī)雜志,2002,29(1):53-54

7 王崢.E.f中抗瘤有效部位的研究與開(kāi)發(fā).沈陽(yáng):遼寧中醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文,2002

8 陳鳴岳.月腺大戟抗淋巴細(xì)胞性白血病機(jī)理的研究.濟(jì)南:山東大學(xué)碩士學(xué)位論文,2005

9 Shen S,Cheng H,Li X,et al.Effects of extraction methods on antioxidant activities of polysaccharides from camellia seed cake,Eur.Food Res Technol,2014,238(6):1015-1021.

10 Pan S,Wu S.Cellulase-assisted extraction and antioxidant activity of the polysaccharides from garlic.Carbohydr.Polym.2014,111(1):606-609.

11 Ye C L,Hu W L,Dai D H.Extraction of polysaccharides and the antioxidant activity from the seeds of Plantago asiatica L.Int J Biol Macromol,2011,49(9):466-470.

12 Chen H,Zhang M,Qu Z,et al.Antioxidant activities of different fractions of polysaccharide conjugates from green tea(Camellia Sinensis).Food Chem,2008,106(2):559-563.

13 Jia X,Dong L,Yang Y,et al.Preliminary structural characterization and antioxidant activities of polysaccharides extracted from Hawk tea(Litsea coreana var.lanuginosa).Carbohydr Polym,2013,95(1):195-199.

14 Wang C,Wang C,Quan Y.Extraction of polysaccharides from Phellinus nigricans mycelia and their antioxidant activities in vitro.Carbohydr Polym,2014,99(99):110-115.

15 Zhao Z Y,Xu X J,Ye Q G.Ultrasound extraction optimization of Acanthopanax senticosus polysaccharides and its antioxidant activity.Int J Biol Macromol,2013,59(4):290-294.

16 Wu C，Yu Y C，Wang L P.Study on the Inhibition of Nitroso Reaction by Microemulsion of Quercetin.Nat Prod Res Dev,2008,20:12-15