（青海省海南藏族自治州興?？h畜牧獸醫(yī)工作站，海南 813399）

1 實驗方法與材料

1.1 實驗材料選取

實驗動物選擇青海省興?？h一養(yǎng)殖場提供的健康羊100只，在實驗之前，對實驗動物進行虎紅平板凝集試驗檢測布氏桿菌均為陰性。本次研究所選擇的兩個疫苗，分別來自兩個不同生產企業(yè)，S2疫苗和M5疫苗的生產批號分別為1112007、2011002，全部為凍干和菌疫苗，均在有效期內。羊布魯氏桿菌虎紅平板凝集實驗試劑為標準羊布魯氏桿菌抗原、布魯氏桿菌標準血清、布魯氏桿菌標準陽性血清。上述材料均購自于中國科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所。

1.2 實驗方法

本次研究共設計5組實驗，每組20只羊，分別采用不同疫苗、不同免疫方法、不同免疫次數(shù)，就羊體內抗體轉陽率進行分析，找出最佳的疫苗接種方案，確保免疫效果，為制定更加合理的羊布魯氏桿菌免疫方案提供相應數(shù)據(jù)參考。[1]在免疫的第15 d、第30 d、第60 d、第90 d、第120 d、第145 d分別對各實驗組羊群采集新鮮血液，并及時分離血清，測定免疫抗體轉陽率?？贵w檢測方法采用虎紅平板凝集試驗，并嚴格按照國家相關規(guī)定嚴格操作。

2 實驗結果

2.1 不同疫苗對羊布魯氏桿菌病免疫抗體轉陽率的影響

分別使用S2疫苗和M5疫苗，對實驗1組羊群進行疫苗免疫，每種疫苗免疫羊10只，免疫30 d后再進行1次強化免疫，按照疫苗免疫使用說明書的相關免疫方法操作，免疫后定期采集血液制備血清，檢測抗體轉陽率。通過對結果進行分析發(fā)現(xiàn)，2種疫苗分別進行免疫和強化免疫以后羊群均能夠達到良好的抗體水平，免疫第15 d到第145 d，抗體轉陽率始終維持在100%。

2.2 同種疫苗不同免疫次數(shù)對比實驗

表1 S2疫苗不同免疫次數(shù)陽抗體轉陽率檢測結果（%）

用S2疫苗對實驗2組羊群進行疫苗免疫免疫，30 d后對同組的10只羊再進行一次強化免疫，并按照疫苗免疫使用說明書指定的免疫方法進行免疫免疫后，定期采集血清檢測抗體轉陽率。通過表1數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，羊群免疫15 d內身體內快速產生免疫應答抗體水平進一步提升，并在30 d內持保持在較高抗體水平。對同組的10只羊進行強化免疫后，抗體水平一直保持在相對穩(wěn)定的高抗體水平，而進行第1次免疫的10只羊在30 d后，抗體水平呈現(xiàn)顯著下降，到145 d抗體轉陽率已經下降到接近于5%以下。詳細情況如表1所示。

按照上述方法用M5疫苗對實驗3組羊群進行免疫注射，30 d后對同組的10只羊進行1次強化免疫注射，采集羊群新鮮血液進行血清檢測實驗。檢測結果和表1變化基本一致。

2.3 同種疫苗不同免疫方法對比實驗

用S2疫苗分別采用自由飲水、人工灌服、皮下注射、肌肉注射4種不同免疫方法，對實驗4組羊群進行免疫，每種方法免疫5頭羊，免疫30 d后，分別使用上述4種方法，強化免疫1次。免疫之后分別采集羊群新鮮血液制備血清，進行抗體轉陽率檢測。通過對結果進行分析可以發(fā)現(xiàn)，自由人水和人工灌服2種方法均不能獲得良好的免疫效果，皮下注射和肌肉注射能夠起到很好的免疫作用，隨著時間的增長，免疫效果持續(xù)穩(wěn)定，詳細情況如表2所示。

表2 S2疫苗不同免疫方法抗體轉陽率檢測結果（%）

用M5疫苗按照上述免疫方法，對試驗5組羊群進行免疫，免疫30 d后再進行一次強化免疫，免疫后及時檢測血清中的抗體轉陽率。檢測結果顯示和表2趨勢基本一致。

3 討論

通過上述實驗可以發(fā)現(xiàn)，2種疫苗均能夠使羊產生良好的免疫應答，第1次免疫30 d后強化免疫一次，能夠有效提高羊體內抗體水平，并且免疫持續(xù)期更長[2]。而不同的免疫方法，所取得的免疫效果也存在較大差異性，其中自由飲水免疫效果最差，皮下注射和肌肉注射免疫效果最佳，其中肌肉注射相對于皮下注射來說，前期能夠獲得較好的免疫效果，后期差異性不顯著[3]。由此可以看出，在進行羊布魯氏桿菌疫苗免疫過程中，應該采用皮下注射或者肌肉注射，這樣能夠有效提高免疫效果，避免疫苗浪費。同時在第一次疫苗免疫后，還要繼續(xù)強化免疫一次，因為單次免疫并不能有效提高羊群體內抗體水平。

[1] 鄒瑩．布魯氏菌病的免疫程序[J]．獸醫(yī)科技信息，1994(3):3.

[2] 樊武昌．生豬布魯氏菌病的綜合防控措施淺析[J]．南方農業(yè)，2017 (30):101-102．

[3] 李建玲，李愛巧．烏魯木齊牛羊布魯氏菌疫苗免疫效果對比試驗[J]．中國動物檢疫，2013，30(4):47-49．