陸學(xué)云

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40%葉菌唑·戊唑醇水乳劑的高效液相色譜分析方法研究

陸學(xué)云

(江蘇糧滿倉(cāng)農(nóng)化有限公司，江蘇揚(yáng)州 225247)

采用高效液相色譜法測(cè)定40%葉菌唑·戊唑醇水乳劑，使用C18色譜柱，以V(甲醇)︰V(水)=65︰35為流動(dòng)相，在柱溫25 ℃、波長(zhǎng)222 nm、流量1.0 mL/min的色譜條件下進(jìn)行分析。葉菌唑和戊唑醇的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.086和0.062，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.56%和0.25%，線性相關(guān)系數(shù)分別為0.999 9和0.999 8，平均回收率分別為99.6%和99.2%，方法達(dá)到了分析的要求。

葉菌唑；戊唑醇；高效液相色譜；分析

葉菌唑(metconazole)化學(xué)名稱為：5-(4-氯苯基)-2,2-二甲基-1-(1-1,2,4-三唑-1-基甲基)環(huán)戊醇，是麥角甾醇生物合成中C-14脫甲基化酶抑制劑。葉菌唑是一種廣譜內(nèi)吸性殺菌劑，主要用于防治小麥殼針孢、穗鐮刀菌、葉銹病、黃銹病、白粉病、穎枯?。淮篼湴武P病、白粉病、喙孢屬；黑麥的喙孢屬、葉銹?。谎帑湽阡P?。恍『邴?小麥與黑麥雜交)葉銹病、殼針孢。該劑對(duì)殼針孢屬和銹病活性優(yōu)異，兼具優(yōu)良的保護(hù)及治療作用，既可莖葉處理又可作種子處理[1]。戊唑醇(tebuconazole)化學(xué)名稱為：()-1-(4-氯苯基)-4,4-二甲基-3-(1-1,2,4三唑-1-基甲基)戊-3-醇，屬于三唑類殺菌劑，為麥角甾醇生物合成抑制劑。該劑可用于禾谷類作物防治白粉病菌、柄銹菌屬、喙孢屬、核腔菌屬和殼針孢屬菌引起的病害[2]。

葉菌唑與戊唑醇復(fù)配對(duì)小麥條銹病、赤霉病有很好的防治效果。目前關(guān)于葉菌唑[3]和戊唑醇[4]原藥及單劑的氣相和液相色譜分析已見(jiàn)報(bào)道，而二者復(fù)配產(chǎn)品的分析方法尚未見(jiàn)公開(kāi)報(bào)道。本文建立了在同一色譜條件下同柱分離定量測(cè)定葉菌唑與戊唑醇的方法。該方法操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，可為企業(yè)生產(chǎn)過(guò)程質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)質(zhì)量檢測(cè)提供參考。

1 試驗(yàn)部分

1.1 試劑和溶液

甲醇：色譜純；水：二次蒸餾水；葉菌唑標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.0%；戊唑醇標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：島津LC-20AT，具可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；色譜工作站；色譜柱：150 mm×3.9 mm (i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝Inertsil ODS-3、5 μm填充物；微量進(jìn)樣器：50 μL；過(guò)濾器：濾膜孔徑約0.45m；超聲波清洗器。

1.3 液相色譜操作條件

流動(dòng)相：甲醇︰水= 65︰35 (體積比)；流量：1.0 mL/min；柱溫：25 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：222 nm；進(jìn)樣體積：25 μL；保留時(shí)間：葉菌唑約11 min；戊唑醇約8.8 min。

上述色譜操作條件系典型操作參數(shù)。實(shí)際操作時(shí)，可根據(jù)不同儀器的特點(diǎn)，對(duì)給定的操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。典型的高效液相色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 葉菌唑·戊唑醇標(biāo)樣(左圖)和試樣(右圖)高效液相色譜圖

1.4 測(cè)定步驟

1.4.1 標(biāo)樣溶液的配制

分別稱取葉菌唑標(biāo)樣0.03 g和戊唑醇標(biāo)樣0.05 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入約30 mL甲醇，在超聲波水浴中振蕩5 min，取出后降溫至室溫。用甲醇定容，用移液管準(zhǔn)確移取5 mL該溶液于50 mL容量瓶中，用甲醇稀釋并定容，備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取葉菌唑·戊唑醇試樣0.2 g (準(zhǔn)確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入約30 mL甲醇，在超聲波水浴中振蕩5 min，取出后降溫至室溫。用甲醇定容，用移液管準(zhǔn)確移取5 mL該溶液于50 mL容量瓶中，用甲醇定容，過(guò)濾后備用。

1.4.3 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液峰面積相對(duì)變化小于1.0%，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.4.4 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中葉菌唑(戊唑醇)的峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中葉菌唑(戊唑醇)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)1(%)按式(1)計(jì)算。

式中：1為試樣葉菌唑(戊唑醇)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，數(shù)值以%表示；2為試樣溶液中，葉菌唑(戊唑醇)峰面積的平均值；1為葉菌唑(戊唑醇)標(biāo)樣的質(zhì)量，單位為克，g；為標(biāo)樣中的葉菌唑(戊唑醇)質(zhì)量分?jǐn)?shù)，數(shù)值以%表示；1為標(biāo)樣溶液中，葉菌唑(戊唑醇)峰面積的平均值；2為試樣的質(zhì)量，單位為克，g。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 流動(dòng)相的選擇

通過(guò)對(duì)不同流動(dòng)相的試驗(yàn)結(jié)果比較得出采用甲醇+水為流動(dòng)相(65+35)，流量為1.0 mL/min的條件下，有效成分與雜質(zhì)能獲得較好的分離，峰形對(duì)稱，保留時(shí)間適當(dāng)。

2.1.2 波長(zhǎng)的選擇

在222 nm波長(zhǎng)條件下，葉菌唑·戊唑醇有效成分有較好的吸收，而且試樣雜質(zhì)及試劑幾乎沒(méi)有響應(yīng)，因此選擇222 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.1.3 色譜柱的選擇

通過(guò)試驗(yàn)比較，選用色譜柱：150 mm×3.9 mm (i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝Inertsil ODS-3、5 μm填充物。使用該柱子檢測(cè)，峰形對(duì)稱，出峰時(shí)間適中，可以滿足快速分析的需要。

2.2 分析方法的線性相關(guān)性測(cè)定

分別稱取葉菌唑標(biāo)準(zhǔn)品0.05 g和戊唑醇標(biāo)準(zhǔn)品0.05 g (精確至0.000 2 g)置于25 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，充分搖勻。用移液管取1.0 mL上述溶液，置于另一個(gè)10 mL容量瓶中，用甲醇定容。再用移液管準(zhǔn)確移取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL，于5個(gè)10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，充分搖勻。分別根據(jù)1.2液相色譜條件進(jìn)行測(cè)定。以葉菌唑(戊唑醇)質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，測(cè)試方法的線性相關(guān)性，求得葉菌唑的線性方程式為=43 282+294.1，相關(guān)系數(shù)為0.999 9。求得戊唑醇的線性方程式為=38 884+53.4，相關(guān)系數(shù)為0.999 8。

2.3 分析方法的精密度測(cè)定

稱取葉菌唑·戊唑醇40%水乳劑樣品，進(jìn)行5次平行測(cè)定。其結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，該分析方法測(cè)定葉菌唑的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.086，變異系數(shù)為0.56%，戊唑醇的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.062，變異系數(shù)為0.25%(表1)。

表1 精密度試驗(yàn)測(cè)定數(shù)據(jù)

2.4 分析方法的準(zhǔn)確度測(cè)定

采用標(biāo)樣添加法，在已知含量的試樣中分別添加一定量的標(biāo)樣，在上述色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得葉菌唑的平均回收率為99.6%，戊唑醇的平均回收率為99.2%(表2)。

表2 樣品回收率測(cè)定數(shù)據(jù)

圖2 葉菌唑線性關(guān)系曲線圖

圖3 戊唑醇線性關(guān)系曲線圖

3 結(jié) 論

綜合上述測(cè)定結(jié)果可知，用本方法同時(shí)測(cè)定40%葉菌唑·戊唑醇水乳劑中葉菌唑、戊唑醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)，其精密度和準(zhǔn)確度較高，線性關(guān)系良好，具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確及分離效果好，是一種可行的分析方法，可滿足產(chǎn)品檢驗(yàn)的要求。

[1] 劉長(zhǎng)令. 國(guó)外農(nóng)藥品種手冊(cè)(增補(bǔ)本)[M]. 沈陽(yáng): 全國(guó)農(nóng)藥工業(yè)信息站, 2000: 164－165.

[2] 朱良天. 精細(xì)化工產(chǎn)品手冊(cè)(農(nóng)藥)[M]. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2004: 280－281.

[3] 陳根良, 夏俊, 劉春杰, 等. 葉菌唑原藥高效液相色譜分析方法研究[J]. 農(nóng)藥科學(xué)與管理, 2014, 35(9): 43－45.

[4] 薛維家, 戴永軍, 孔斌. 戊唑醇的液相色譜分析方法[J]. 農(nóng)藥科學(xué)與管理, 2000(4): 11－11.

Analytical Method of Metconazole·Tebuconazole 40% EW by HPLC

LU Xueyun

(Jiangsu Liangmancang Agrochemical Co., Ltd., Yangzhou 225247, Jiangsu, China)

An analysis method of metconazol·tebuconazole 40% EW was developed by HPLC with C18column at 25 ℃ and UV detector at 222 nm. The mobile phase was methanol+water (volume ratio of 65︰35), and the flow rate was 1.0 mL/min.The results showed that the standard deviations of metconazole and tebuconazole were 0.086 and 0.062, the relative standard deviations were 0.56% and 0.25%, the linear correlation coefficients were 0.999 9 and 0.999 8, the average recoveries were 99.6% and 99.2%, respectively. The method met the requirements of analysis.

metconazole; tebuconazole; HPLC; analysis

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2018.02.12

TQ450.7

A

1009-6485(2018)02-0054-03

陸學(xué)云，男，江蘇人，工程師。Tel: 0514-86645309，E-mail：xueyun1596@163.com。

2017-12-02。