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        風(fēng)水腎炎湯對(duì)IgA腎病大鼠模型治療作用及血清Scr、BUN、IL-21表達(dá)的研究*

        2018-05-07 02:55:12閆河峰趙建楊蓮花程根陽2
        陜西中醫(yī) 2018年5期
        關(guān)鍵詞:腎炎尿蛋白腎病

        閆河峰,趙建,楊蓮花,程根陽2

        1. 河南省焦作市第二人民醫(yī)院泌尿外科 (焦作 454001),2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科(鄭州450052)

        IgA腎病(IgA nephropathy,IgAN)是內(nèi)科臨床的常見病,也是腎功能衰竭(ESRD)的主要病因之一[1-3]。在我國成年人口中,約有10%左右的人群患有慢性腎病,這其中約有50%的患者為IgA腎病[4-6]。而腎小球動(dòng)脈硬化約占我國IgA腎病的 45%~54%,近十多年來有較明顯的的上升態(tài)勢。近年來,本院根據(jù)多年經(jīng)驗(yàn),運(yùn)用自擬的“風(fēng)水腎炎湯”治療IgA腎病,取得了較好的臨床效果,現(xiàn)總結(jié)如下。

        對(duì)象與方法

        1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 自上海必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司購進(jìn)100只SD大鼠,均為SPF級(jí)雄性,體質(zhì)量為162~193 g,平均(183.69±16.81) g;年齡均為6周。

        2 實(shí)驗(yàn)藥物 Sigma試劑(ALDRICH)、牛血清白蛋白(BSA)、四氯化碳(CCl4)、脂多糖(LPS),均購自國藥試劑公司;蓖麻油及自擬風(fēng)水腎炎湯全部用藥均購自同仁堂飲片公司。

        3 選模、分組與治療方法 按隨機(jī)法將全部大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、陽性藥物組及治療組四組,空白組大鼠體質(zhì)量為(183.83±16.59)g、模型組大鼠體質(zhì)量為(183.38±16.41)g、陽性藥物組大鼠體質(zhì)量為(183.46±16.45)g、治療組(183.91±16.95)g,四組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),可滿足對(duì)比研究要求。空白組以常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)SD大鼠飼料常規(guī)喂養(yǎng)。其他三組以BSA、LPS、CCl4按免疫復(fù)合法制備IgA大鼠腎病模型[7]。自實(shí)驗(yàn)第1 d起使用BSA按400 μg/g灌胃,2 d/次,連續(xù)6周;將0.5 ml蓖麻油+ 40.1 ml CCl4充分混勻?yàn)槿芤?,皮下注射?次/周,連續(xù)9周;給予0.05 mg LPS,于第6周、第8周時(shí)尾靜脈注射。造模完成后,對(duì)大鼠模型的腎組織以免疫熒光法進(jìn)行檢測是否成功造模[3]。造模后的模型組與空白組采取相同方法常規(guī)喂養(yǎng)不予任何治療;治療組給予自擬風(fēng)水腎炎湯,組方為:赤小豆、黃芪各30 g,連翹15 g,生麻黃、防風(fēng)、紫蘇葉、當(dāng)歸各10 g,桑白皮、杏仁各9 g,生姜、甘草各6 g,大棗4枚,以600 ml水煎至湯汁60 ml,人鼠按20倍轉(zhuǎn)換劑量,灌胃;陽性藥物組給予治療組同等劑量飲用水(安慰劑)灌胃。四組均同時(shí)治療或喂養(yǎng)1個(gè)月。

        4 觀察指標(biāo) 采集各組大鼠24 h尿液測定蛋白定量。將全部大鼠以烏拉坦麻醉后采取腹主動(dòng)脈血樣5 ml,于37 ℃恒溫條件下靜置15 min,使用離心機(jī)按3500r/min速度離心10 min,取得血清后置于- 80 ℃條件下儲(chǔ)存待檢;使用全自動(dòng)型生化分析儀按ELISA法檢測血清樣本中的腎功能指標(biāo):BUN、Scr與炎性因子:TNF-α、IL-4、IL-21含量。

        結(jié) 果

        1 24 h尿蛋白定量及腎功能指標(biāo) 見表1。各組間24 h尿蛋白、Scr、BUN均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);兩兩對(duì)比:治療組24 h尿蛋白低于模型組、陽性藥物組,但仍高于空白組(P<0.05);治療組Scr、BUN與空白組未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),且分別低于模型組與陽性藥(P<0.05);模型組、陽性藥物組24 h尿蛋白、Scr、BUN均高于空白組(P<0.05),但兩組間各項(xiàng)指標(biāo)均未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

        表1 四組24 h尿蛋白定量及腎功能指標(biāo)對(duì)比

        注:與空白組對(duì)比,☆P<0.05;與模型組對(duì)比,★P<0.05;與陽性藥物組對(duì)比,◇P<0.05

        2 血清炎性因子 見表2。各組間TNF-α、IL-4、IL-21均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);兩兩對(duì)比:治療組與空白組間各項(xiàng)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),模型組與陽性藥物組間各項(xiàng)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),模型組與陽性藥物組各項(xiàng)指標(biāo)均高于空白組與治療組,兩兩對(duì)比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

        表2 四組血清炎性因子對(duì)比(ng/L)

        注:與空白組對(duì)比,☆P<0.05;與模型組對(duì)比,★P<0.05;與陽性藥物組對(duì)比,◇P<0.05

        討 論

        免疫球蛋白A(IgA)或者以IgA為主的抗原抗體復(fù)合物在腎小球系膜及系膜區(qū)域的彌漫沉積是IgA腎病的病理基礎(chǔ)[8-10]。其臨床表現(xiàn)較為復(fù)雜,最為常見的是肉眼血尿和腎小球基質(zhì)增多、系膜增生等病理改變。此等改變約占腎組織活檢總數(shù)的40%以內(nèi),這也是國內(nèi)IgA腎病發(fā)展至終末期ESRD的主要基礎(chǔ)。IgA腎病源于感染與免疫機(jī)制的產(chǎn)生,IgA是由B細(xì)胞在產(chǎn)生免疫過程中分化而生成,但B細(xì)胞的免疫活動(dòng)還將受到T淋巴細(xì)胞的調(diào)節(jié),當(dāng)T細(xì)胞調(diào)節(jié)功能下降時(shí),B細(xì)胞會(huì)生成IgA失去節(jié)制。有關(guān)研究發(fā)現(xiàn),Th1 /Th2 的平衡失調(diào)亦與有關(guān)IgA的產(chǎn)生有關(guān),Th1和Th2細(xì)胞分泌不同的細(xì)胞因子,Th1主要分泌TNF-α等,參與遲發(fā)型超敏反應(yīng)和細(xì)胞免疫。Th2可合成IL-4、IL-6,IL-13等,可輔助B細(xì)胞分化抗體分泌細(xì)胞并參與體液免疫應(yīng)答并誘導(dǎo)抗體的生成。Th1、Th2細(xì)胞相互制約,相互調(diào)節(jié),其調(diào)節(jié)、制約功能失調(diào)與感染性疾病以及機(jī)體免疫性疾病的發(fā)生有關(guān)。另外,濾泡輔助性Tfh細(xì)胞對(duì)B細(xì)胞產(chǎn)生IgA 的免疫應(yīng)答具有關(guān)鍵性作用,Tfh細(xì)胞是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新的輔助性細(xì)胞,其分泌的IL-21等因子對(duì)B細(xì)胞形成刺激,使B細(xì)胞分化、增殖。IL-21具有誘導(dǎo)體內(nèi)所有 B 細(xì)胞亞群分化,使之成為抗體分泌細(xì)胞的功能。在B細(xì)胞、Tfh細(xì)胞應(yīng)對(duì)抗原初始、再次的免疫應(yīng)答以及需要長期維持的體液免疫等均可發(fā)揮其重要的作用。

        祖國醫(yī)學(xué)的精髓是“整體觀念,辨證論治”,中醫(yī)內(nèi)科學(xué)中沒有西醫(yī)IgA 腎病的名稱,只有從“水氣”病論治,從IgA 腎病的臨床癥狀血尿、水腫、蛋白尿論治的記載,諸多中醫(yī)名家認(rèn)為本病的發(fā)病機(jī)制是本虛標(biāo)實(shí)。本虛為氣陰兩虛,標(biāo)實(shí)則以濕毒、血瘀為本病特點(diǎn)。經(jīng)中醫(yī)病案史驗(yàn)證,中醫(yī)治療IgA腎病具有獨(dú)到見解和較好的效果[11-13]。近年來,中醫(yī)學(xué)與西醫(yī)的化驗(yàn)檢測以及先進(jìn)的診療手段相結(jié)合,相得益彰,使我國治療IgA 腎病有了顯著的進(jìn)步。本院以傳統(tǒng)中醫(yī)理論為基礎(chǔ),結(jié)合IgA腎病臨床治療經(jīng)驗(yàn)擬定出風(fēng)水腎炎湯應(yīng)用于本病的治療中。風(fēng)水腎炎湯中,生麻黃辛溫發(fā)汗、解表散寒、行水消腫、宣肺平喘,消癥結(jié)、散陰疽?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明生麻黃的主要成份麻黃堿具有明確的腎功能保護(hù)作用[14]。連翹消腫散結(jié)、清熱解毒,用于瘰癘、癰疽,丹毒、乳癰以及溫病初起、風(fēng)熱感冒、溫?zé)崛霠I、神昏發(fā)斑、高熱煩渴,熱淋尿閉。赤小豆散惡血除熱毒、通乳消脹滿、利尿。防風(fēng)用于感受風(fēng)寒、發(fā)熱惡寒、頭身痛、以及感受風(fēng)熱、咽痛目赤,以祛風(fēng)為長,既能解表散風(fēng)寒又能發(fā)散風(fēng)熱。杏仁苦溫降氣、止咳平喘、助麻黃以宣肺平喘、潤腸通便、治療咳喘等疾病。紫蘇葉散表寒,用于風(fēng)寒表癥,發(fā)汗力較強(qiáng),治療惡寒、無汗、發(fā)熱,行氣寬中,用于胸悶、嘔惡,脾胃氣滯。大棗補(bǔ)血養(yǎng)血,健脾通便。桑白皮瀉肺行水,止咳祛痰。甘草清熱解毒,止咳化痰,調(diào)和諸藥。當(dāng)歸活血養(yǎng)血補(bǔ)血,黃芪補(bǔ)氣、升陽,二者配伍可治膏淋。

        綜上所述,自擬風(fēng)水腎炎湯能夠有效治療IgA腎病模型大鼠,可降低其尿液中蛋白含量以及其血清中的肌酐、尿素氮水平;通過降低血清IL-21、TNF-α水平同時(shí)升高血清IL-4水平,調(diào)節(jié)免疫平衡機(jī)制從而實(shí)現(xiàn)保護(hù)腎功能的作用。因此,風(fēng)水腎炎湯具有IgA腎病臨床應(yīng)用價(jià)值,但整體方劑中應(yīng)加強(qiáng)對(duì)患者尿蛋白治療方面的藥物應(yīng)用。

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