閆河峰，趙建，楊蓮花，程根陽2

1. 河南省焦作市第二人民醫(yī)院泌尿外科 (焦作 454001),2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科(鄭州450052)

IgA腎病(IgA nephropathy,IgAN)是內(nèi)科臨床的常見病，也是腎功能衰竭(ESRD)的主要病因之一[1-3]。在我國成年人口中，約有10%左右的人群患有慢性腎病，這其中約有50%的患者為IgA腎病[4-6]。而腎小球動脈硬化約占我國IgA腎病的 45%～54%，近十多年來有較明顯的的上升態(tài)勢。近年來，本院根據(jù)多年經(jīng)驗，運用自擬的“風(fēng)水腎炎湯”治療IgA腎病，取得了較好的臨床效果，現(xiàn)總結(jié)如下。

對象與方法

1 實驗對象 自上海必凱實驗動物公司購進100只SD大鼠，均為SPF級雄性，體質(zhì)量為162～193 g，平均(183.69±16.81) g；年齡均為6周。

2 實驗藥物 Sigma試劑(ALDRICH)、牛血清白蛋白(BSA)、四氯化碳(CCl4)、脂多糖(LPS)，均購自國藥試劑公司；蓖麻油及自擬風(fēng)水腎炎湯全部用藥均購自同仁堂飲片公司。

3 選模、分組與治療方法 按隨機法將全部大鼠隨機分為空白組、模型組、陽性藥物組及治療組四組，空白組大鼠體質(zhì)量為(183.83±16.59)g、模型組大鼠體質(zhì)量為(183.38±16.41)g、陽性藥物組大鼠體質(zhì)量為(183.46±16.45)g、治療組(183.91±16.95)g，四組無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，可滿足對比研究要求。空白組以常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)SD大鼠飼料常規(guī)喂養(yǎng)。其他三組以BSA、LPS、CCl4按免疫復(fù)合法制備IgA大鼠腎病模型[7]。自實驗第1 d起使用BSA按400 μg/g灌胃，2 d/次，連續(xù)6周；將0.5 ml蓖麻油+ 40.1 ml CCl4充分混勻為溶液，皮下注射，1次/周，連續(xù)9周；給予0.05 mg LPS，于第6周、第8周時尾靜脈注射。造模完成后，對大鼠模型的腎組織以免疫熒光法進行檢測是否成功造模[3]。造模后的模型組與空白組采取相同方法常規(guī)喂養(yǎng)不予任何治療；治療組給予自擬風(fēng)水腎炎湯，組方為：赤小豆、黃芪各30 g，連翹15 g，生麻黃、防風(fēng)、紫蘇葉、當(dāng)歸各10 g，桑白皮、杏仁各9 g，生姜、甘草各6 g，大棗4枚，以600 ml水煎至湯汁60 ml，人鼠按20倍轉(zhuǎn)換劑量，灌胃；陽性藥物組給予治療組同等劑量飲用水(安慰劑)灌胃。四組均同時治療或喂養(yǎng)1個月。

4 觀察指標(biāo) 采集各組大鼠24 h尿液測定蛋白定量。將全部大鼠以烏拉坦麻醉后采取腹主動脈血樣5 ml，于37 ℃恒溫條件下靜置15 min，使用離心機按3500r/min速度離心10 min，取得血清后置于- 80 ℃條件下儲存待檢；使用全自動型生化分析儀按ELISA法檢測血清樣本中的腎功能指標(biāo)：BUN、Scr與炎性因子：TNF-α、IL-4、IL-21含量。

結(jié) 果

1 24 h尿蛋白定量及腎功能指標(biāo) 見表1。各組間24 h尿蛋白、Scr、BUN均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；兩兩對比：治療組24 h尿蛋白低于模型組、陽性藥物組，但仍高于空白組(P<0.05)；治療組Scr、BUN與空白組未見統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，且分別低于模型組與陽性藥(P<0.05)；模型組、陽性藥物組24 h尿蛋白、Scr、BUN均高于空白組(P<0.05)，但兩組間各項指標(biāo)均未見統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。

表1 四組24 h尿蛋白定量及腎功能指標(biāo)對比

注：與空白組對比，☆P<0.05;與模型組對比,★P<0.05;與陽性藥物組對比,◇P<0.05

2 血清炎性因子 見表2。各組間TNF-α、IL-4、IL-21均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；兩兩對比：治療組與空白組間各項均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，模型組與陽性藥物組間各項均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，模型組與陽性藥物組各項指標(biāo)均高于空白組與治療組，兩兩對比均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。

表2 四組血清炎性因子對比(ng/L)

注：與空白組對比，☆P<0.05;與模型組對比,★P<0.05;與陽性藥物組對比，◇P<0.05

討 論

免疫球蛋白A(IgA)或者以IgA為主的抗原抗體復(fù)合物在腎小球系膜及系膜區(qū)域的彌漫沉積是IgA腎病的病理基礎(chǔ)[8-10]。其臨床表現(xiàn)較為復(fù)雜，最為常見的是肉眼血尿和腎小球基質(zhì)增多、系膜增生等病理改變。此等改變約占腎組織活檢總數(shù)的40%以內(nèi)，這也是國內(nèi)IgA腎病發(fā)展至終末期ESRD的主要基礎(chǔ)。IgA腎病源于感染與免疫機制的產(chǎn)生，IgA是由B細胞在產(chǎn)生免疫過程中分化而生成，但B細胞的免疫活動還將受到T淋巴細胞的調(diào)節(jié)，當(dāng)T細胞調(diào)節(jié)功能下降時，B細胞會生成IgA失去節(jié)制。有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，Th1 /Th2 的平衡失調(diào)亦與有關(guān)IgA的產(chǎn)生有關(guān)，Th1和Th2細胞分泌不同的細胞因子，Th1主要分泌TNF-α等，參與遲發(fā)型超敏反應(yīng)和細胞免疫。Th2可合成IL-4、IL-6，IL-13等，可輔助B細胞分化抗體分泌細胞并參與體液免疫應(yīng)答并誘導(dǎo)抗體的生成。Th1、Th2細胞相互制約，相互調(diào)節(jié)，其調(diào)節(jié)、制約功能失調(diào)與感染性疾病以及機體免疫性疾病的發(fā)生有關(guān)。另外，濾泡輔助性Tfh細胞對B細胞產(chǎn)生IgA 的免疫應(yīng)答具有關(guān)鍵性作用，Tfh細胞是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新的輔助性細胞，其分泌的IL-21等因子對B細胞形成刺激，使B細胞分化、增殖。IL-21具有誘導(dǎo)體內(nèi)所有 B 細胞亞群分化，使之成為抗體分泌細胞的功能。在B細胞、Tfh細胞應(yīng)對抗原初始、再次的免疫應(yīng)答以及需要長期維持的體液免疫等均可發(fā)揮其重要的作用。

祖國醫(yī)學(xué)的精髓是“整體觀念，辨證論治”,中醫(yī)內(nèi)科學(xué)中沒有西醫(yī)IgA 腎病的名稱，只有從“水氣”病論治，從IgA 腎病的臨床癥狀血尿、水腫、蛋白尿論治的記載，諸多中醫(yī)名家認(rèn)為本病的發(fā)病機制是本虛標(biāo)實。本虛為氣陰兩虛，標(biāo)實則以濕毒、血瘀為本病特點。經(jīng)中醫(yī)病案史驗證，中醫(yī)治療IgA腎病具有獨到見解和較好的效果[11-13]。近年來，中醫(yī)學(xué)與西醫(yī)的化驗檢測以及先進的診療手段相結(jié)合，相得益彰，使我國治療IgA 腎病有了顯著的進步。本院以傳統(tǒng)中醫(yī)理論為基礎(chǔ)，結(jié)合IgA腎病臨床治療經(jīng)驗擬定出風(fēng)水腎炎湯應(yīng)用于本病的治療中。風(fēng)水腎炎湯中，生麻黃辛溫發(fā)汗、解表散寒、行水消腫、宣肺平喘，消癥結(jié)、散陰疽?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明生麻黃的主要成份麻黃堿具有明確的腎功能保護作用[14]。連翹消腫散結(jié)、清熱解毒，用于瘰癘、癰疽，丹毒、乳癰以及溫病初起、風(fēng)熱感冒、溫?zé)崛霠I、神昏發(fā)斑、高熱煩渴，熱淋尿閉。赤小豆散惡血除熱毒、通乳消脹滿、利尿。防風(fēng)用于感受風(fēng)寒、發(fā)熱惡寒、頭身痛、以及感受風(fēng)熱、咽痛目赤，以祛風(fēng)為長，既能解表散風(fēng)寒又能發(fā)散風(fēng)熱。杏仁苦溫降氣、止咳平喘、助麻黃以宣肺平喘、潤腸通便、治療咳喘等疾病。紫蘇葉散表寒，用于風(fēng)寒表癥，發(fā)汗力較強，治療惡寒、無汗、發(fā)熱，行氣寬中，用于胸悶、嘔惡，脾胃氣滯。大棗補血養(yǎng)血，健脾通便。桑白皮瀉肺行水，止咳祛痰。甘草清熱解毒，止咳化痰，調(diào)和諸藥。當(dāng)歸活血養(yǎng)血補血，黃芪補氣、升陽，二者配伍可治膏淋。

綜上所述，自擬風(fēng)水腎炎湯能夠有效治療IgA腎病模型大鼠，可降低其尿液中蛋白含量以及其血清中的肌酐、尿素氮水平；通過降低血清IL-21、TNF-α水平同時升高血清IL-4水平，調(diào)節(jié)免疫平衡機制從而實現(xiàn)保護腎功能的作用。因此，風(fēng)水腎炎湯具有IgA腎病臨床應(yīng)用價值，但整體方劑中應(yīng)加強對患者尿蛋白治療方面的藥物應(yīng)用。

[1] 高 峰,賀 曉,高 德.慢性腎功能衰竭透析患者微炎癥反應(yīng)相關(guān)因素分析[J].遼寧醫(yī)學(xué)雜志,2013,27(3):132-133.

[2] 楊冠琦,許 枬,呂 靜,等.芪薊腎康顆?？傸S酮對IgA腎病大鼠血尿、蛋白尿及TNF-α和MCP-1表達的影響[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2017,33(2):201-204.

[3] 李雯雯,黃 迪,沈沛成,等.中藥固本通絡(luò)方對IgA腎病小鼠氧化應(yīng)激作用機制的實驗研究[J].四川大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2017,48(2):210-215.

[4] Kamjo I,Sugaya T,Kimura K.L-typefatty acid binding protein(L-FABP)and kidney disease[J].Rinsho Byori,2014,62(2):163-170.

[5] 夏淋霞,張 艷,張英杰,等.麻黃連翹赤小豆湯治療腎臟病驗案舉隅[J].上海中醫(yī)藥雜志,2015,49(2):21-22.

[6] 王銀萍,王宏安,張洪寶,等.枸芪復(fù)腎丸對IgA腎病模型大鼠影響的研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2017,12(4):504-506,523.

[7] 楊雪軍,劉 飛,吳中平.麻黃連翹赤小豆湯治療IgA腎病大鼠的實驗研究[J].上海中醫(yī)藥雜志,2017,51(3):76-79.

[8] 李利利,劉 江,莊 稼,等.IgA腎病并發(fā)高血壓102例臨床與病理特征[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,2017,46(5):671-673.

[9] 李 潔,俞東容,陳洪宇,等.益腎活血祛風(fēng)濕聯(lián)合西藥治療IgA腎病遠期療效的臨床研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2017,37(1):28-33.

[10] 王 纓,胡貴榮,李弼民.IgA腎病大鼠腎組織中TIM-1、IFN-γ、IL-4表達的變化及意義[J].廣東醫(yī)學(xué),2017,38(4):505-508.

[11] 王海琨.加味固沖湯對IgA腎病患者腎小管間質(zhì)損傷的保護作用及對尿蛋白、尿滲透壓的影響[J].中醫(yī)學(xué)報,2017,32(7):1242-1246.

[12] 黃 敏,杜珍芳,翟惟凱.益氣養(yǎng)陰通絡(luò)法治療氣陰兩虛型IgA腎病療效觀察[J].陜西中醫(yī),2014,35(11):1507-1509.

[13] 張培培,陳紅波,魯科達,等.加味黃風(fēng)湯對IgA腎病大鼠腎組織α-SMA及TGF-β表達的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2017,35(3):673-676.

[14] Wu Z,Kong X,Zhang T,etal.Pseudoephedrine/ephedrine shows potent anti-inflammatory activity against TNF-α-mediated acute liver failure induced by lipopolysaccharide / D-galactosamine[J].Eur J Pharmacol,2014,(724):112-121.