馮年捷*， 傅 瑜， 王傳槐

（1. 湖北工業(yè)大學(xué) 綠色輕工材料湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430068；2. 南京林業(yè)大學(xué) 江蘇省制漿造紙科學(xué)與技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210037；3. 江蘇理工學(xué)院 化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院，江蘇 常州 213001）

漆酶是一種含銅的多酚氧化酶，以氧分子作為電子受體，通過電子傳遞，參與底物的降解和聚合。漆酶催化底物廣泛且綠色清潔，在制漿造紙、有機(jī)合成、食品醫(yī)藥和環(huán)境修復(fù)等領(lǐng)域均起著重要作用[1-3]。由于漆酶氧化還原電勢較低，只能氧化酚型木質(zhì)素結(jié)構(gòu)單元，而無法直接氧化木質(zhì)素結(jié)構(gòu)中占主要的非酚型單元[4]。Bourbonnais等發(fā)現(xiàn)一種染料化合物2,2?-連氮基-雙-(3-乙基苯并二氫噻唑啉-6-磺酸)（ABTS）可作為漆酶的介質(zhì)，在氧化還原過程中起到電子傳遞的作用，參與非酚型木質(zhì)素單元的氧化[5]，使利用漆酶實(shí)現(xiàn)木質(zhì)纖維生物質(zhì)的高效轉(zhuǎn)化成為了可能。然而，人工合成介質(zhì)存在著價(jià)格昂貴和環(huán)境污染等問題，使得漆酶介質(zhì)體系的產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用受到了限制[6]。Li發(fā)現(xiàn)血紅密孔菌在分泌漆酶的同時(shí)伴生 3-羥基鄰氨苯甲酸（3-HAA）[7]。Eggert研究表明，在無外加介質(zhì)的情況下3-HAA可參與漆酶氧化木質(zhì)素β-O-4結(jié)構(gòu)[8-9]，從而有望解決漆酶氧化木質(zhì)素中介質(zhì)的問題。非伴生介質(zhì)漆酶活力可達(dá)136 U/g[10]或80 U/mL[11]，而伴生介質(zhì)漆酶的生產(chǎn)鮮有人研究，漆酶活力較低（＜10 U/mL）[7]。

筆者已篩選出了血紅密孔菌NFZH-1，漆酶活力為13.7 U/mL，并鑒定了其伴生介質(zhì)3-HAA的存在[12]。因此，迫切需要利用血紅密孔菌NFZH-1來提高伴生介質(zhì)漆酶產(chǎn)量。本研究通過優(yōu)化血紅密孔菌NFZH-1液態(tài)培養(yǎng)基和發(fā)酵條件，提高了伴生介質(zhì)漆酶的產(chǎn)量；并通過測定酶學(xué)特性，確定了該漆酶的最適反應(yīng)條件和穩(wěn)定性，以期為伴生介質(zhì)漆酶的工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 主要試劑

ABTS、愈創(chuàng)木酚、阿魏酸和 2,5-二甲基苯胺均為優(yōu)級純，購于美國Sigma公司。葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、淀粉、酒石酸銨、尿素、瓊脂、酵母浸膏、維生素B1、Tween-80和無機(jī)鹽（(NH4)2SO4、NH4NO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4、CuSO4·5H2O、CaCl2、FeSO4·7H2O、ZnSO4·7H2O、MnSO4·H2O 和 CoCl2·6H2O）均為分析純，從國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司購得。土豆從農(nóng)貿(mào)市場購買。

1.2 菌種及漆酶生產(chǎn)

血紅密孔菌NFZH-1（Pycnoporus sanguineus），于4℃保存在土豆-葡萄糖-瓊脂（PDA）斜面培養(yǎng)基上，儲(chǔ)藏于南京林業(yè)大學(xué)木材腐朽菌菌種庫。

PDA培養(yǎng)基含20%土豆浸出液，2.0%葡萄糖和2.0%瓊脂，pH自然。

種子培養(yǎng)液由200 g/L土豆浸出液，20 g/L葡萄糖，2 g/L MgSO4·7H2O，5 g/L (NH4)2SO4和5 g/L KH2PO4組成，pH自然。

液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基由200 g/L土豆浸出液，10.8 g/L葡萄糖，0.1 g/L (NH4)2SO4，0.125 g /L酒石酸銨，0.1 g/L 酵母浸膏，2.0 g/L KH2PO4，0.5 g/L MgSO4·7H2O，0.1 g/L CuSO4·5H2O，75 mg/L CaCl2，5.0 mg/L FeSO4·7H2O，6.0 mg/L ZnSO4·7H2O，5.0 mg/L MnSO4·H2O，1.0 mg/L CoCl2·6H2O，1 mg/L 維生素 B1和 1 g/L Tween-80組成，pH5.5。

將50 mL種子培養(yǎng)液置于250 mL三角瓶中，121℃滅菌30 min，滅菌的三角瓶接入平板菌落，置于28℃、170 r/min（Φ 18 mm）搖床上培養(yǎng)3天，獲得均一孢子懸浮液，無菌過濾懸浮液，調(diào)節(jié)孢子濃度為1.0×107個(gè)/mL，4℃暗處保存。

將50 mL液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基置于250 mL三角瓶中，121℃滅菌30 min，滅菌的三角瓶接入5.0 mL上述孢子懸浮液，置于28℃、170 r/min（Φ 18 mm）搖床上培養(yǎng)7天，獲得發(fā)酵液。7 000 r/min離心發(fā)酵液，取上層清液，4℃密封保藏，待漆酶活力分析。

1.3 漆酶生產(chǎn)條件優(yōu)化

1.3.1 培養(yǎng)基

對培養(yǎng)基的組成進(jìn)行逐一替換或添加，單因素優(yōu)化產(chǎn)漆酶培養(yǎng)基。

碳源：分別以相同濃度的不同碳源（麥芽糖、蔗糖、淀粉）替代原培養(yǎng)基中的葡萄糖。

碳源濃度：選取優(yōu)化的碳源，使其濃度分別為4.5、9.0、13.5、18.0 g/L。

氮源：分別以相同濃度的尿素替代原培養(yǎng)基中的酒石酸銨和相同濃度的硝酸銨替代原培養(yǎng)基中的硫酸銨，即組成氮源組合為酒石酸銨+硝酸銨、尿素+硫酸銨和尿素+硝酸銨。

誘導(dǎo)劑：分別以愈創(chuàng)木酚、阿魏酸和2,5-二甲基苯胺為誘導(dǎo)劑，于發(fā)酵第3天添加，并使培養(yǎng)基中誘導(dǎo)劑濃度為0.5 mmol/L，與未添加誘導(dǎo)劑試樣進(jìn)行對照。

誘導(dǎo)劑濃度：選取較優(yōu)的誘導(dǎo)劑，使其濃度分別為0.2、0.4、0.6、0.8 mmol/L。

1.3.2 發(fā)酵條件

對發(fā)酵條件進(jìn)行逐一改變，單因素優(yōu)化產(chǎn)漆酶發(fā)酵條件。

溫度：控制發(fā)酵溫度分別為20、24、28、32和36℃。

pH：調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH分別為4.5、5.5、6.5、7.5和8.5。

裝液量：采用250 mL三角瓶，分別裝入40、60、80和100 mL培養(yǎng)基。

接種量：分別接入0.5、1.5、2.5、3.5和5.0 mL孢子懸浮液。

培養(yǎng)時(shí)間：分別培養(yǎng)6、7、8和9天，定時(shí)取樣，測定漆酶活力。

1.4 漆酶活力測定

漆酶活力測定及相對活力計(jì)算參照文獻(xiàn)[13]。采用紫外-可見分光光度計(jì)（UV757CRT/PC，上海），在35℃、pH4.8條件下，以每分鐘使1 mmol的ABTS氧化所需的酶量為一個(gè)活力單位，已知420 nm處ABTS摩爾消光系數(shù)ε＝3.6×10-4[(mol/L)-1cm-1]。

1.5 漆酶酶學(xué)特性分析

1.5.1 最適反應(yīng)條件

最適溫度：測定在30～90℃范圍內(nèi)，pH4.8條件下的漆酶活力。以最高漆酶活力為對照（100%），以相對酶活力對溫度作圖，得漆酶氧化ABTS的最適溫度。

最適pH：測定在 pH1.0～5.5范圍內(nèi)，35℃條件下的漆酶活力。以最高漆酶活力為對照（100%），以相對酶活力對pH作圖，得漆酶氧化ABTS的最適pH。

1.5.2 穩(wěn)定性

熱穩(wěn)定性：將等濃度的漆酶，在pH4.8條件下，30～70℃范圍內(nèi)不同溫度下保溫3 h。定時(shí)取樣，測定35℃、pH4.8條件下的殘余漆酶活力，以原酶液的漆酶活力為對照（100%），以相對酶活力對溫度作圖，得漆酶氧化ABTS的熱穩(wěn)定性。

酸穩(wěn)定性：將等濃度的漆酶，在30℃條件下，pH3.0～7.0范圍內(nèi)不同pH下保溫24 h。測定35℃、pH4.8條件下的殘余漆酶活力，以原酶液的漆酶活力為對照（100%），以相對酶活力對pH作圖，得漆酶氧化ABTS的酸穩(wěn)定性。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果與討論

2.1 伴生介質(zhì)漆酶生產(chǎn)優(yōu)化

取兩組平行實(shí)驗(yàn)均值，利用軟件Origin 8.0擬合曲線，誤差棒表示。

2.1.1 培養(yǎng)基對發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響

圖1a是不同碳源對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。以麥芽糖作碳源時(shí)，菌株NFZH-1漆酶產(chǎn)量最高，達(dá)18.9 U/mL。這與麥芽糖酶分泌過程中誘導(dǎo)了漆酶的產(chǎn)生有關(guān)。以淀粉作碳源時(shí)，菌株NFZH-1漆酶產(chǎn)量次之。較麥芽糖代謝，血紅密孔菌NFZH-1缺少了淀粉酶，使淀粉無法高效地轉(zhuǎn)化為葡萄糖，導(dǎo)致漆酶產(chǎn)量相對較低。以蔗糖作碳源時(shí)，漆酶產(chǎn)量最低。蔗糖由α-葡萄糖和果糖脫水縮合而成，相對于葡萄糖而言，果糖不易被菌株NFZH-1吸收利用，因而漆酶產(chǎn)量較低?？傊?，以兩分子葡萄糖通過α-1,4-糖苷鍵連接構(gòu)成的麥芽糖最適合菌株NFZH-1的漆酶生產(chǎn)。

圖1b是麥芽糖濃度對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。麥芽糖濃度低時(shí)，菌株生長受到抑制，漆酶活力較低。但隨著麥芽糖濃度增加，菌株生長得到了促進(jìn)，漆酶產(chǎn)量逐漸增高。當(dāng)麥芽糖濃度為13.5 g/L時(shí)，菌株NFZH-1發(fā)酵漆酶活力最高，達(dá)21.2 U/mL。繼續(xù)增加麥芽糖濃度，菌株生長過于茂盛，搖瓶中營養(yǎng)物質(zhì)過多用于自身繁殖，而忽略了菌株次級代謝。同時(shí)生長繁茂的菌株使搖瓶中液體粘度增大，降低了其傳質(zhì)效率[14]，使漆酶活力降低。

圖1c是不同氮源對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。有機(jī)氮源和無機(jī)氮源孰優(yōu)孰劣一直存在著爭議[15]。將有機(jī)氮源和無機(jī)氮源組合施用效果較佳，近年來已被業(yè)內(nèi)逐漸認(rèn)可[16]。在有機(jī)氮源比較中，酒石酸銨較尿素促進(jìn)了菌株NFZH-1漆酶的生產(chǎn)；在無機(jī)氮源比較中，硫酸銨較硝酸銨有利于菌株NFZH-1漆酶的分泌。因此，選擇酒石酸銨與硫酸銨的組合作為血紅密孔菌NFZH-1液態(tài)發(fā)酵的氮源。

圖1d是三種誘導(dǎo)劑對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。愈創(chuàng)木酚和2,5-二甲基苯胺作誘導(dǎo)劑時(shí)，菌株NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量均有所提高。與劉志鈺研究一致，愈創(chuàng)木酚是較優(yōu)的誘導(dǎo)劑[17]，較無誘導(dǎo)劑，漆酶活力提高了12.3%，達(dá)23.7 U/mL。小分子芳香族誘導(dǎo)劑通常在苯環(huán)上存在羥基、氨基或羧基等，在發(fā)酵過程中易與漆酶酶蛋白結(jié)合，刺激微生物RNA轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)酶蛋白的合成和分泌，提高漆酶產(chǎn)量[18]。然而，小分子芳香族化合物同時(shí)作為底物參與漆酶的催化氧化，生成的副產(chǎn)物抑制了微生物的生長[19]，如血紅密孔菌利用阿魏酸代謝產(chǎn)香草醛，而產(chǎn)生的香草醛抑制了漆酶的生產(chǎn)[20]。

圖1e是愈創(chuàng)木酚濃度對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。隨著愈創(chuàng)木酚濃度增加，漆酶產(chǎn)量逐漸提高。當(dāng)愈創(chuàng)木酚濃度為0.4 mmol/L時(shí)，漆酶活力達(dá)到最大值，為23.9 U/mL。隨著誘導(dǎo)劑濃度繼續(xù)升高，漆酶活力逐漸下降。過高的誘導(dǎo)劑濃度影響了微生物細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，改變了細(xì)胞膜通透性，抑制了微生物生長[21]。

圖1 液態(tài)培養(yǎng)基對伴生介質(zhì)漆酶生產(chǎn)的影響a. 碳源；b. 麥芽糖濃度；c. 氮源；d. 誘導(dǎo)劑；e. 愈創(chuàng)木酚濃度對照培養(yǎng)基：200 g/L土豆浸出液，10.8 g/L葡萄糖，0.1 g/L (NH4)2SO4，0.125 g /L酒石酸銨，0.1 g/L酵母浸膏，2.7 g/L無機(jī)鹽，1 m g/L維生素B1和1 g/L Tween-80，無誘導(dǎo)劑

2.1.2 發(fā)酵條件對發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響

圖2a是溫度對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。20℃時(shí)，發(fā)酵液中未發(fā)現(xiàn)漆酶，低溫抑制了菌株生長。隨著溫度的上升，微生物細(xì)胞內(nèi)化學(xué)和酶促反應(yīng)都以較快的速度進(jìn)行，菌株生長加快，酶蛋白分泌增多，28℃時(shí)漆酶產(chǎn)量達(dá)到了最高值。菌株個(gè)體存在其自身的耐受溫度，當(dāng)超過這一溫度，蛋白質(zhì)、核酸和細(xì)胞等會(huì)受到不可逆的損害，細(xì)胞機(jī)能急劇下降[22]。繼續(xù)升高溫度，漆酶產(chǎn)量逐漸降低。由此可知，菌株NFZH-1的最適產(chǎn)漆酶溫度為28℃。

圖2b是pH對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。血紅密孔菌NFZH-1產(chǎn)漆酶最適初始pH為6.5，此時(shí)漆酶活力可達(dá)24.7 U/mL。當(dāng)培養(yǎng)基初始pH在5.5～7.5時(shí)，菌株NFZH-1漆酶產(chǎn)量均較為理想，可保持在22.2 U/mL以上。漆酶是一種糖蛋白，pH會(huì)影響酶構(gòu)象的穩(wěn)定性；也會(huì)影響菌株的生長，從而影響漆酶的合成[23]。當(dāng)pH＜5.5或＞7.5時(shí)，菌株生長受到抑制，漆酶活力明顯降低。菌株NFZH-1在中性和弱酸性條件下生長較好，具有較高的漆酶生產(chǎn)能力。反之，若pH過低，酸性環(huán)境會(huì)抑制菌株的生長；若pH過高，由于漆酶的合成需要H+的參與，堿性環(huán)境會(huì)抑制漆酶的代謝。

圖 2c是裝液量對血紅密孔菌 NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。菌株 NFZH-1產(chǎn)漆酶最適裝液量為60 mL/250 mL，此時(shí)漆酶活力最高。增加裝液量，菌株NFZH-1分泌漆酶能力逐漸下降，這與搖瓶中溶解氧減少有關(guān)。菌株NFZH-1為好氧菌，菌株的生長及相關(guān)酶的分泌都需要氧的參與。40 mL/250 mL裝液量時(shí)，漆酶活力反而下降。裝液量較少，次級代謝產(chǎn)物不斷積累，使發(fā)酵后期培養(yǎng)液中毒性物質(zhì)濃度過高，抑制了菌株生長和漆酶分泌[24]。

圖2d是接種量對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。接種量0.5 mL時(shí)，漆酶產(chǎn)量較低，隨著接種量增加，漆酶產(chǎn)量快速增加。接種量的增加，促進(jìn)了菌株的生長繁殖，提高了漆酶產(chǎn)量。接種量2.5 mL時(shí)，漆酶產(chǎn)量達(dá)最高，為26.7 U/mL。繼續(xù)增加接種量，漆酶產(chǎn)量呈緩慢下降趨勢。接種量過大，菌株生長過快，搖瓶中溶解氧不斷減少。同時(shí)，對于一定的培養(yǎng)基組成和含量，隨著接種量的不斷增大，營養(yǎng)成分已不能滿足菌株的生長需求，從而抑制了微生物的代謝，減少了漆酶的產(chǎn)量。

圖2e是培養(yǎng)時(shí)間對血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵漆酶產(chǎn)量的影響。漆酶生產(chǎn)優(yōu)化前，漆酶活力隨培養(yǎng)時(shí)間延長逐漸增大，最高漆酶活力出現(xiàn)在發(fā)酵第八天，為13.7 U/mL，繼續(xù)延長發(fā)酵時(shí)間，漆酶活力略有降低。漆酶的產(chǎn)生與菌體的生長相關(guān)聯(lián)。菌體進(jìn)入對數(shù)期，漆酶開始大量分泌；菌體進(jìn)入穩(wěn)定期，漆酶活力達(dá)到最高；菌體進(jìn)入衰亡期，漆酶產(chǎn)量逐漸降低。漆酶生產(chǎn)優(yōu)化后，漆酶活力隨發(fā)酵時(shí)間延長逐漸增大，最高漆酶活力出現(xiàn)在發(fā)酵第七天，為26.1 U/mL，繼續(xù)延長發(fā)酵時(shí)間，漆酶活力略有降低。經(jīng)培養(yǎng)基和發(fā)酵條件優(yōu)化，血紅密孔菌NFZH-1發(fā)酵周期縮短一天，最高漆酶活力提高91%。血紅密孔菌NFZH-1經(jīng)發(fā)酵優(yōu)化，漆酶活力為26.1 U/mL，較非伴生介質(zhì)漆酶活力仍有較大差距[25]。這可能是由于伴生介質(zhì)3-HAA作為底物參與漆酶催化氧化，抑制了菌株NFZH-1的漆酶生產(chǎn)。為研究伴生介質(zhì)3-HAA對漆酶生產(chǎn)的抑制作用，將結(jié)合伴生介質(zhì) 3-HAA的代謝，進(jìn)一步綜合系統(tǒng)地完善伴生介質(zhì)漆酶的生產(chǎn)，以實(shí)現(xiàn)伴生介質(zhì)漆酶體系在木質(zhì)纖維生物轉(zhuǎn)化上的經(jīng)濟(jì)可行性。

圖2 發(fā)酵條件對伴生介質(zhì)漆酶生產(chǎn)的影響a, 溫度；b，pH；c，裝液量；d，接種量；e，培養(yǎng)時(shí)間對照發(fā)酵條件：28 ℃，170 r/min (Φ 18 mm)，pH5.5，裝液量50 mL，接種量5.0 mL，培養(yǎng)時(shí)間7天

2.2 伴生介質(zhì)漆酶酶學(xué)特性

2.2.1 最適反應(yīng)條件

圖3a是反應(yīng)溫度對漆酶活力的影響。伴生介質(zhì)漆酶最適反應(yīng)溫度為70℃，并在50～85℃范圍內(nèi)均具有較高的漆酶活力（相對酶活力80%以上）。真菌漆酶最適反應(yīng)溫度一般在40～70℃范圍內(nèi)[26-28]，血紅密孔菌NFZH-1所產(chǎn)漆酶最適反應(yīng)溫度為70℃。該漆酶在較高溫度仍具有較高的漆酶活力，與灰樹花漆酶相似，屬耐熱漆酶，可滿足工業(yè)高溫環(huán)境的需求[29]。

圖3b是反應(yīng)pH對漆酶活力的影響。pH2.5～4.5時(shí)，伴生介質(zhì)漆酶相對活力保持在80%以上，并在pH3.5時(shí)呈現(xiàn)最大值，與漆酶等電點(diǎn)一般出現(xiàn)在3.5是一致的[3,30]。當(dāng)pH小于1.5和大于4.5時(shí)，漆酶活力快速下降，真菌漆酶在強(qiáng)酸和堿等極端環(huán)境中易失活[31]。

圖3 伴生介質(zhì)漆酶最適反應(yīng)條件（a. 反應(yīng)溫度；b. 反應(yīng)pH）

2.2.2 穩(wěn)定性

圖 4a是溫度對漆酶穩(wěn)定性的影響。隨時(shí)間延長，漆酶活力均逐漸降低，但不同溫度，漆酶活力下降速率不同。溫度不高于50℃時(shí)，保溫3 h，殘余漆酶相對活力保持在70 %以上。溫度升高，酶蛋白變性失活，漆酶熱穩(wěn)定性逐漸降低。在60℃和70℃條件下保溫1 h，殘余漆酶相對活力分別僅為54%和27%，繼續(xù)延長保溫時(shí)間，漆酶活力趨于穩(wěn)定，并保持在較低水平。伴生介質(zhì)漆酶在60℃以下具有較好的熱穩(wěn)定性。

圖4b是pH對漆酶穩(wěn)定性的影響。pH5.0～7.0時(shí)，殘余漆酶相對活力仍保持在70 %以上，其中pH6.0時(shí)，殘余漆酶相對活力最大。pH小于5.0時(shí)，隨著pH降低，殘余漆酶活力迅速下降，pH4.0時(shí)殘余漆酶相對活力僅為22 %，繼續(xù)降低pH，漆酶活力趨于穩(wěn)定，并保持在較低水平。真菌漆酶一般在酸性環(huán)境中具有良好的穩(wěn)定性[32-33]，而伴生介質(zhì)漆酶僅在pH5.0～7.0條件下具有較好的穩(wěn)定性，這與低pH條件下，漆酶與伴生介質(zhì)的相互作用有關(guān)。

圖4 伴生介質(zhì)漆酶穩(wěn)定性（a. 溫度；b. pH）

3 結(jié)論

1）血紅密孔菌NFZH-1為伴生介質(zhì)漆酶高產(chǎn)菌株，經(jīng)培養(yǎng)基和發(fā)酵條件優(yōu)化，漆酶活力提高91%，達(dá)26.1 U/mL。

2）伴生介質(zhì)漆酶具有耐熱性，在50～85℃范圍內(nèi)具有較高的漆酶活力，且在60℃以下具有較好的熱穩(wěn)定性。

3）伴生介質(zhì)漆酶缺乏耐酸性，雖然在pH2.5～4.5范圍內(nèi)具有較高的漆酶活力，但在pH＜5.0時(shí)缺乏較好的酸穩(wěn)定性。

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