秦明明，朱文嬌，吳曉燕，鄭婷婷，陶青松，浦 春

(1.皖南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院 弋磯山醫(yī)院 檢驗科，安徽 蕪湖 241001;2.皖南醫(yī)學院 檢驗學院，安徽 蕪湖 241002)

心腦血管疾病是當今世界導致中老年死亡的主要原因，在我國，心腦血管疾病患病率呈逐年上升趨勢，目前估計有大約3億心腦血管疾病患者[1]。缺血性心腦血管疾病的主要病理基礎是動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS),目前炎癥和免疫損傷是AS多種學說中最為重要和被廣泛認可的發(fā)病機制，貫穿整個疾病的進程[2]。脂質代謝的異常，尤其是LDL和總膽固醇(total cholesterol，TC)的異常是AS最重要的危險因素。相關研究表明，LDL的亞型組分小而密低密度脂蛋白(small dense low-density lipoprotein，sdLDL)與心血管疾病的關系更為密切[3]，比LDL更適合作為診斷冠狀動脈性心臟病標志物[4]。本研究主要通過比較sdLDL與其他診斷指標在預測AS方面的價值，及其與AS相關危險因素和血脂指標的相關性，探討sdLDL作為AS的預測指標在臨床的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2016年9月～2017年9月在皖南醫(yī)學院弋磯山醫(yī)院就診，臨床診斷為AS并經(jīng)血管造影或磁共振顯像血管造影證實的患者130例(男性72例，女性58例)，動脈粥樣硬化的診斷標準是根據(jù)美國心臟學會(AHA)2012年發(fā)布的相關指標，AS患者的年齡為37～83歲，平均年齡(61.64±10.79)歲；同期在我院體檢中心隨機抽取63例(男性40例，女性23例)健康體檢者作為對照組，選取的所有健康對照都無AS病史，且體檢各項指標都在正常范圍之內，無對檢測結果存在影響的肝腎功能等疾病。對照組的年齡為38～81歲，平均年齡(61.91±11.92)歲。兩組患者的性別、年齡等一般情況比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 儀器與試劑 小而密低密度脂蛋白膽固醇(small dense low density lipoprotein cholesterol，sdLDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、甘油三酯(triglyceride，TG)、TC和超敏C反應蛋白(high sensitive C reactive protein，hs-CRP)的檢測使用的是日立7600全自動生化分析儀。LDL-C、TC、TG檢測試劑盒均來自北京利德曼生化股份有限公司；hs-CRP檢測試劑盒來自德賽診斷系統(tǒng)(上海)有限公司；sdLDL-C檢測試劑盒來自北京九強生物技術股份有限公司。hs-CRP的檢測原理是顆粒增強免疫透射比濁固定時間2點測定法；TG為GPO-PAP法；TC為CHOD-POD法；LDL-C為直接法-表面活性劑清除法；sdLDL-C為過氧化物酶法。

1.3 方法 所有門診或住院的AS患者均禁食12 h后于次日晨6～8點，前臂橈靜脈抽血2～3 mL置于黃色分離膠真空管，立即送到檢驗科，在離心機上以4000 r/min的速度離心10 min，分離血清，置-80 ℃冰箱中保存。按照日立7600全自動生化分析儀操作規(guī)程及試劑盒操作說明書對血清標本進行檢測。檢測結果大于對照參考值范圍上限即判斷為陽性。

2 結果

2.1 AS組與健康對照組檢測結果比較 AS組的sdLDL-C、LDL-C、TC、TG及hs-CRP均高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)，如表1。

項目/分組例數(shù)sdLDL-CLDL-CTCTGhs-CRPAS組1301.15±0.423.14±0.665.33±0.971.89±1.059.32±9.27健康對照組630.66±0.242.28±0.704.34±0.711.21±0.455.85±3.02t10.338.308.006.253.87P0.0000.0000.0000.0000.000

注：sdLDL-C、LDL-C、TC、TG的單位為mol/L;hs-CRP的單位為mg/L。

2.2 不同指標對AS的診斷價值比較 sdLDL-C的靈敏度52.31%，特異度95.24%；LDL-C的靈敏度44.62%，特異度84.13%。而TC、TG、hs-CRP的靈敏度更低。通過ROC曲線分析顯示，sdLDL-C對AS的診斷效能最高，其次是LDL-C和TC，結果如圖1。

2.3 sdLDL-C與AS危險因素的相關性 AS患者血清中sdLDL-C水平在AS危險因素(性別、年齡、吸煙、飲酒、高血壓)之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。如表2。

2.4 sdLDL-C和LDL-C與冠脈病變數(shù)量的相關性 通過比較130例AS患者中74例冠狀動脈粥樣硬化患者的冠脈病變數(shù)量與sdLDL-C和LDL-C的相關性，發(fā)現(xiàn)sdLDL-C和LDL-C與冠脈病變的程度無顯著相關，如表3。

圖1 不同指標的ROC曲線

表2 sdLDL-C與AS危險因素的相關性

影響因素nsdLDL-C/(mol/L)tP性別0.3560.723 男721.14±0.42 女581.16±0.43年齡/歲0.9480.345 ≤60631.19±0.46 >60671.12±0.39吸煙0.5980.551 是271.11±0.45 否1021.16±0.42飲酒0.3950.694 是351.13±0.42 否951.16±0.43高血壓1.2030.231 是891.18±0.41 否411.08±0.44

2.5 sdLDL-C與相關血脂指標的相關性 sdLDL-C與LDL-C(r=0.603,P<0.05)、TC(r=0.651,P<0.05)之間存在中度正相關關系，而sdLDL-C與TG呈低度正相關(r=0.329,P<0.05)。如圖2。

表3 sdLDL-C和LDL-C與冠狀動脈病變程度的相關性

病變程度nsdLDL-C/(mol/L)LDL-C/(mol/L)1支病變271.03±0.393.10±0.472支病變211.16±0.533.00±0.853支病變160.93±0.442.80±0.674支病變101.06±0.353.48±1.31F0.5610.837P0.6430.481

3 討論

目前，在臨床上，心腦血管疾病尚缺乏簡單、安全、有效的診斷手段，只能通過血管造影、CT或核磁共振成像下造影進行診斷。由于心腦血管疾病的發(fā)生隱秘、起病急驟、病情進展快，短時間內就可對患者造成嚴重的傷害，甚至死亡。AS是導致缺血性心腦血管疾病，如冠心病、腦梗死等最主要的病理基礎，慢性炎癥[5]和脂質代謝失調[6](尤其是LDL和TC升高，HDL降低)是AS最重要的發(fā)病基礎。

C反應蛋白(C-reactive protein,CRP)被普遍認為是一種非特異性的炎癥標志物，但是，隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)CRP可以直接參與炎癥與AS等心血管疾病，是心血管疾病最有力的預示與危險因子。尤其是hs-CRP作為冠心病的獨立危險因素，與冠心病的臨床分型和心腦血管的不良事件具有密切聯(lián)系[7]。血脂中各組分,如LDL、HDL、TC、TG等致AS的作用差別較大，其中以LDL的作用最為重要。根據(jù)LDL顆粒的密度和大小不同，Lipoprint脂蛋白分析儀可以將其分為7個亞組分,其中LDL3～LDL7以小而密LDL為主，近年來的研究表明，sdLDL比LDL與動脈粥樣硬化的關系更為密切[3,8]。

A:LDL-C；B:TC；C:TG。

圖2 sdLDL-C與相關血脂指標的相關性

本研究中，AS組中sdLDL-C、LDL-C、TC、TG及hs-CRP均高于健康對照組，表明上述指標的升高對AS的預測均有重要的價值。而通過進一步對結果的分析發(fā)現(xiàn)，TG及hs-CRP的水平在AS組和健康對照組有較多交叉部分，相反sdLDL-C、LDL-C、TC在兩組之間的交叉相對較少，表明sdLDL-C、LDL-C、TC對AS的預測價值更好。另外，我們通過對相關指標靈敏度和特異度分析發(fā)現(xiàn)，相比于其他指標，sdLDL-C在預測AS方面具有較好的靈敏度(52.31%)和特異度(95.24%)。ROC曲線可以較好地綜合評價兩種指標的診斷效能，曲線下面積(area under curve,AUC)越大，表明其診斷效能越好。本研究結果中，sdLDL-C的AUC為0.844，高于其他相關指標(LDL-C、TC、TG及hs-CRP)，提示相比于其他血脂指標和hs-CRP，sdLDL-C對AS的預測價值更加準確可靠。此結果與相關研究一致[9]。年齡[10]、BMI、吸煙、飲酒、高血壓、糖尿病等普遍被認為是AS發(fā)生的高危因素，對于AS的發(fā)生、發(fā)展具有重要的作用。通過分析sdLDL-C與AS患者的性別、年齡、吸煙、飲酒、高血壓相關性，結果顯示，sdLDL-C與AS患者的性別、年齡、吸煙、飲酒、高血壓無顯著相關，提示sdLDL-C是預測AS發(fā)生的獨立危險因素，其水平變化不易受其他因素的影響。

為了比較sdLDL-C和LDL-C對冠心病冠脈病變的數(shù)量的評價價值，我們按照冠脈病變的數(shù)量將冠心病患者分為4組，結果顯示4組冠心病患者的血清sdLDL-C和LDL-C沒有顯著差異，表明sdLDL-C與冠心病冠脈病變的數(shù)量無顯著相關。這也提醒我們，sdLDL-C水平升高可以對AS的發(fā)生進行預測，而sdLDL-C水平的高低卻與AS的嚴重程度無顯著相關。通過對sdLDL-C與相關血脂指標的相關性分析，結果表明，sdLDL-C與LDL-C、TC具有中度的正相關，而sdLDL-C與TG具有低度相關。這提示我們sdLDL-C、sdLDL-C/LDL-C或sdLDL-C/TC比值的同時升高更能準確預測AS的發(fā)生；sdLDL-C、LDL-C、TC的聯(lián)合檢測更能明顯提高臨床對AS的預測。此結果與相關報道相符[11]。隨著sdLDL-C檢測技術的發(fā)展，新型均相酶法檢測sdLDL-C試劑盒性能穩(wěn)定，操作簡單快速，重復性好，適用于自動化操作，基本符合臨床的要求[12]，為sdLDL-C在心腦血管疾病方面的臨床檢測提供了可靠的保證。

綜上所述，sdLDL不易受其他因素的影響，對于預測AS具有較高的靈敏度和特異度，其與LDL-C、TC聯(lián)合檢測更能準確預測AS的發(fā)生。因此，血清中sdLDL的檢測對于臨床診斷AS具有重要的臨床意義，有望作為臨床常規(guī)篩查AS的血清指標。

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