王志敏 ，徐亞歐 ，楊 磊 ，徐瓏洋 ，王英明

（1.西南民族大學(xué)青藏高原研究院，四川 成都 610041；2.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川 成都 610041）

海拔高度對于生命活動的影響是巨大的，在高海拔低壓缺氧的環(huán)境下，生命的遺傳基因和形態(tài)易發(fā)生變化，其中低氧環(huán)境的影響力最大。關(guān)于高海拔低氧環(huán)境動物的生理病理現(xiàn)象，國外的一些期刊中已有較多的報道［1-2］。張浩等針對海拔高度對雞胚胎影響也做過相關(guān)研究［3-4］。

藏雞是我國的高原家禽品種，長期生活在高原地區(qū)，適應(yīng)了高海拔環(huán)境，具有許多優(yōu)良品質(zhì)，已培育為優(yōu)良的養(yǎng)雞業(yè)品種。高原藏雞血液的生理生化指標與低海拔地區(qū)的雞存在顯著差異性，為了進一步了解藏雞的血液特殊性，該研究通過比較高海拔藏雞與低海拔藏雞的血液生理、生化指標的差別，探索藏雞在不同海拔高度下生長的適應(yīng)性差異，從而更直觀地了解藏雞的遺傳優(yōu)勢，并加以合理地開發(fā)利用和保護其遺傳資源。

1 試驗材料與方法

1.1 實驗動物

該研究所用藏雞來源于不同海拔地區(qū)，用于比較在不同海拔的條件下藏雞血液生理、生化指標對環(huán)境適應(yīng)性的變化。在四川省彭州市新興鎮(zhèn)獅山村九組成都美麗田園農(nóng)業(yè)有限公司叢林藏雞種雞場（平均海拔1 000 m）采集成年健康藏雞50只，其中公雞25只，母雞25只，以下稱為低海拔藏雞，低海拔藏雞是由生長于海拔高度為3 800 m處的西藏藏雞經(jīng)過9年的選育與培育而得到的；在四川省甘孜州康定縣姑咱鎮(zhèn)（平均海拔2 700 m）采集成年健康藏雞60只，其中公雞30只，母雞30只，以下稱甘孜州藏雞；在西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所曲尼帕綜合實驗基地（平均海拔3 800 m）采集成年健康藏雞20只，其中公雞10只，母雞10只，以下稱西藏藏雞。

1.2 血樣采集

清晨喂食、喂水前采用翼下靜脈采血法采2份血樣，一份用內(nèi)含EDTA2K抗凝劑的試管采集約1 mL的血液，用來測定血液生理指標；另一份用非抗凝血管采集約3 mL的血液，用來測定血液生化指標。

1.3 實驗儀器

采血管（江蘇宇力醫(yī)療器械有限公司）；靜脈采血針（江西富爾康實業(yè)集團有限公司）；TEK-ⅡMINI全自動三分群血液分析儀（江西特康科技有限公司）；TC6010L全自動生化分析儀（上海特康科技有限公司）。

1.4 試驗方法

1.4.1 血液生理指標測定：甘孜州藏雞和低海拔藏雞所采的抗凝血使用TEK-ⅡMINI全自動三分群血液分析儀測定血液生理指標，測定項目包括紅細胞數(shù)（RBC）、血紅蛋白濃度（HGB）、平均紅細胞體積（MCV）、平均血紅蛋白量（MCH）、紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細胞分布寬度標準差（RDW-SD）、紅細胞分布寬度 CV 值（RDW-CV）、血小板數(shù)量（PLT）、血小板分布寬度（PDW）和平均血小板體積（MPV）共10項指標。西藏藏雞的生理指標委托西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所于西藏自治區(qū)人民醫(yī)院測得 RBC、HGB、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD和 RDW-CV 值共 7項指標。

1.4.2 血液生化指標：甘孜州藏雞和低海拔藏雞所采的非抗凝血經(jīng)過1 500 r/min離心20 min分離血清處理后，采用TC6010L全自動生化分析儀測定血液生化指標，測定項目包括總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和堿性磷酸酶（ALP）共8項指標。西藏藏雞的生化指標委托西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所于西藏自治區(qū)人民醫(yī)院測得TP、ALB、GLO、GLU和TC值共5項指標。

1.4.3 數(shù)據(jù)處理：對測得的試驗數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計分析軟件（SPSS 13.0）進行獨立性t檢驗分析，測定結(jié)果用“平均值±標準誤”（Mean±SE）表示，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著，P＞0.05表示無顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同海拔地區(qū)藏雞血液生理指標測定結(jié)果比較

2.1.1 西藏藏雞和甘孜州藏雞的血液生理指標測定結(jié)果比較：西藏藏雞和甘孜州藏雞血液生理指標比較結(jié)果見表1。西藏藏雞和甘孜州藏雞的血液生理指標之間除紅細胞分布寬度CV值（RDWCV）差異不顯著（P＞0.05），血紅蛋白濃度（HGB）表現(xiàn)出差異顯著（P＜0.05）外，其余各項指標均表現(xiàn)出極顯著差異（P＜0.01）。

紅細胞數(shù)（RBC）、血液中血紅蛋白濃度（HGB）含量及紅細胞平均體積（MCV）均表現(xiàn)出西藏藏雞高于甘孜州藏雞。而平均血紅蛋白量（MCH）及紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）則表現(xiàn)為西藏藏雞低于甘孜州藏雞。西藏藏雞的紅細胞體積異質(zhì)性變異大于甘孜州藏雞紅細胞體積異質(zhì)性。

西藏藏雞公、母雞之間的比較顯示，二者紅細胞數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）分別達到顯著（P＜0.05）和極顯著（P＜0.01）差異的水平，其余指標均差異不顯著。甘孜州藏雞公、母雞之間的比較顯示，除紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCMH）不顯著外（P＞0.05），其余各項指標均表現(xiàn)出差異極顯著（P＜0.01）。說明即使在同一海拔高度藏雞公、母雞之間的血液生理指標存在顯著差異。公雞的生理指標均高于母雞。

表1 西藏藏雞與甘孜州藏雞血液生理指標對比

表2 西藏藏雞與低海拔藏雞血液生理指標對比

2.1.2 西藏藏雞和低海拔藏雞的血液生理指標測定結(jié)果比較：西藏藏雞和低海拔藏雞的血液生理指標比較結(jié)果見表2。西藏藏雞和低海拔藏雞的血液生理指標之間比較，除紅細胞分布寬度CV值（RDW-CV）差異不顯著外，其余各項指標均表現(xiàn)出差異極顯著（P＜0.01）。說明分布于西藏3 800 m海拔的藏雞與分布于1 000 m低海拔的藏雞比較其血液生理指標差異達到極顯著水平（P＜0.01）。其各項指標的變化規(guī)律與西藏藏雞和甘孜州藏雞的各項生理指標變異一致。

低海拔（1 000 m）藏雞公、母雞之間的比較顯示，除紅細胞分布寬度標準差（RDW-SD）不顯著（P＞0.05）外，其余各項指標均表現(xiàn)出差異極顯著（P＜0.01）。說明在低海拔（1 000 m）地區(qū)藏雞公、母雞之間的血液生理指標與高海拔類似，公雞的大多數(shù)生理指標高于母雞。

2.1.3 甘孜州藏雞和低海拔藏雞的血液生理指標測定結(jié)果比較：甘孜州藏雞與低海拔藏雞生理指標對比結(jié)果見表3。由表3可見，甘孜州藏雞的血液生理指標的值均高于低海拔藏雞。

甘孜州藏雞和低海拔藏雞種內(nèi)RBC差異極顯著（P＜0.01），二者雌雄個體和總體雞群種間RBC差異極顯著（P＜0.01）。甘孜州藏雞和低海拔藏雞種內(nèi)HGB差異極顯著（P＜0.01），種間雌雞HGB差異顯著（P＜0.05），種間雄雞HGB差異極顯著（P＜0.01）。甘孜州藏雞種內(nèi)MCV差異極顯著（P＜0.01），甘孜州藏雞和低海拔藏雞雌雄個體和總體雞群種間MCV無顯著差異（P＞0.05）。

甘孜州藏雞MCH低于低海拔藏雞，且差異極顯著（P＜0.01），低海拔藏雞種內(nèi)MCH值差異極顯著（P＜0.01），甘孜州藏雞種內(nèi)MCH值差異顯著（P＜0.05）。甘孜州藏雞MCHC低于低海拔藏雞，差異顯著（P＜0.05），低海拔藏雞種內(nèi)MCHC差異極顯著（P＜0.01）。

表3 甘孜州藏雞與低海拔藏雞血液生理指標對比

表4 西藏藏雞、甘孜州藏雞與低海拔藏雞血液生理指標對比

甘孜州藏雞總體雞群RDW-SD值極顯著高于低海拔藏雞（P＜0.01），二者RDW-CV值無顯著差異（P＞0.05）。甘孜州藏雞與低海拔藏雞PLT差異顯著（P＜0.05）， 二者 PDW 無顯著差異（P＞0.05），MPV 差異顯著（P＜0.05）。

由表4可見，西藏藏雞（平均海拔3 800 m）、甘孜州藏雞（平均海拔2 700 m）和低海拔藏雞（平均海拔1 000 m）之間的比較顯示，紅細胞數(shù)（RBC）、血液中血紅蛋白（HGB）含量及平均紅細胞體積（MCV）均為西藏藏雞高于甘孜州藏雞，甘孜州藏雞又高于低海拔藏雞，表現(xiàn)出隨海拔高度的升高而升高的變化趨勢。

而平均血紅蛋白量（MCH）及紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）則為西藏藏雞低于甘孜州藏雞，甘孜州藏雞又低于低海拔藏雞，表現(xiàn)出隨海拔高度的升高而降低的變化趨勢。

表達紅細胞體積異質(zhì)性的參數(shù) “紅細胞分布寬度標準差（RDW-SD）”顯示出西藏藏雞的紅細胞體積異質(zhì)性變異大于甘孜州藏雞紅細胞體積異質(zhì)性。而甘孜州藏雞紅細胞體積異質(zhì)性變異又大于低于低海拔藏雞紅細胞體積異質(zhì)性，呈現(xiàn)出隨海拔高度的升高而加大的變化趨勢。

紅細胞分布寬度CV值（RDW-CV）在各類群之間無顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 不同海拔地區(qū)藏雞血液生化指標測定結(jié)果比較

2.2.1 西藏藏雞和甘孜州藏雞的血液生化指標測定結(jié)果比較：西藏藏雞的血液生化指標包括總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球 蛋白（GLO）、葡 萄 糖（GLU）和總膽固醇（TC），西藏藏雞與甘孜州藏雞血液生化指標對比結(jié)果見表5。由表5可見，西藏藏雞血液的 TP、ALB、GLO、GLU和 TC值均高于甘孜州藏雞，且差異極顯著（P＜0.01）。西藏藏雞群內(nèi)雌雄對比數(shù)據(jù)顯示，其各項指標無顯著差異（P＞0.05）。而甘孜州藏雞的群內(nèi)除GLU值雌雄間差異極顯著（P＜0.01）外，其余指標均無顯著差異（P＞0.05）。

表5 西藏藏雞與甘孜州藏雞血液生化指標對比

表6 西藏藏雞與低海拔藏雞血液生化指標對比

表7 甘孜州藏雞與低海拔藏雞血液生化指標對比

2.2.2 西藏藏雞和低海拔藏雞的血液生化指標測定結(jié)果比較：西藏藏雞與低海拔藏雞生化指標對比結(jié)果見表6。由表6可見，西藏藏雞血液的TP、ALB、GLO、GLU和TC值均高于低海拔藏雞，且差異極顯著（P＜0.01）。西藏藏雞及低海拔藏雞群內(nèi)雌雄間各項指標均無顯著差異（P＞0.05）。

2.2.3 甘孜州藏雞和低海拔藏雞的血液生化指標測定結(jié)果比較：甘孜州藏雞與低海拔藏雞血液生化指標對比結(jié)果見表7。由表7可見，甘孜州藏雞血液中甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）和堿性磷酸酶（ALP）均極顯著高于低海拔藏雞（P＜0.01）。其余各項指標均無顯著差異（P＞0.05）。

甘孜州藏雞群內(nèi)公雞谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）及葡萄糖（GLU）含量極顯著（P＜0.01）地高于母雞的含量，其余指標公母雞之間無顯著差異（P＞0.05）。低海拔藏雞群內(nèi)公母間各項指標均無顯著差異（P＞0.05）。

由表8數(shù)據(jù)可見，西藏藏雞的血液總蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖和總膽固醇含量均高于甘孜藏雞和低海拔藏雞，且差異極顯著（P＜0.01）。甘孜州藏雞血液中甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）和堿性磷酸酶（ALP）均極顯著高于低海拔藏雞（P＜0.01），其余各項指標均無顯著差異（P＞0.05）。

表8 西藏藏雞、甘孜州藏雞與低海拔藏雞血液生化指標對比

3 討論

3.1 不同海拔地區(qū)藏雞血液生理指標比較

由表中數(shù)據(jù)可以看出，生存環(huán)境對藏雞血液生理指標影響很大，為了適應(yīng)高海拔低壓缺氧環(huán)境，血液紅細胞數(shù)明顯高于低海拔地區(qū)藏雞。高海拔地區(qū)藏雞RBC增多，紅細胞表面積增加，從而使紅細胞可以攜帶更多氧氣，血紅蛋白是負責(zé)運載氧的一種蛋白質(zhì)，因此HGB也隨之增加。佘永新等對藏雞高海拔適應(yīng)性研究表明，藏雞主要是通過增加紅細胞數(shù)目、減少紅細胞體積、降低血液黏滯度、加快血液流速，進而提高其在低氧環(huán)境中的適應(yīng)性［5］。關(guān)于高原環(huán)境下紅細胞增多現(xiàn)象的研究結(jié)果表明，紅細胞數(shù)增多、HGB升高是對高原低氧適應(yīng)的代償反應(yīng)，是為了適應(yīng)低氧環(huán)境提高攜氧能力的應(yīng)對策略［6-7］。該研究對西藏藏雞（平均海拔3 800 m）、甘孜州藏雞（平均海拔2 700 m）和低海拔藏雞（平均海拔1 000 m）的血液生理指標研究表明：紅細胞數(shù)（RBC）、血液中血紅蛋白（HGB）含量及平均紅細胞體積（MCV）的變化規(guī)律隨海拔高度的升高而升高。該研究結(jié)果與孔小艷等對藏豬低氧適應(yīng)性研究——高海拔的藏豬RBC、HGB、MCV均高于低海拔藏豬的相應(yīng)指標，且隨海拔的升高而升高一致［8］。趙雪等對不同海拔高度的藏馬低氧適應(yīng)研究也獲得與該研究同樣的結(jié)果［9］。張浩等對藏雞、矮小隱性白雞同時在高海拔（西藏靈芝）及低海拔（北京）地區(qū)養(yǎng)殖，研究藏雞對高海拔的適應(yīng)機制，結(jié)果表明無論是藏雞還是矮小隱性白雞RBC、HGB均是高海拔高于低海拔，且隨海拔的升高而升高，該結(jié)果與該研究結(jié)果一致［10］。但MCV則表現(xiàn)出無論藏雞還是矮小隱性白雞MCV均是高海拔低于低海拔，且隨海拔的升高而降低，該結(jié)果與該研究結(jié)果相反。因此，關(guān)于隨著海拔的升高藏雞MCV的變化規(guī)律還有待進一步研究。

該研究的另一結(jié)果，平均血紅蛋白量MCH及紅細胞平均血紅蛋白濃度MCHC則表現(xiàn)為西藏藏雞低于甘孜州藏雞，甘孜州藏雞又低于低海拔藏雞，呈現(xiàn)隨海拔高度的升高而降低的變化趨勢。該結(jié)果與張浩的研究結(jié)果一致［11］。

表達紅細胞體積異質(zhì)性的參數(shù) “紅細胞分布寬度標準差（RDW-SD）”顯示出西藏藏雞的紅細胞體積異質(zhì)性變異大于甘孜州藏雞紅細胞體積異質(zhì)性。而甘孜州藏雞紅細胞體積異質(zhì)性變異又大于低于低海拔藏雞紅細胞體積異質(zhì)性，呈現(xiàn)隨海拔高度的升高而加大的變化趨勢。由此可以推斷，藏雞在高海拔比較惡劣的條件下，為適應(yīng)變化較大的氣候及環(huán)境，紅細胞體積變異范圍較大。

該研究結(jié)果表明，在同一海拔高度藏雞公母雞之間的血液生理指標存在顯著差異。公雞的生理指標均高于母雞。該結(jié)果與張浩的研究結(jié)果不一致［12］。

甘孜州藏雞的PLT含量顯著低于低海拔藏雞的原因是低氧使骨髓巨核細胞的數(shù)量減少、質(zhì)量改變，HGB、RBC的增多使脾臟貯留破壞過多，從而消耗了大量 PLT［13］。

3.2 不同海拔地區(qū)藏雞血液生化指標比較

該研究顯示西藏藏雞血液的TP、ALB、GLO、GLU和TC值均高于甘孜州藏雞及低海拔藏雞，且差異極顯著（P＜0.01）。

甘孜州藏雞血液中甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）和堿性磷酸酶（ALP）均極顯著高于低海拔藏雞（P＜0.01）。該結(jié)果與佘永新等報道，藏雞血清堿性磷酸酶活力水平高于低地雞種一致，這與適應(yīng)高原低氧環(huán)境有關(guān)［5］。TP含量包括ALB和GLO，在高海拔低氧環(huán)境下，機體會因缺氧而刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)或淋巴細胞中的某一部分細胞，導(dǎo)致GLO 升高［14］。

陸健等對養(yǎng)殖在低地（江蘇揚州）的藏雞及新?lián)P州雞研究的結(jié)果顯示藏雞血清堿性磷酸酶（ALP）顯著地低于新?lián)P州雞［15］。 這一結(jié)果提示血清堿性磷酸酶（ALP）與高海拔缺氧條件下藏雞的適應(yīng)性有關(guān)。

該研究結(jié)果顯示，在該研究的3個藏雞群內(nèi)雌、雄間各項血液生化指標就總體而言無顯著性差異。

4 結(jié)論

由以上結(jié)果可以得出，藏雞的紅細胞數(shù)（RBC）、血液中血紅蛋白（HGB）含量及平均紅細胞體積（MCV）的變化規(guī)律隨海拔高度的升高而升高，平均血紅蛋白量（MCH）及紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）則表現(xiàn)為隨海拔高度的升高而降低的變化趨勢，從而提高其在低氧環(huán)境中的適應(yīng)性。在同一海拔高度藏雞公母雞之間的血液生理指標存在差異。公雞的生理指標均高于母雞。高海拔藏雞血液的 TP、ALB、GLO、GLU和 TC值均高于低海拔藏雞。同時也說明養(yǎng)殖于四川省彭州市新興鎮(zhèn)獅山村九組成都美麗田園農(nóng)業(yè)有限公司的藏雞經(jīng)過9年的選育與培育對當(dāng)?shù)丨h(huán)境條件已有一定的適應(yīng)。

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