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        松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)營養(yǎng)條件優(yōu)化探討

        2018-04-21 08:10:44陳紹威
        科學(xué)與財富 2018年5期

        陳紹威

        摘 要:松杉靈芝數(shù)子菌綱多孔菌科目中的內(nèi)容,又被稱為木靈芝,多產(chǎn)于黑龍江區(qū)域、吉林區(qū)域與甘肅區(qū)域,具備較高的營養(yǎng)價值與保健價值,對人體有著潤肺平喘、抑制血脂與提升免疫力的作用,在抗腫瘤方面的應(yīng)用較為廣泛。因此,為了滿足人們的健康需求,應(yīng)針對松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)進(jìn)行分析,針對營養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,生產(chǎn)質(zhì)量較高的營養(yǎng)保健產(chǎn)品。

        關(guān)鍵詞:松杉靈芝;液體發(fā)酵培養(yǎng);營養(yǎng)條件優(yōu)化

        在松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)的過程中,需根據(jù)具體內(nèi)容進(jìn)行處理,掌控相關(guān)作用,并利用合理方式分析問題與解決問題,建立多元化與現(xiàn)代化的管理機(jī)制,保證在實(shí)際處理的過程中,針對營養(yǎng)條件進(jìn)行合理優(yōu)化,滿足當(dāng)前的發(fā)展需求。

        1 分析材料與方式

        對于松杉靈芝而言,其生長周期較長,且生長的效率很低,在產(chǎn)品制作的過程中,質(zhì)量呈現(xiàn)不穩(wěn)定的特征,會導(dǎo)致研究效果受到影響。因此,需做好試驗(yàn)工作,利用合理的方式對其處理。

        1.1 試驗(yàn)材料分析

        本次試驗(yàn)主要采用的為松杉靈芝1號菌株,由某生物實(shí)驗(yàn)室對其進(jìn)行保存與處理。所選擇的試劑為葡萄糖試劑、乙醇試劑、蛋白胨試劑、菌母浸膏試劑、蔗糖試劑、瓊脂試劑、磷酸二氫鉀試劑、硫酸鎂試劑、維生素B1。聯(lián)合玉米粉產(chǎn)品、麥麩產(chǎn)品、豆餅粉產(chǎn)品對其處理,并選擇丙酮、無水乙醚對其進(jìn)行研究與試驗(yàn),通過合理方式做好工作。在選擇儀器設(shè)備的過程中,主要應(yīng)用燒杯,三角瓶、往復(fù)式振蕩篩、無菌操作箱、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀設(shè)備、冷凍離心機(jī)設(shè)備、冷凍干燥機(jī)設(shè)備、超凈工作臺設(shè)備、電子分析天平設(shè)備、真空干燥箱設(shè)備等。在實(shí)際使用的過程中,需針對機(jī)械設(shè)備質(zhì)量進(jìn)行全面管理與嚴(yán)格協(xié)調(diào),保證其使用價值,增強(qiáng)管理效果,滿足當(dāng)前的實(shí)際使用要求,達(dá)到預(yù)期的處理目的。

        對于斜面培養(yǎng)基而言,主要使用的為綜合PDA培養(yǎng)基,其中為去皮馬鈴薯(200g)、葡萄糖(20g)、瓊脂(20g)、水(1000ml),在120攝氏度的環(huán)境下滅菌30分鐘。選擇種子培養(yǎng)基,其中為土豆200g、葡萄糖30g、蛋白胨2g、酵母浸膏2g、磷酸二氫鉀(1g)、硫酸鎂(1g)、維生素B1(10mg)1片、水,在120攝氏度的環(huán)境中滅菌30分鐘。在選擇發(fā)酵培養(yǎng)基的過程中,其中為葡糖糖、玉米粉、麥麩、蛋白胨、酵母浸膏、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、維生素B1、水,在120攝氏度的環(huán)境中滅菌30分鐘。

        1.2 試驗(yàn)方式

        在試驗(yàn)的過程中,需做好種子培養(yǎng)工作,明確為液體的發(fā)酵培養(yǎng)方式,全面收集菌絲體,以便于提升試驗(yàn)效果。

        第一,在種子培養(yǎng)的過程中,需針對活化斜面的菌種進(jìn)行分割,使其形成蠶豆大小的塊體,并在無菌環(huán)境中對其進(jìn)行接種,以便于將其融入液體中更好的進(jìn)行培養(yǎng),將液體的劑量控制在250ml,將三角瓶的液量設(shè)置成為80ml,在28攝氏度的環(huán)境中保存七天左右。第二,在對液體發(fā)酵進(jìn)行培養(yǎng)的過程中,可將已經(jīng)培養(yǎng)成功的種子篩選10%的劑量,并接種在500ml劑量的三角瓶中,保證裝液量為180ml,并在相同條件之下對其進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng),時間為六天左右。第三,在收集菌絲的時候,應(yīng)將發(fā)酵液放置在離心杯設(shè)備中,將其規(guī)格設(shè)計(jì)在4000r每分鐘左右,離心的時間為十分鐘,并針對菌絲進(jìn)行沉淀處理,使用蒸餾水對其沖洗,保證實(shí)際處理的效果。同時,還要做好蒸餾水的沖洗工作,將其設(shè)置在六十?dāng)z氏度溫度環(huán)境中衡量重量,做好生物量的計(jì)算工作,保證可以提升處理效果,滿足菌絲的實(shí)際處理符合規(guī)定。第四,在胞外粗多糖提取的過程中,需針對過濾之后的發(fā)酵液實(shí)施真空濃縮處理,使其轉(zhuǎn)變成為原來體積的20%,并在濃縮期間,在發(fā)酵液中添加3倍左右體積的乙醇,保證在4攝氏度環(huán)境中放置處理,在過夜之后,需對發(fā)酵液進(jìn)行離心處理,將規(guī)格設(shè)置在4000r每分鐘左右,離心時間為五分鐘,使其形成沉淀反應(yīng)。針對沉淀冷凍干燥情況,獲得粗多糖提取物,然后對其獲得率進(jìn)行計(jì)算,以此提升處理效果。

        表1 正交實(shí)驗(yàn)因素與水平分析

        2 相關(guān)結(jié)果分析

        在試驗(yàn)之后,需針對結(jié)果進(jìn)行全面的分析,明確各方面要求與原則,利用合理的方式解決問題,創(chuàng)建現(xiàn)代化與多元化的控制機(jī)制,保證能夠創(chuàng)建良好的營養(yǎng)條件。

        2.1 不同碳源對營養(yǎng)條件的影響

        在實(shí)際處理的過程中,可將葡萄糖試劑、可溶性淀粉產(chǎn)品、蔗糖產(chǎn)品、玉米粉產(chǎn)品與乳糖產(chǎn)品等融合在一起,替代培養(yǎng)基中的碳源,并保證其他成分沒有變化,以便于對生物量進(jìn)行測量,保證結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。在實(shí)際培養(yǎng)的過程,不同碳源會對菌絲的生長產(chǎn)生不同影響,應(yīng)對其進(jìn)行合理的分析與明確,根據(jù)菌絲生物量進(jìn)行分析,并對玉米粉與蔗糖等全面了解。雖然將玉米粉作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)不能保證可溶性淀粉的使用效果,但是,能夠提升發(fā)酵液的處理水平,保證菌球的均勻性與合理性,明確具體的內(nèi)容。對于玉米粉而言,其中含有較多核苷酸物質(zhì)與纖維素物質(zhì),可以誘導(dǎo)靈芝中的胞外多糖的良好合成,明確具體的情況。在此期間,需針對培養(yǎng)成本進(jìn)行綜合的探討,明確具體內(nèi)容與要求,并將玉米粉作為碳源進(jìn)行處理,以便于增強(qiáng)各方面的處理效果,協(xié)調(diào)相關(guān)工作之間的關(guān)系。

        2.2 不同氮源對于營養(yǎng)條件的影響

        在對營養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化的過程中,應(yīng)選擇合理的碳源,并對其進(jìn)行嚴(yán)格的控制,將蛋白胨成分、麥麩成分、氯化銨成分、硝酸銨成分等作為液態(tài)培養(yǎng)期間的培養(yǎng)基氮源,利用搖床對其進(jìn)行,在成分不變的情況下,能夠更好的測定生物量與相關(guān)粗多糖的數(shù)量。經(jīng)過相關(guān)研究可以得知,不同氮源對于松杉靈芝液體培養(yǎng)會造成一定影響,應(yīng)合理篩選相關(guān)氮源進(jìn)行處理,保證實(shí)際使用量。對于蛋白胨與麥麩成分而言,在使用期間多糖獲得率較高,由于麥麩成分在實(shí)際采購的過程中成本較高,因此,需對培養(yǎng)基的造價進(jìn)行綜合探討,明確具體的多糖情況,并利用資源控制的方式對其處理,將麥麩作為最主要的氮源進(jìn)行處理,以此增強(qiáng)分析與控制效果,滿足當(dāng)前的發(fā)展需求[1]。

        2.3 無機(jī)鹽對于菌絲生物量的影響

        經(jīng)過相關(guān)研究可以得知,在最合適的氮源與碳源之下,無機(jī)鹽會對菌絲的生物量產(chǎn)生一定影響,應(yīng)明確具體成分的情況,并在成分不變的情況下,測定其中的粗多糖成分,明確含量信息與數(shù)據(jù),保證工作效果。在實(shí)際處理期間,應(yīng)添加少量的無機(jī)鹽成分,對其合理的研究與分析,明確成分特點(diǎn)[2]。

        2.4 正交試驗(yàn)對營養(yǎng)條件的影響

        在實(shí)際培養(yǎng)的過程中,應(yīng)科學(xué)使用正交試驗(yàn)的方式對其處理,利用科學(xué)的培養(yǎng)基方式形成現(xiàn)代化的管理機(jī)制,在與無交試驗(yàn)與正交試驗(yàn)相互作用的情況下,形成準(zhǔn)確的結(jié)果。在此期間,需針對玉米粉的濃度進(jìn)行嚴(yán)格控制,保證麥麩的濃度符合相關(guān)規(guī)定,并合理使用搖瓶的方式對其處理,明確具體多糖獲得率,對其進(jìn)行嚴(yán)格的分析,保證形成良好的營養(yǎng)條件[3]。

        3 結(jié)束語

        對于松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)而言,與傳統(tǒng)培養(yǎng)方式相較的生產(chǎn)周期較短,省工省力,生物利用度高。且容易對其質(zhì)量進(jìn)行控制,只需針對培養(yǎng)液營養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,從而得到優(yōu)質(zhì)的松杉靈芝產(chǎn)品。以便于將松杉靈芝產(chǎn)品應(yīng)用在食品領(lǐng)域、藥品領(lǐng)域與化妝品領(lǐng)域中。

        參考文獻(xiàn)

        [1]于海洋,彌春霞,陳歡等.松杉靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)營養(yǎng)條件優(yōu)化[J].北方園藝,2015(4):152-156.

        [2]李愛欣,許利婷,張術(shù)影等.松杉靈芝發(fā)酵物對乙醇誘導(dǎo)小鼠胃潰瘍的保護(hù)作用研究[J].食品與發(fā)酵科技,2015,51(3):37-40,43.

        [3]于海洋.松杉靈芝多糖的發(fā)酵和提取條件優(yōu)化及抗氧化活性研究[D].牡丹江師范學(xué)院,2015.

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